青海地區乳腺癌患者B淋巴細胞瘤-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標關系研究

楊勇莉，王曉武，王玉花，韓靜琦，管鈺琳，徐 婷，李耀麗

1.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院婦科 2.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院乳腺甲狀腺外科 3.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院病理科 4.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院腫瘤內科

·論著·

*通信作者：王曉武，教授，主任醫師；E-mail：wtqba@126.com

青海地區乳腺癌患者B淋巴細胞瘤-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標關系研究

楊勇莉1，王曉武2*，王玉花2，韓靜琦3，管鈺琳2，徐 婷2，李耀麗4

1.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院婦科 2.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院乳腺甲狀腺外科 3.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院病理科 4.810001 青海省西寧市，青海大學附屬醫院腫瘤內科

目的探討青海地區乳腺癌(BC)患者B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)基因C(-938)A多態性(AA、AC、CC基因型)與臨床生物學指標的關系。方法選取2014年1月—2015年12月青海大學附屬醫院乳腺甲狀腺外科接受手術治療的符合納入標準的BC患者65例為研究對象。術中采集患者BC組織，采用聚合酶鏈反應-限制性酶切片段長度多態性分析(PCR-RFLP)法檢測Bcl-2基因C(-938)A多態性(AA、AC、CC基因型)；收集患者臨床生物學指標，包括病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、雌激素受體(ER)狀態、孕激素受體(PR)狀態、人表皮生長因子2(HER2)狀態、分子分型。采用列聯系數χ2檢驗分析Bcl-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標的關系。結果65例患者中，AA、CA、CC基因型分別為6、30、29例。由于AA基因型例數少，無法獨立分析，故將AA基因型和CC基因型合并分析。Bcl-2基因C(-938)A多態性與病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型均不存在關聯性(P>0.05)。結論青海地區BC患者Bcl-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型無關。

乳腺腫瘤；多態性,單核苷酸；青海；B淋巴細胞瘤-2基因C(-938)A；臨床生物學指標

乳腺癌(BC)是女性最常見的惡性腫瘤之一，在我國，BC占全身各種惡性腫瘤的7%～10%[1-2]。近年來我國BC發病率有明顯上升的趨勢，部分大城市中BC占女性惡性腫瘤之首[1]。據資料統計，全世界每年有120萬～140萬婦女患BC，約有50萬患者死于該病[3-4]。北美、北歐地區BC發病率約為亞洲、非洲、拉美地區的4倍，而低發地區居民移居至高發地區后，第二、三代移民的BC發病率逐漸升高，提示環境因素及生活方式與BC的發病有一定關系[5-9]。

吳炅等[10]在研究BC時發現，B淋巴細胞瘤2(Bcl-2)表達水平與腋淋巴結轉移、組織學分級、術后局部復發及轉移呈正相關。但也有研究顯示，Bcl-2表達水平隨著BC組織學分級的增高逐漸降低，與腋淋巴結轉移亦呈負相關[11]。而SILVESTRINI等[12]研究認為，Bcl-2表達水平與腋窩淋巴結轉移無關。但Bcl-2基因多態性與BC的關聯性研究較少，研究樣本量亦較小，需要進行更多的研究[13]。本研究采用聚合酶鏈反應-限制性酶切片段長度多態性分析(PCR-RFLP)法檢測青海地區漢族BC患者Bcl-2基因C(-938)A多態性，并分析其與病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、雌激素受體(ER)狀態、孕激素受體(PR)狀態、人表皮生長因子2(HER2)狀態、分子分型等臨床生物學指標的關系。

1 對象與方法

1.1 納入與排除標準 納入標準：(1)術后病理證實為BC；(2)有區域淋巴結轉移，經術后病理證實轉移數目；(3)青海地區世居漢族女性；(4)既往無惡性腫瘤病史；(5)未行放、化療及內分泌等治療；(6)無嚴重的心、肝、腎功能損害。排除標準：(1)同時接受放、化療或其他系統抗腫瘤藥物治療，或其他研究藥物治療；(2)伴有其他惡性疾病；(3)既往患有其他腫瘤或其他較大手術后尚未恢復；(4)有其他嚴重生理功能紊亂；(5)妊娠期或哺乳期。

