頰針療法在類風濕關節(jié)炎家兔模型鎮(zhèn)痛效應中的特點研究

蒲瑞生，方曉麗，頡旺軍，劉丁龍，權 可，蘇成紅，楊晨光，張延菊

1.730000甘肅省蘭州市，甘肅中醫(yī)藥大學針灸推拿學院 2.741000甘肅省天水市，天水瑞生堂連鎖國醫(yī)館

·論著·

·中醫(yī)·中西醫(yī)結合研究·

*通信作者：方曉麗，教授，博士生導師；E-mail：fangxlzyxy@163.com

頰針療法在類風濕關節(jié)炎家兔模型鎮(zhèn)痛效應中的特點研究

蒲瑞生1，2，方曉麗1*，頡旺軍1，劉丁龍1，權 可1，蘇成紅1，楊晨光1，張延菊1

1.730000甘肅省蘭州市，甘肅中醫(yī)藥大學針灸推拿學院 2.741000甘肅省天水市，天水瑞生堂連鎖國醫(yī)館

目的觀察頰針療法在類風濕關節(jié)炎兔模型鎮(zhèn)痛效應中的特點，為頰針臨床留針時間、療程的制定提供理論依據(jù)。方法2014年1—9月將篩選合格的40只清潔級大耳白兔隨機分成正常組、模型組、體針組、頰針組，每組10只。模型組、體針組、頰針組制備類風濕關節(jié)炎兔模型，正常組不予處理。實驗第27天開始正常組和模型組均予以體針組、頰針組相同方法固定30 min；體針組選雙側(cè)后肢膝眼和足三里針刺，留針30 min，1次/d；頰針組選頰針膝穴針刺，留針20 min，1次/d；4組均連續(xù)治療10次，分別在治療第1、4、7、10次針刺時測定針刺0、5、15、30、60、120、240 min各時間點痛閾值。結果第1、4、7、10次針刺方法和時間在痛閾值上存在交互作用(P<0.05)，時間在痛閾值上主效應顯著(P<0.05)，針刺方法在痛閾值上主效應不顯著(P>0.05)。正常組和模型組的痛閾值無時間效應(P>0.05)，體針組和頰針組的痛閾值有時間效應(P<0.01)。頰針組時間在痛閾值上主效應顯著(F=15.473，P<0.001)，頰針組時間與針刺次數(shù)在痛閾值上不存在交互作用(F=0.973，P=0.486)。頰針組第1次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第7次針刺時比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=-3.227,P=0.012)；頰針組第7次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第10次針刺時比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.463,P=0.656)。結論頰針療法的鎮(zhèn)痛效應具有明顯的時間變化曲線，且具有起效快、上升快、下降亦快的特點。

關節(jié)炎，類風濕；針灸療法；鎮(zhèn)痛；劑量效應關系,針灸；頰針療法

頰針療法是通過在面頰部的特定穴位上針刺來治病的一種方法，其以生物全息理論為指導，是一種全新的全息針灸療法，經(jīng)過二十余年的臨床實踐、穴位解剖的研究，頰針臨床診療體系已日趨完善，頰針療法具有取穴簡單、操作簡便、止痛效果迅速、不易復發(fā)、安全、主治范圍廣等優(yōu)點[1]。但相關的理論研究尚處于探索階段，其鎮(zhèn)痛效應的特點及作用機制尚不清楚，還需進一步的研究，以為臨床應用提供科學的理論依據(jù)。本研究擬以頰針療法鎮(zhèn)痛效應為切入點，采用卵蛋白誘導的類風濕關節(jié)炎兔模型，通過頰針與體針針刺不同時間點、不同治療次數(shù)的痛閾值比較，明確頰針療法鎮(zhèn)痛效應的時效、量效特點，為頰針療法臨床治療疼痛提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 2014 年 1—9 月選取健康2月齡清潔級大耳白兔40只(蘭州陸軍總醫(yī)院動物實驗中心提供，合格證號：0021062)，雌雄各半，體質(zhì)量2.0～2.5 kg。實驗前適應性喂養(yǎng)7 d，實驗室溫度25 ℃，濕度50%～55%。

