感染細菌性肺炎T淋巴細胞亞群以及細胞因子的變化

郭非

(河南大學附屬南石醫院 兒科 河南 南陽 473000)

·臨床研究·

感染細菌性肺炎T淋巴細胞亞群以及細胞因子的變化

郭非

(河南大學附屬南石醫院 兒科 河南 南陽 473000)

目的探析感染細菌性肺炎T淋巴細胞亞群以及細胞因子的變化。方法選取河南大學附屬南石醫院2015年12月至2016年11月收治的31例感染細菌性肺炎患兒為觀察組，另選同期在河南大學附屬南石醫院體檢的31例健康嬰幼兒為對照組，對比兩組兒童細胞因子與T淋巴細胞亞群的變化情況。結果觀察組IL-4水平高于對照組(P<0.05)；兩組IL-7、IFN-α、NK水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組(P<0.05)，CD9+水平高于對照組(P<0.05)，兩組CD8+水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。結論感染細菌性肺炎患兒其T淋巴細胞亞群以及細胞因子將會有相應改變，可作為臨床診療依據。

細菌性肺炎；T淋巴細胞亞群；細胞因子

數據顯示，新生兒感染性疾病占新生兒期疾病的90%以上，這與其免疫功能不完善關系密切[1]。不同種類的病原體和感染途徑，導致體內細胞免疫和體液免疫的應答不同，從而使免疫細胞因子水平發生改變。本研究選取河南大學附屬南石醫院近年收治的細菌性肺炎患兒為觀察對象，對其T淋巴細胞亞群以及細胞因子變化情況進行觀察，以為臨床診療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料選取河南大學附屬南石醫院2015年12月至2016年11月收治的31例感染細菌性肺炎患兒為觀察組，另選同期在河南大學附屬南石醫院體檢的31例健康嬰幼兒為對照組。對照組男17例，女14例；出生日齡為10～28 d，平均(18.6±3.1)d；體質量為3.1～4.2 kg，平均(3.6±0.3)kg。觀察組男18例，女13例；出生日齡為10～27 d，平均(18.2±3.2)d；體質量為3.2～4.3 kg，平均(3.7±0.3)kg。兩組一般資料比較，差異無統計學意義(P<0.05)。

1.2治療方法患兒入院后采集空腹靜脈血2 ml，并在4 h內進行處理。

1.2.1細胞因子檢測 將500 μl的RPMI1640、5 μl的PMA(1 μg/ml)、1 μl的離子霉素(1 μg/ml)、1 μl的BFA(10 μg/ml)以及500 μl的外周血一次加入流式細胞儀專用試管中。隨后以渦旋混勻器將其混勻，放置于含5%二氧化碳的培養箱中進行培養，時間為5 h，溫度為37 ℃，期間可將其取出1次，在重新混勻后放回。對試管進行標記，并在孵育5 h后，將1 ml的洗滌液以及200 μl的全血加入各試管中，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環境中靜置30 min，隨后在室溫下進行5 min的離心處理，取50 μl的底層留取液，并為其加入1 ml的洗滌液重新進行5 min的室溫狀態下離心處理，選擇下層殘液作為備用。在各試管中加入5 μl的CD4-APC，并加入單克隆抗體小鼠抗人IL-17A-PE以及小鼠抗人IFN-α/IL-4各10 μl，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環境中靜置30 min，后重新洗滌，離心后取其下層殘留液50 μl，并加入PBS 400 μl進行上機檢測。

1.2.2T淋巴細胞亞群檢測 在1 800 μl的無菌注射用水中加入200 μl的溶血素以備用。取2個流式細胞儀試管，將1 ml全血加入試管中，并加入相應試劑，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環境中靜置20 min。各管均加入溶血素1 000 μl，以漩渦器低速混勻，在室溫狀態下放置于避光處靜置10 min，隨后進行5 min的離心處理，速度為1 500 r/min。去下層殘留液50 μl，并加入洗滌液2 ml，重新進行離心處理，在400 μl的鞘液中加入50 μl的下層液，上機檢測。觀察對比兩組兒童細胞因子(IL-4、IL-7、IFN-α、NK)與T淋巴細胞亞群(CD3+、CD8+、CD4+、CD4+/CD8+)的變化情況。

2 結果

2.1細胞因子觀察組IL-4水平高于對照組(P<0.05)；兩組IL-7、IFN-α、NK水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2T淋巴細胞亞群觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組(P<0.05)，CD9+水平高于對照組(P<0.05)，兩組CD8+水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 兩組細胞因子水平比較

表2 兩組T淋巴細胞亞群比較

3 討論

新生兒被不同病原體感染后，其機體T淋巴細胞亞群以及細胞因子變化不同，機體免疫功能被破壞[2]。機體被感染后顯示出T淋巴細胞亞群水平降低，免疫功能受限情況，其與新生兒已遭受感染以及病程較長且病情隱匿有很大聯系[3-4]。本次研究中觀察組患兒表現為IL-4水平過高；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平過低；CD9+水平異常偏高等。T淋巴細胞亞群在人體的免疫調節方面發揮著較為重要的作用，CD3+代表了外周血成熟T細胞的水平，CD4+則能夠刺激人體B細胞生成抗體，而CD8+則能夠抑制抗體生成，其水平減少則表明免疫抑制能力下降[5]。特征細胞因子中，IFN-為前炎癥因子，可增強機體抗感染能力，并具有免疫調節的作用。IL-4能誘導B細胞，活化B細胞介導體液免疫應答。IL-17是促炎因子的一種，對上皮細胞、內皮細胞等進行誘導，促進炎癥因子及趨化因子的釋放[6]。綜上，當兒童感染細菌性肺炎后，其體內細胞因子及T淋巴細胞亞群會有一定變化，通過對變化情況進行監測，有助于患兒病情康復。

[1] 董焱.新生兒細菌性肺炎和輪狀病毒感染T淋巴細胞亞群及細胞因子的變化分析[J].實用臨床醫藥雜志,2015,19(11):74-77.

[2] 郝麗,鄭成中.新生兒感染T淋巴細胞亞群及細胞因子變化分析[J].臨床兒科雜志,2014,32(9):825-828.

[3] 李彩東,陳錫蓮,段正軍,等.慢性HBV感染者外周血T淋巴細胞亞群的變化及其與白細胞介素15、白細胞介素16的相關性分析[J].臨床肝膽病雜志,2015,31(11):1857-1861.

[4] 張宏宇,何梅芳,芮冬妹,等.不同肝病女性患者外周血T淋巴細胞亞群及Th1和Th2細胞因子的差異[J].廣東醫學,2014,35(3):400-402.

[5] 樓蘭芳,李小兵,張蘭青.小兒肺炎支原體感染后血清免疫球蛋白、紅細胞免疫及外周血T淋巴細胞亞群的變化情況分析[J].中國婦幼保健,2015,30(3):385-387.

[6] 張晨,王美玲,馬華.胰腺癌患者化療前后外周血自然殺傷T細胞、T細胞亞群及γ干擾素等細胞因子的變化[J].中國普通外科雜志,2015,24(9):1315-1318.

R 722.13+5

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.20.010

2017-03-23)