微波水解衍生高效液相色譜法測定飼料中的氨基酸

任曉宇，裴曉靜，張少云，謝立娜，杜文博，鎖 然

(河北農業大學 食品科技學院，河北 保定 071000)

實驗技術

微波水解衍生高效液相色譜法測定飼料中的氨基酸

任曉宇，裴曉靜，張少云，謝立娜，杜文博，鎖 然*

(河北農業大學 食品科技學院，河北 保定 071000)

建立了一種微波水解衍生高效液相色譜同時測定飼料中17種氨基酸含量的方法。采用2,4-二硝基氯苯作為柱前衍生試劑，利用C18色譜柱分離。二極管陣列檢測器進行檢測，檢測波長為360 nm，并對微波水解時間及溫度進行優化。17 種氨基酸在2.5～50 mg/L范圍內呈良好線性關系，相關系數為0.990 7～0.999 9；相對標準偏差為0.88%～4.2% ；加標回收率為90.6%～107.2%；檢出限為0.15～2.37 mg/L。研究結果表明，150 ℃下微波水解16 min的結果與傳統加熱水解(110 ℃，24 h)的效果基本相同。該方法分析時間較短，靈敏度較高，可用于飼料中氨基酸含量的檢測。

微波水解；氨基酸；高效液相色譜法；柱前衍生；飼料

飼料中的蛋白質是畜禽的重要營養物質，動物對蛋白質的需求源自對氨基酸的需求。因此，飼料中的氨基酸含量是衡量飼料質量的重要指標。氨基酸的國家標準檢測方法[1]是以茚三酮為衍生劑試劑采用柱后衍生的離子色譜法。但該方法分析時間長，工作量大，且有一定的實驗誤差[2]。柱前衍生高效液相色譜法測定氨基酸具有分析時間較短、靈敏度高等優點[3],近年來的應用日益增多。對蛋白質中氨基酸的分析使用最為廣泛的衍生方法是加熱水解。但該法樣品前處理時間較長，操作繁瑣，勞動強度大[2]。

1975年Abu-Samra等[4]首次將微波技術應用于蛋白質的水解?！?br>