HE4、NSE、CYFRA21-1聯合檢測在肺癌診斷中的應用

李妍 劉俊 任麗娜

HE4、NSE、CYFRA21-1聯合檢測在肺癌診斷中的應用

李妍 劉俊 任麗娜

目的 研究人附睪蛋白4(human epididym is protein 4，HE4)，神經元特異性烯醇化酶(2-phospho-D-glycerate hydrolase，NSE)，細胞角蛋白19片段(cytokeratins19，CYFRA21-1)聯合檢測對肺癌的診斷價值。方法 檢測大連市中心醫院67例肺癌患者，70例健康體檢者，65例肺良性疾病患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平，分析各指標對肺癌的診斷價值。結果 肺癌患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平顯著高于肺良性疾病與健康對照組(P＜0.05)，與單次檢查比較，聯合檢查可以提高檢測的靈敏度。結論 HE4可以作為新的肺癌腫瘤標志物。聯合檢測血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平可以提高檢測的靈敏度，提高肺癌的診斷價值。

肺癌；人附睪蛋白4；神經元特異性烯醇化酶；細胞角蛋白19片段

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，近年來肺癌的發病率在逐年上升，五年生存率僅為16%，極大的威脅著人類的健康和生命[1]。腫瘤標志物檢測具有創傷面小，早期發現早期治療，操作簡單快速等優點越來越受到人們的重視，合理選取血清中的腫瘤標志物，可以有效地提高診斷率。人附睪蛋白4(HE4)是一種20世紀90年代發現的新型腫瘤標志物，其在正常組織中含量極低，已有大量文獻報道HE4可用于卵巢癌的早期輔助診斷和療效監測[2-3]。近年來有文獻報道HE4可用于肺癌的早期輔助診斷[4-5]，本研究旨在探討HE4對肺癌診斷應用價值及HE4、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)聯合檢測在肺癌診斷中的意義，為肺癌的早期診斷提供依據。

作者單位：116033 大連市中心醫院檢驗科(李妍)；116033 大連市婦幼保健院檢驗科(劉俊)；116033 大連市中心醫院呼吸內科(任麗娜)

1 資料和方法

1.1 研究資料 選取2015-01—2016-12大連市中心醫院收治的肺癌患者67例，男30例，女37例，平均年齡(60.5±12.2)歲，所有患者均經病理組織切片及影像學確診，未經腫瘤治療，其中包括肺小細胞癌47例(肺鱗癌32例，腺癌15例)，非小細胞癌20例。健康體檢者70例，男38例，女32例，平均年齡(62.4±13.6)歲，經32排螺旋CT掃描，超聲檢查，常規血液檢驗正常者納入對照標準。肺良性疾病65例，肺炎30例，慢阻肺20例，肺良性腫瘤15例，男30例，女35例，平均年齡(55.1±14.0)歲。各組在年齡、性別比例等方面差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 靜脈采血5 mL，3 000 rpm離心15 min，分離血清，－80℃保存待測。采用羅氏COBAS e601電化學發光分析儀及配套試劑進行檢測血清中HE4，NSE，CYFRA21-1水平。實驗前所有檢測指標均經過伯樂復合質控品檢測在控。陽性臨界值定為HE4＞100 pmol/L，NSE＞16.3 ng/L，CYFRA21-1＞3.3 ng/L。

1.3 統計學處理 采用SPSS 19.0對數據進行分析，各種指標濃度用均數±標準差表示。顯著性檢驗用t檢驗。接收機工作曲線用于判斷不同指標的診斷效率，以不同指標診斷分界點下的敏感性為縱坐標，特異性為橫坐標，曲線下的面積表示不同指標的診斷準確性。以P＜0.05為差異具有統計學意義。敏感性＝真陽/(真陽＋假陰)×100%；特異性＝真陰/(真陰＋假陽)×100%。