1.2 研究對象 選取2014年1月—2015年12月青海大學附屬醫院乳腺甲狀腺外科接受手術治療的符合納入標準的BC患者65例為研究對象。患者均簽署知情同意書。

術中采集患者BC組織，其中少部分BC組織立刻置于-80 ℃冰箱保存，用于基因多態性檢測；大部分BC組織在本院病理科取材后常規組織脫水、透明、浸蠟，制成組織蠟塊，用于免疫組織化學SP法檢測。

1.3 儀器與試劑 水浴鍋(北京六一生物科技有限公司)，苯酚-氯仿-異戊醇溶液(25∶24∶1)、1% DNA瓊脂糖凝膠、無水乙醇〔生工生物工程(上海)股份有限公司〕，BccI酶〔NEB(北京)有限公司〕、Rnase free water(美國Promega公司)，PBS(南京生興生物技術有限公司)。

1.4 研究方法

1.4.1 基因組DNA的提取 采用液氮將BC組織冷凍，研磨，形成組織液；加入500 μl細胞裂解液，置于42 ℃水浴鍋孵育20 min；加入50 μl蛋白酶K，置于42 ℃水浴鍋孵育24 h；加入50 μl RNA降解酶，室溫下(25 ℃)靜置5 min；加入與待裂解組織液等體積的苯酚-氯仿-異戊醇溶液，靜置2 min，10×g離心2 min，取上清液，置于新的離心管中；重復上一步步驟；加入約占離心管1/3體積的醋酸銨溶液，顛倒混勻；吸取700 μl混合液于DNA吸附柱中，10×g離心1 min，棄去上層廢液；加入700 μl無水乙醇，加入500 μl清洗液，混勻，10×g離心1 min，棄去上層廢液；加入約200 μl洗脫液，靜置5 min，10×g離心2 min，收集離心管中的DNA，置于-200 ℃冰箱保存。記錄檢測到的基因組DNA情況。

1.4.2 Bcl-2基因C(-938)A的基因分型 采用PCR-RFLP法進行基因分型。PCR反應體系：PCR Master Mix 25 μl，模板DNA 200 ng，PCR上、下游引物各1 μl，加Rnase free water至總體積50 μl。Bcl-2基因C(-938)A上游引物：5′-CTGCCTTCATTTATCCAGCA-3′，下游引物：5′-GGCGGCAGATGAATTACAA-3′；內參β-actin上游引物：5′-CTCCAT CCTGGCCTCGCTGT-3′，下游引物：5′-GCTGTCACCTTCACCGTTCC-3′。PCR反應條件：95.0 ℃預變性5 min，95.0 ℃ 30 s、(68.0±0.5)℃ 45 s、72.0 ℃ 60 s，共30個循環，最后72 ℃延伸6 min。采用BccI 酶切PCR產物，取酶切產物20 μl上樣于1% DNA瓊脂糖凝膠行DNA電泳，溴化乙啶染色后用DNA凝膠成像系統分析Bcl-2基因C(-938)A的基因分型。野生型AA為189、111 bp 2個條帶，雜合型CA為300、189、111 bp 3個條帶，純合型CC為300 bp 1個條帶(見圖1)。

1.4.3 年齡及臨床生物學指標收集 收集患者年齡及臨床生物學指標，后者包括病理類型、腫瘤直徑、臨床分期(參照美國癌癥聯合會第七版乳腺癌分期標準[14])、組織學分級(參照BC Scarff-Bloom-Richardson評分法[15])、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型。其中ER狀態、PR狀態、HER2狀態采用免疫組織化學SP法檢測。