1.2 實驗藥品試劑及儀器 弗氏完全佐劑(CFA)：Sigma公司，批號：CAS9007-81-2；卵蛋白干粉：Sigma公司，批號：SLBF-0342V；PL-200熱刺痛儀：成都泰盟軟件有限公司；針灸針：蘇州醫(yī)療用品廠有限公司，產(chǎn)品規(guī)格：0.25×25 mm；JA1003N 精密電子天平：濟南普納儀器設備有限公司；L-550 離心機：長沙恒宇實驗儀器設備有限公司。

1.3 動物分組 適應性喂養(yǎng)7 d后用熱痛閾測定法進行痛閾篩選，痛閾值低于3 s或高于10 s表示痛覺反應過敏和遲鈍，則淘汰不用。將篩選合格的白兔40只用Excel 2003軟件隨機分為正常組、模型組、體針組、頰針組，每組10只。

1.4 類風濕關節(jié)炎兔模型制備 參考相關文獻[2-7]方法將卵蛋白干粉按4 mg/ml的濃度與等量CFA混勻，充分震蕩攪拌約15 min，兩者成膠狀液體即可，然后用電推剪剪去兔背部和雙膝關節(jié)的毛，在模型組、體針組、頰針組白兔的背部肩胛骨之間對稱選擇3對共6個注射點，每個注射點皮下注射卵蛋白CFA混懸液0.2 ml，14 d后以相同劑量在6個點再次進行皮下注射，1周左右后，在兔雙膝關節(jié)內(nèi)分別注入卵蛋白干粉與0.9%氯化鈉溶液的混合液0.4 ml，濃度為20 mg/ml。1周后白兔進食量減少，活動減少，雙側(cè)膝關節(jié)腫脹，造模前后痛閾值比較有統(tǒng)計學差異為造模成功。正常組于相應部位、相應時間注射等量0.9%氯化鈉溶液。

本文創(chuàng)新點：

通過比較頰針與體針在同一次針刺時不同時間點痛閾值及不同治療次數(shù)的痛閾值，闡明頰針鎮(zhèn)痛效應的時間效應曲線、量效累加特點，為頰針臨床上留針時間、治療頻次、療程長短及療程間隔的制定提供理論依據(jù)，對臨床有一定指導意義。但其進一步的神經(jīng)生理學及神經(jīng)化學機制尚需進一步研究。

1.5 穴位選取 頰針組取頰針膝穴，取穴方法：髖與承漿穴連線中點處[1](見圖1)。體針組選取臨床治療關節(jié)炎的常用穴位膝眼：脛骨內(nèi)外側(cè)1 cm；足三里：小腿背外側(cè)上1/5折點處，約為腓骨小頭下1.2 cm，脛骨后1 cm處[8]。

圖1 膝穴定位圖

1.6 針刺方法 正常組：于實驗第27天開始，每天予以體針組、頰針組相同方法固定30 min。模型組：于實驗第27天開始，每天予以體針組、頰針組相同方法固定 30 min。體針組：于實驗第27天開始，選雙側(cè)后肢膝眼和足三里，用1寸30號毫針，直刺0.3～0.5寸，采用捻轉(zhuǎn)針法，每隔5 min行針1次，15 s/次，頻率100次/min，留針30 min，1次/d。頰針組：于實驗第27天開始，選頰針膝穴治療，用0.5寸30號毫針斜刺0.2～0.3寸,采用捻轉(zhuǎn)針法，每隔5 min行針1次，15 s/次，頻率100次/min，留針20 min，1次/d。