2 結果

2.1 腫瘤患者血清中HE4，NSE，CYFRA21-1的濃度均高于肺部良性疾病和健康對照組(P＜0.05)。肺良性疾病和健康對照組間差異無統計學意義(表1)。

表1 肺癌組、肺良性腫瘤組及健康對照組HE4、NSE、CYRFA21-1水平比較(±s)

表1 肺癌組、肺良性腫瘤組及健康對照組HE4、NSE、CYRFA21-1水平比較(±s)

注：與肺良性腫瘤組及健康對照組比較，*P＜0.05。

組別 例數 HE4/(pmol·L-1) NSE/(ng·L-1) CYFRA21-1/(ng·L-1)肺癌組 67 402.6±134.3* 30.12±12.35* 16.30±7.60*肺良性腫瘤組 65 78.3±22.5 5.13±1.32 2.48±0.86健康對照組 70 85.5±18.6 5.01±1.23 2.46±0.98

2.2 HE4聯合常用肺癌檢測指標組合對肺癌診斷的價值 在本研究中HE4，NSE，CYFRA21-1單獨應用于肺癌診斷時特異度均較高，但靈敏度不高，聯合檢測可顯著提高靈敏度。可見多種血清腫瘤標志物聯合檢測在肺癌診斷中具有一定診斷價值(表2)。

表2 不同腫瘤標志物對肺癌的診斷價值[n(%)]

3 討論

近年來，隨著空氣污染的嚴重，肺癌的發病率越來越高，已成為目前威脅全球人類健康和生命的一項公共問題，目前臨床上CT和病理對癌癥的確診率很高，但對初期的診斷率很低，而且與良性的肺部疾病鑒別診斷較難。多數肺癌患者確診時已經進入至晚期，失去了最佳的治療時機，因此早期診斷，早期治療十分關鍵。腫瘤標志物已成為常用的無創檢查指標，在腫瘤篩查、診斷、判斷預后和轉歸方面發揮越來越重要的作用。

1991年Kirchhoff等[6]發現HE4蛋白，該基因位于染色體20q12-13.1上，全長約12 kb，由5個外顯子和4個內含子組成。HE4 mRNA編碼的分泌蛋白與細胞外蛋白酶抑制劑有同源性，且在男性生殖管上皮細胞的內質網中合成，可能在精子的成熟過程中有重要作用。目前大量資料研究表明，HE4高濃度表達于卵巢癌細胞中，與卵巢癌的診斷和預后密切相關[7]。 但是HE4在其他組織如胃腸道、肝臟等組織中并未發現其表達。近年來有關于HE4與肺癌關系的研究：如Nagy等[8]研究發現，血清HE4檢測對肺癌具有重要的診斷價值，尤其聯合CEA、CA125等效果更佳。本文研究大連地區HE4，NSE，CYFRA21-1聯合檢測對肺癌的診斷。

本研究發現：肺癌患者血清中，HE4濃度高于健康體檢者和肺良性腫瘤患者，存在顯著性差異。在腫瘤標志物聯合檢測中，相比于以前的肺癌腫瘤標志物(NSE ，CYFRA21-1)，HE4的靈敏度為63.8%，特異性為74.4%。HE4聯合檢測的靈敏度明顯高于傳統的檢測指標組合，可達88.6%。

CYFRA21-1被稱為細胞角蛋白19片段(CK19)，該蛋白主要由細胞角蛋白的19的兩個單克隆抗BM19-21和KS19-1組成。角蛋白是組成細胞骨架的一種中間體，CK19的相對分子質量為10KD，CYFRA21-1主要在單層上皮細胞的細胞質中存在，如肺泡、子宮內膜、胰腺等。腫瘤細胞在死亡時，會激活細胞中的蛋白酶，使角蛋白快速降解，講解后的碎片釋放到循環系統，血清中CYFRA21-1含量會升高，肺癌細胞中有CYFRA21-1的表達[9]，尤其是鱗癌，但是這種片段在肺部良性疾病患者中含量極低。與本實驗結果相符合。