1.4.3.1 免疫組織化學SP法 4 μm石蠟切片脫蠟和水化；枸櫞酸鹽緩沖液高溫高壓修復；3% H2O2阻斷內源性過氧化物酶，室溫下孵育10 min，以阻斷內源性過氧化物酶；PBS沖洗，3 min×3次；棄去PBS，分別加適當比例稀釋的一抗工作液，4 ℃冰箱過夜；PBS沖洗，3 min×3次；棄去PBS，每張切片滴加1滴聚合物增強劑(試劑A)，室溫下孵育20 min；PBS沖洗，3 min×3次；棄去PBS，每張切片滴加1滴酶標抗鼠/兔聚合物(試劑B)，室溫下孵育30 min；PBS沖洗，3 min×3次；棄去PBS，每張切片滴加2滴新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡(×40～×400)下觀察3～15 min，陽性顯色為棕黃色；蒸餾水漂洗，蘇木素復染，0.1%鹽酸分化，自來水沖洗，PBS沖洗返藍；脫水透明、中性樹膠封固；顯微鏡(×40～×400)下至少觀察10個以上視野染色情況。

1.4.3.2 ER、PR、HER2表達結果判定標準 ER、PR陽性細胞表現為癌細胞的細胞核內有棕黃色顆粒。陽性細胞數所占比例<10%為(-)，10%～25%為(+)，26%～50%為(+ +)，>50%為(+ + +)。本研究將(-)判定為陰性，(+)～(+ + +)判定為陽性(見圖2，本文圖2～3彩圖見本刊官網www.chinagp.net電子期刊相應文章)。

HER2陽性細胞表現為癌細胞的細胞膜上有棕黃色顆粒。無陽性細胞判定為(-)，任何比例的癌細胞細胞膜呈現微弱、不完整的著色判定為(+)，>10%的癌細胞細胞膜呈弱到中度、完整但不均勻的棕黃著色或<30%的癌細胞細胞膜呈現強且完整的棕黃著色判定為(+ +)，>30%的癌細胞細胞膜呈現強且完整的棕黃著色判定為(+ + +)。本研究將(-)～(+ +)判定為陰性，(+ + +)判定為陽性(見圖3)。

2 結果

2.1 Bcl-2基因C(-938)A多態性分析結果 65例患者中，AA、CA、CC基因型分別為6、30、29例。由于AA基因型例數少，無法獨立分析，故將AA基因型和CC基因型合并分析。

注：17～32為乳腺癌組織，野生型AA為189、111 bp 2個條帶，雜合型CA為300、189、111 bp 3個條帶，純合型CC為300 bp 1個條帶

圖1 Bcl-2基因C(-938)A PCR產物電泳圖

Figure1 Electrophoresis of B-cell lymphoma-2 Gene C (-938) A PCR product

注：A為雌激素受體(ER)陽性(×100)，B為ER陰性(×100)，C為孕激素受體(PR)陽性(×40)，D為PR陰性(×400)

圖2 ER、PR在乳腺癌組織中的表達情況(免疫組織化學SP法染色)

Figure2 Expression of ER and PR in BC tissues

注：A為人表皮生長因子2(HER2)陽性，B為HER2陰性

圖3 HER2在乳腺癌組織中的表達情況(免疫組織化學SP法染色，×100)

Figure3 Expression of HER2 in BC tissues

2.2 年齡及臨床生物學指標 65例患者年齡34～85歲，平均年齡(53.5±11.3)歲；病理類型：浸潤性導管癌60例，其他5例；腫瘤直徑：≤2 cm 21例，>2 cm 44例；臨床分期：I期12例，Ⅱ期40例，Ⅲ期13例；組織學分級：Ⅰ級7例，Ⅱ級46例，Ⅲ級12例；腋窩淋巴結轉移數目：0個32例，1～3個15例，≥4個18例；ER狀態：陽性47例，陰性18例；PR狀態：陽性41例，陰性24例；HER2狀態：陽性15例，陰性50例；分子分型：Luminal A型9例，Luminal B型30例，三陰型11例，HER2陽性型15例。

2.3 Bcl-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標的關系 Bcl-2基因C(-938)A多態性與病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型均不存在關聯性，差異無統計學意義(P>0.05，見表1)。