1.7 鎮(zhèn)痛效應量效觀察 PL-200熱刺痛儀采用高聚光燈產(chǎn)生可變強度的輻射光束，經(jīng)過紅外濾光鏡聚焦照射兔耳部測痛點，以免出現(xiàn)縮耳掙扎動作作為疼痛反應指標，自照射開始至兔出現(xiàn)反應的潛伏期時間(s)作為該兔的痛閾值。連測3次，取其平均值作為痛閾值。連續(xù)治療10次，分別在治療第1、4、7、10次針刺時測定針刺0、5、15、30、60、120、240 min各時間點痛閾值。

2 結果

2.1 造模成功與否判定 正常組造模前后痛閾值比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；模型組、體針組、頰針組造模后痛閾值低于造模前，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表1)。

2.2 各組家兔第1、4、7、10次針刺不同時間點痛閾值比較 第1、4、7、10次針刺方法和時間在痛閾值上存在交互作用(P<0.05)，時間在痛閾值上主效應顯著(P<0.05)，針刺方法在痛閾值上主效應不顯著(P>0.05)。正常組和模型組的痛閾值無時間效應(P>0.05)，體針組和頰針組的痛閾值有時間效應(P<0.01，見表2～5)。

2.3 頰針組鎮(zhèn)痛效應時效曲線 頰針組4次測量到的痛閾值隨時間變化的趨勢大致相同：5 min時痛閾值顯示明顯上升，30 min時達峰值，60 min時明顯下降，240 min時降到最低值(見圖2)。頰針組時間在痛閾值上主效應顯著(F=15.473，P<0.001)，頰針組時間與針刺次數(shù)在痛閾值上不存在交互作用(F=0.973，P=0.486)。

2.4 頰針組鎮(zhèn)痛效應量效曲線比較 頰針組第1次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第7次針刺時比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=-3.227,P=0.012)；頰針組第7次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第10次針刺時比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.463,P=0.656，見圖3)。

表1 造模成功與否判定

圖2 頰針組第1、4、7、10次針刺鎮(zhèn)痛效應時效曲線

Figure2 Time-effect relation of buccal needle acupuncture based on the 1th,4th,7th,10th treatments

圖3 頰針組第1、4、7、10次針刺鎮(zhèn)痛效應量效曲線

Figure3 Quantity-effect relation of buccal needle acupuncture based on the 1th,4th,7th,10th treatments

表2 各組第1次針刺不同時間點痛閾值比較

表3 各組第4次針刺不同時間點痛閾值比較

表4 各組第7次針刺不同時間點痛閾值比較

表5 各組第10次針刺不同時間點痛閾值比較

3 討論

頰針療法是針灸學中微針診療系統(tǒng)的一個新分支,是人體在面頰及周圍的全息投影系統(tǒng)，其是指在面頰部的特定穴位上針刺來治病的方法。是由王永洲醫(yī)師及方曉麗教授及其科研團隊以生物全息理論為指導，在實踐中總結的一種新的微針系統(tǒng)[9]?！邦a針理論”由頰針穴位圖譜、頰針基本穴位、頰針取穴的五大原則、針法及適應證共同組成。

研究表明，頰針療法治療疼痛性疾病的療效顯著，頰針較體針鎮(zhèn)痛效果迅速，且具有全身調(diào)節(jié)作用,通過730多例不同種族的肢體疼痛及內(nèi)臟疼痛患者的臨床觀察與驗證，頰針的即時止痛有效率達72.5%,充分體現(xiàn)了針灸鎮(zhèn)痛起效快的特點,且其具有取穴方便、效果迅速、適應證廣泛等優(yōu)點[9]。有研究應用頰針療法治療頸肩綜合征患者45例，總有效率達93.3%[10]。任超展等[11]應用頰針結合運動療法治療急性腰扭傷，總有效率達94.6%。劉強等[12]應用頰針結合運動療法治療落枕，治愈率為85.37%。侯春英等[13]應用頰針療法治療偏頭痛總有效率為90.00%，而常規(guī)針刺的對照組有效率為73.53%。