NSE神經元推行烯醇化酶，是一種用于肝糖分解的多肽類酶，該物質特異性存在于大腦神經元、周圍神經組織及內分泌組織中。肺癌組織中也存在NSE，其含量與正常肺細胞相比高出3～35倍。

但是由于樣本量的局限性，本研究對HE4在各不同病理類型的肺癌中的診斷價值沒有進行進一步分析。有研究表明，在肺腺癌患者血清中HE4高濃度表達[10]，在鱗癌和小細胞癌差異無統計學意義。這些數據都顯示，HE4可能作為肺癌診斷的新指標，聯合檢測可作為臨床高危人群的臨床篩查指標。

[1]姚曉軍，劉倫旭.肺癌的流行病學及治療現狀[J].現代腫瘤醫學，2014(8)：1982-1986.

[2]Karlsen MA，Sandhu N，Hogdall C，et al.Evaluation of HE4，CA125，risk of ovarian malignancy algorithm(ROMA)and risk of malignancy index(RMI)as diagnostic tools of epithelial ovarian cancer in patients with a pelvic mass[J].Gynecologic Oncology，2012，127(2)：379-383.

[3]牟永平，崔宏偉，斯琴，等.人附睪分泌蛋白4和糖類抗原125對卵巢癌診斷意義[J].國際檢驗醫學雜志，2016，37(20)：2805-2807．

[4]Yamashita SI，Tokuishi K，Hashimoto T，et al.Prognostic significance of HE4 expression in pulmonary adenocarcinoma[J].Tumor Biology，2011，32(2)：265-271.

[5]肖然，胡昊昀，王瑞，等.血清腫瘤標志物HE4檢測在肺癌診斷中的應用價值探討[J].檢驗醫學，2014，29(9)：893-896．

[6]Kirchhoff C，Habben I，IvelLl R，et al.A major human epididymis-specific cDNA encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors[J].Biol Reprod，1991，45(2)：350-357.

[7]Yilmaz EP，Kumtepe Y.Endometrial and Ovatian cancer with MR Imaging Impertance of Serum HE4 and CA125 levels in the extent of disease at Evalnation[J].Eutasian J Med，2016，48(3)：192-198.

[8]Nagy J，Bhattoa HP，Steiber Z，et al.Serum human epididymis protein 4(HE4)as a tumor marker in men with lung cancer[J].Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，2014，52(11)：1639-1648.

[9]Kosacka M，Jankowska R.Comparison of cytokeratin 19 expression in tumour tissue and serum CYFRA21-1 levels in non-small cell lung cancer[J].Pol Arch Med Wewn，2009，119(12)：33-37.

[10]Liu W，Yang J，Chi PD，et al.Evaluating the clinical significance of serum HE4 levels in lung cancer and pulmonary tuberculosis[J].Int J Tuberc Lung Dis，2013，17(10)：1346-1353.

Objective To explore the clinical significance of combined detection of serum HE4，NSE，CYERA21-1 in patients w ith lung cancer.Methods The level of serum HE4，NSE，CYFRA21-1 of 67 patients w ith lung cancer from Dalian Central Hospital，70 cases of healthy people and 65 patients w ith pulmonary diseases were measured and analyzed for their value in the detection of lung cancer.Results The serum level of HE4，NSE，CYFRA21-1 in lung cancer group were significantly higher than those of the other two control groups(P＜0.05).The sensitivity rate of joint detection of three tumor markers were significantly higher than those of single detection.Conclusion HE4 may be used as a new biomarker of lung cancer.The combined detection of serum HE4，NSE，CYFRA21-1 could increase the sensitivity of the patients w ith lung cancer and is of great value in lung cancer detection.

Lung cancer；HE4；NSE；CYFRA21-1

2017-05-03)

1005-619X(2017)10-1081-03

10.13517/j.cnki.ccm.2017.10.031