3 討論

Bcl-2是從淋巴瘤中分離出來的原癌基因，主要參與細胞凋亡的調控，是Bcl-2家族中唯一一個抑制凋亡而不促進細胞增殖的癌基因[16]。ROSSI等[17]、ZENZ等[18]研究了高加索地區274例浸潤性BC患者Bcl-2基因C(-938)A多態性情況發現，在淋巴結陰性的浸潤性BC患者中，攜帶AA基因型與生存率的提高有顯著相關性；進一步多因素Cox回歸模型分析顯示，CC基因型可作為淋巴結陰性的BC患者癌癥死亡的一個獨立預測因素；其認為Bcl-2基因C(-938)A多態性可作為判斷淋巴結陰性BC患者預后及篩查高危患者的指標，而在淋巴結陽性的浸潤性BC患者中沒有發現Bcl-2基因C(-938)A多態性與患者的預后有關聯。KIDD等[19]假設AA基因型抑制Bcl-2的表達，從而加速了細胞的凋亡，降低了患病風險；CC基因型促進Bcl-2的表達，從而抑制了細胞的凋亡，使腫瘤最終形成并具有侵襲性，以此解釋AA基因型患者前列腺癌的患病風險降低。ROSSI等[17]、ZENZ等[18]研究結論似乎支持上述假設。但白楊等[20]通過研究得出，AA基因型與組織學分級差和腋窩淋巴結轉移率高明顯相關，未發現與臨床分期、腫瘤大小、病理類型、ER/PR狀態及HER2狀態相關，結論不支持上述假設。

表1 Bcl-2基因C(-938)A多態性臨床生物學指標的關系

注：ER=雌激素受體，PR=孕激素受體，HER2=人表皮生長因子2

本項目組前期研究結果顯示，Bcl-2基因C(-938)A多態性與青海地區漢族BC易感性無關[21]，同時本研究結果亦顯示，Bcl-2基因C(-938)A多態性與病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型均不存在關聯性。考慮因在細胞凋亡過程中，牽涉到多個因子，如細胞膜表面FAS凋亡受體、上游含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-8及下游caspase-7或caspase-3凋亡效應因子等，腫瘤細胞逃避免疫監視及躲避凋亡的具體分子機制目前尚不清楚，Bcl-2基因在凋亡過程中扮演重要角色，但其也是參與整個凋亡信號途徑的因子之一。而ROSSI等[17]、ZENZ等[18]及KIDD等[19]研究顯示，Bcl-2基因多態性與BC易感性具有一定相關性，提示患者遺傳背景及高原環境壓力或許也在其中扮演一定角色。

本研究的不足之處是樣本量少，實驗技術單一，并未考慮環境致癌因素及基因-基因交互作用等，這些均可能影響結果的可靠性。此外，在今后的研究中，需要進一步擴大樣本量及加入其他民族BC患者作為研究對照，以確認Bcl-2基因多態性與BC易感性的關系。

綜上所述，青海地區BC患者Bcl-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、組織學分級、腋窩淋巴結轉移數目、ER狀態、PR狀態、HER2狀態、分子分型無關。

作者貢獻：楊勇莉、王曉武進行研究設計與實施、資料收集整理，撰寫論文并對文章負責；王玉花、韓靜琦、管鈺琳、徐婷、李耀麗進行研究實施、評估、資料收集；王曉武對文章總體負責，并進行質量控制及審校。

本文無利益沖突。

[1]吳在德,吳肇漢.外科學[M].7版.北京:人民衛生出版社,2012:308-309.

[2]梅雅琪,李惠萍,楊婭娟,等.乳腺癌患者樂觀傾向和應對方式與益處發現的關系[J].中國全科醫學,2016,19(23):2824-2827.DOI:10.3969/J.issn.1007-9572.2016.23.017.

MEI Y Q,LI H P,YANG Y J,et al.Relationship between optimism tendency,coping style and benefit finding of patients with breast carcinoma[J].Chinese General Practice,2016,19(23):2824-2827.DOI:10.3969/J.issn.1007-9572.2016.23.017.