對穴位進行針刺時，針刺鎮(zhèn)痛效應呈現(xiàn)出一個漸進的過程，先經(jīng)過一個或長或短的潛伏期，然后針刺效應開始上升，達到一定水平后維持一段時間，又開始逐漸下降，回落到針刺前或比針刺前略高的水平，針刺鎮(zhèn)痛效應的發(fā)生發(fā)展與時間的關系，稱為針刺鎮(zhèn)痛作用的時間效應，可以用時間效應曲線來表示針刺效應與時間的關系，根據(jù)此曲線可將針刺鎮(zhèn)痛效應的時間過程分為潛伏期、上升期、高峰期和下降期[8]。

針刺鎮(zhèn)痛效應的時效特性，對于針灸臨床留針時間長短、治療頻次、每一療程長短及療程間隔的確定均具有重要的指導意義，了解針刺鎮(zhèn)痛效應的時間特征及其影響因素，對于臨床治療和實驗研究均非常重要。

機體的不同系統(tǒng)對針刺刺激的反應速度不同，不同性質(zhì)的病理過程、不同的針刺方法均會影響針刺顯效速度，所以表現(xiàn)在針刺鎮(zhèn)痛效應的潛伏期上也有所不同，潛伏期短的從幾秒到幾十分鐘，潛伏期長者，針刺效應在針刺后數(shù)小時或數(shù)天后才逐漸出現(xiàn)并發(fā)展到高峰。由于針效反應系統(tǒng)及病變性質(zhì)不同，針刺效應的高峰期維持長短也有所不同，針刺鎮(zhèn)痛作用的時間效應，不僅可在一次針刺過程中表現(xiàn)出來，在多次治療中仍表現(xiàn)出此種升降趨勢。

本研究結果顯示，體針組和頰針組的針刺鎮(zhèn)痛作用具有十分明顯的時間效應，體針組、頰針組鎮(zhèn)痛效應均隨時間變化而變化。頰針組5 min時開始顯示明顯的鎮(zhèn)痛效應，30 min時到達峰值，60 min時鎮(zhèn)痛效應明顯下降，240 min時已降到最低值。臨床頰針的留針時間一般為15～20 min，體針的留針時間多為30 min，此次的實驗結果與頰針臨床操作留針時間常規(guī)是一致的，為臨床頰針留針時間提供了一定的實驗依據(jù)。

針刺鎮(zhèn)痛效應存在逐日積累的特點，即針刺鎮(zhèn)痛的量效特性，但針刺治療的次數(shù)并非越多越好，針刺鎮(zhèn)痛效應量的積累作用有一定限度，治療次數(shù)達到一定程度后，針刺鎮(zhèn)痛效應就不再增加甚至開始下降。即針刺鎮(zhèn)痛是存在針刺鎮(zhèn)痛耐受的，針刺鎮(zhèn)痛耐受是指由于長時間針刺或反復多次針刺后，針刺鎮(zhèn)痛效應降低的一種現(xiàn)象，此種現(xiàn)象在針灸臨床上是常見的，針刺耐受的產(chǎn)生與針刺的治療頻次、療程的長短、療程的間隔均有關系。

本研究結果顯示，頰針組在針刺0、5、15、30、60、120、240 min各時間點上，第1次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第7次針刺時比較有差異，第7次針刺時鎮(zhèn)痛效應量效曲線與第10次針刺時比較無差異；說明隨著頰針治療次數(shù)的增加，鎮(zhèn)痛強度逐漸加強，但當治療次數(shù)增加到一定程度時鎮(zhèn)痛效應不再隨治療次數(shù)的增加而增加，臨床上頰針療法治療疼痛一療程一般為7 d，本實驗研究的結果與臨床實踐操作是一致的，說明頰針臨床療程的設定是合理的。