[3]M BRADEN A,V STANKOWSKI R,M ENGEL J,et al.Breast cancer biomarkers:risk assessment,diagnosis,prognosis,prediction of treatment efficacy and toxicity,and recurrence[J].Curr Pharm Des,2014,20(30):4879-4898.

[4]AFSHARFARD A,MOZAFFAR M,ORANG E,et al.Trends in epidemiology,clinical and histopathological characteristics of breast cancer in Iran:results of a 17 year study[J].Asian Pac J Cancer Prev,2013,14(11):6905-6911.

[5]MOORE S P,FORMAN D,PINEROS M,et al.Cancer in indigenous people in Latin America and the Caribbean:a review[J].Cancer Med,2014,31(1):70-80.DOI:10.1002/cam4.134.

[6]SAIKA K,SOBUE T.Cancer statistics in the world[J].Gan To Kagaku Ryoho,2013,40(13):2475-2480.

[7]ZHANG J G,LIU S Z,CHEN Q,et al.Analysis of cancer incidence and mortality in Henan province,2009[J].Zhonghua Yu Fang Yi Xue Za Zhi,2013,47(7):597-602.

[8]HUSSAIN S A,SULLIVAN R.Cancer control in Bangladesh[J].Jpn J Clin Oncol,2013,43(12):1159-1169.DOI:10.1093/jjco/hyt140.

[9]KASUM M,BEKETIC-ORESKOVIC L,PEDDI P F,et al.Fertility after breast cancer treatment[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,2014,173:13-18.DOI:10.1016/j.ejogrb.2013.11.009.

[10]吳炅,沈鎮宙,邵志敏.乳腺癌細胞凋亡及相關基因表達的預后研究[J].上海醫學,1999,22(1):27-31.DOI:10.3969/j.issn.0253-9934.1999.01.007.

[11]LIPONEN P,PIETILAINEN T,KOSMA V M,et al.Apoptosis suspressing protein bcl-2 is expressed in well differenciated breast carcinoma with favourable prognosis[J].J Pathl,1995,177(1):49-55.DOI:10.1002/path.1711770109.

[12]SILVESTRINI R,VENERONI S,DAIDONE M G,et al.The Bcl-2 protein:a prognostic indicator strongly related to p53 protein in lymph node-negative breast cancer patients[J].J Natl Cancer Int,1994,86(7):499-504.

[13]王曉武.Bcl-2和Bax基因及多態性與乳腺癌關系的研究進展[J].青海醫藥雜志,2013,43(2):78-79.

WANG X W.The research progress of relationship of Bcl-2,Bax and their polymorphism with breast cancer[J].Qinghai Journal of Medicine,2013,43(2):78-79.

[14]SOBIN LH G M,WITTEKIND C.TNM classification of malignant tumours (7th Edition)[M].7th ed.Oxford,UK:Wiley-Blackwell,2009:345-376.

[15]MEYER J S,ALVAREZ C,MILIKOWSKI C,et al.Breast carcinoma malignancy grading by Bloom-Richardson system vs proliferation index:reproducibility of grade and advantages of proliferation index[J].Mod Pathol,2005,18(8):1067-1078.DOI:10.1038/modpathol.3800388.

[16]KORSMEYER S J.Regulators of cell death[J].Trends Genet,1995,11(3):101-105.DOI:10.1016/S0168-9525(00)89010-1.

[17]ROSSI D,RASI S,CAPELLO D,et al.Prognostic assessment of Bcl-2-938C>A polymorphism in chronic lymphocytic leukemia[J].Blood,2008,111(1)：466-468.DOI:10.1182/blood-2007-08-106823.

[18]ZENZ T,BENNER A,DUHRSEN U,et al.Bcl-2-938C>A polymorphism and disease progression in chronic lymphocytic leukemia[J].Leuk Lymphoma,2009,50(11):1837-1842.DOI:10.3109/10428190903207530.

[19]KIDD L R,COULIBALY A,TEMPLTON T M,et al.Germline BCL-2 sequence variants and inherited predisposition to prostate cancer[J].Prostate Cancer Prostatic Dis,2006,9(3):284-292.DOI:10.1038/sj.pcan.4500884.