綜上所述，頰針療法具有明顯的時間效應，還具有鎮(zhèn)痛起效快、上升快，下降亦快的特點；體針表現(xiàn)為鎮(zhèn)痛效應起效慢、上升慢、下降亦慢。

作者貢獻：方曉麗進行研究的實施與可行性分析，對文章整體負責，并監(jiān)督管理；蒲瑞生進行研究設計與實施、資料收集整理，撰寫論文；劉丁龍、權可、蘇成紅、楊晨光、張延菊進行研究實施、評估、資料收集；頡旺軍進行質(zhì)量控制及審校。

本文無利益沖突。

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CharacteristicsoftheAnalgesicEffectofBuccalNeedleTherapyonRheumatoidArthritiswithRabbitsasaModel

PURui-sheng1，2，F(xiàn)ANGXiao-li1*，XIEWang-jun1，LIUDing-long1，QUANKe1，SUCheng-hong1，YANGChen-guang1，ZHANGYan-ju1

1.SchoolofAcupunctureandMassage,GansuUniversityofChineseMedicine，Lanzhou730000，China2.TianshuiRuishengtangChineseMedicineCentre，Tianshui741000，China

*Correspondingauthor:FANGXiao-li，Professor,Doctoralsupervisor;E-mail:fangxlzyxy@163.com

ObjectiveTo evaluate the analgesic effect of buccal needle therapy in a rabbit model of rheumatoid arthritis,in order to provide a reference for the clinical needle-retaining duration and treatment course of buccal acupuncture.MethodsThis study was conducted from January to September,2014.Forty clean level white lop-eared rabbits were randomly divided into 4 groups,normal group,model group,body needle group and buccal needle group,with 10 in each.The model group,body needle group and buccal needle group were prepared as the rheumatoid arthritis model,while no treatment was applied for the normal group.Since the 27th day after the starting of the experiment,both the model group and normal group were fixed for 30 min each day with the same method used for the body needle group and the buccal needle group;the rabbits of the body needle group were acupunctured at Xiyan points and Zusanli acupoints on bilateral hind limbs 1 time per day,the needle was retained for 30 min,and those in the buccal needle group were acupunctured at "Xi" acupoints with buccal needle 1 time per day,the needle was retained for 20 min.All the four groups were treated 10 times continuously,and the pain thresholds were measured at acupuncture times of 0,5,15,30,60,120,and 240 min,respectively,during the 1st,4th,7th and 10th acupuncture treatments.ResultsBased on the pain thresholds,it was identified that there was interaction effect between acupuncture treatment method and duration(P<0.05) during the 1st,4th,7th and 10th acupuncture treatments.The principal effect produced by acupuncture treatment duration on pain threshold was significant(P<0.05),while that produced by acupuncture treatment method on pain threshold was not(P>0.05).The pain thresholds of the body needle group and buccal needle group were significantly affected by the acupuncture treatment duration(P<0.01),but those of the normal group and the model group were not(P>0.05).The principal effect of acupuncture treatment duration on pain threshold was significant in the buccal needle group(F=15.473,P<0.001).There was no interaction effect between the duration of buccal needle treatment and the number of acupuncture on the pain threshold(F=0.973,P=0.486).The difference in the analgesic effect curves between the 1st and 7th buccal needle acupuncture treatments was significant(t=-3.227,P=0.012);but it was not significant(t=0.463,P=0.656) between the 7th and 10th buccal needle acupuncture treatments.ConclusionThe analgesic effect of buccal needle therapy has obvious time dependence,and it shows typical characteristics of quick response,rapid rise and decline.

Arthritis,rheumatism;Acupuncture and moxibustion therapy;Analgesia;Dose-effect relationship,acupuncture and moxibustion;Buccal acupuncture

國家自然科學基金資助項目(81260559)

R 593.22

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.00.142

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2017-07-15；

2017-10-11)

(本文編輯：崔莎)