[20]白楊,戴殿祿,馬國明,等.Bcl-2基因多態性與乳腺癌臨床生物學指標的關系[J].腫瘤,2010,30(1):48-52.DOI:10.3781/j.issn.1000-7431.2010.01.010.

[21]王曉武,鄧勇,楊勇莉,等.MMP-9、Bcl-2基因多態性與青海漢族乳腺癌易感性[J].青海醫學院學報,2013,34(1):31-37.DOI:10.3969/j.issn.1006-8252.2013.01.006.

RelationshipofB-CellLymphoma-2GeneC(-938)APolymorphismwithClinicalandBiologicalIndicatorsinBreastCancerPatientsinQinghaiArea

YANGYong-li1,WANGXiao-wu2*,WANGYu-hua2,HANJing-qi3,GUANYu-lin2,XUTing2,LIYao-li4

1.DepartmentofGynecology,QinghaiUniversityAffiliatedHospital,Xining810001,China2.DepartmentofBreastandThyroidSurgery,QinghaiUniversityAffiliatedHospital,Xining810001,China3.DepartmentofPathology,QinghaiUniversityAffiliatedHospital,Xining810001,China4.DepartmentofMedicalOncology,QinghaiUniversityAffiliatedHospital,Xining810001,China

*Correspondingauthor:WANGXiao-wu,Professor,Chiefphysician;E-mail:wtqba@126.com

ObjectiveTo explore the relationship of B-cell lymphoma-2 Gene C (-938) A〔Bcl-2 (-938 C> A)〕 polymorphism (AA,AC,CC genotypes) with clinical and biological indicators in patients with breast cancer (BC) in Qinghai area.MethodsSixty-five patients with breast cancer who

surgical treatment in Breast and Thyroid Surgery of Qinghai University Affiliated Hospital from January 2014 to December 2015 and met the study inclusion criteria were selected as the subjects.Bcl-2 (-938 C> A) polymorphism (AA,AC,CC genotypes) in BC tissues collected during the surgery were detected by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method.The clinical and biological indicators,including pathological type,tumor diameter,clinical stage,histological grade,the number of metastatic axillary lymph nodes,ER level,PR level,HER2 level and molecular typing were collected.The relationship of Bcl-2(-938 C>A) polymorphism with clinical and biological indicators was analyzed by χ2test for contingency coefficients.ResultsAmong the subjects,AA,AC and CC genotypes were found in 6,30 and 29 cases,respectively.Since the number of patients with AA genotype was too small to be analyzed independently,they were merged with those with CC genotype for analyzing.Bcl-2(-938 C>A) polymorphism was not related with pathological type,tumor diameter,clinical stage,histological grade,the number of metastatic axillary lymph nodes,ER level,PR level,HER2 level and molecular typing (P>0.05).ConclusionBcl-2 (-938 C> A) polymorphism is not significantly associated with clinical and biological indicators (pathological type,tumor diameter,clinical stage,histological grade,the number of metastatic axillary lymph nodes,ER level,PR level,HER2 level and molecular typing) in BC patients in Qinghai area.

Breast neoplasms；Polymorphism,single nucleotide；Qinghai；B-cell lymphoma-2 Gene C (-938) A；Clinical and biological indicators

青海省應用基礎研究計劃項目(2014-ZJ-743)；青海大學附屬醫院中青年科研基金項目(ASRF-2012-10)

R 737.9

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.00.127

楊勇莉,王曉武,王玉花,等.青海地區乳腺癌患者B淋巴細胞瘤-2基因C(-938)A多態性與臨床生物學指標關系研究[J].中國全科醫學，2017，20(33)：4151-4155.[www.chinagp.net]

YANG Y L,WANG X W,WANG Y H,et al.Relationship of B-cell lymphoma-2 gene C (-938) A polymorphism with clinical and biological indicators in breast cancer patients in Qinghai area[J].Chinese General Practice，2017，20(33)：4151-4155.

2017-04-08；

2017-09-01)

(本文編輯：崔麗紅)