秦嶺野板栗殼棕色素提取物的分離與純化研究

王轉莉　趙春寶　徐雄雄　張定

【摘 要】本文以秦嶺野板栗殼為原料，采用浸取法提取色素，利用硅膠色譜柱對其進行分離純化，并通過紫外可見分光光度計對色素進行表征。結果表明：該色素分離提純最佳洗脫液為8：2乙醇—氯仿溶液。

【關鍵詞】秦嶺野板栗殼；棕色色素；提純

中圖分類號： TQ 047 文獻標識碼： A

板栗是山毛櫸科栗屬中的喬木或灌木的總稱，約有7～9種。板栗殼棕色素是一種從板栗殼中提取出的具有優良的天然抗氧化性和自由基清除性的黃酮類化合物[1]。該色素水溶性好，色價高，性質穩定， 其水溶液對酵母菌、大腸桿菌、霉菌、枯草桿菌、青霉、痢疾桿菌等均有抑制和殺滅作用[2]，可以作為天然色素應用于飲食品行業，具有很高的研究價值和應用前景。

1 板栗殼色素提取

1.1 儀器與材料

紫外可見分光光度計（北京普析），板栗殼（秦嶺山區），95%乙醇（分析純）。

1.2 原材料預處理

將板栗殼在水中浸泡攪拌3分鐘后，撈出在日光下晾曬2天，置于60℃下真空干燥2 h，然后粉碎、30目分樣篩篩分后備用。

1.3 棕色素提取

稱取板栗殼粉末于150 mL圓底燒瓶中，以液料比為1：15加入40%乙醇，80℃水浴加熱6h，冷卻至室溫，抽濾、旋蒸、真空干燥后得到深棕色固體。

2 洗脫劑的選擇

2.1 乙酸乙酯—氯仿展開劑

稱取粗提取物0.10g，溶于10.00mL無水乙醇中，剪取1cm寬硅膠色譜板5塊，將其分別放入乙酸乙酯—氯仿體積比為：9：1、8：2、5：5、2：8、1：9的溶液中，待其展開一定距離后，取出晾干，用9%的氯化鐵溶液顯色，放在紫外燈下觀察，計算其Rf值。從表3.6可以看出，利用乙酸乙酯—氯仿展開劑，不可以將板栗殼棕色素分離開來。

2.2 乙醇—氯仿展開劑

實驗步驟2.1，從表3.7可以看出，利用乙醇—氯仿展開劑，選擇乙醇—氯仿體積比為8：2的洗脫劑對板栗殼棕色素進行分離。

2.3 甲醇—氯仿展開劑

實驗步驟2.1，從表3.8可以看出， 利用甲醇—氯仿展開劑，可選擇甲醇—氯仿體積比為8：2的洗脫劑對板栗殼棕色素進行分離。

3 硅膠色譜柱分離棕色素

運用濕法裝柱法，填裝高度為20cm的硅膠柱，120℃活化2h。干法上樣，采用8：2乙醇—氯仿洗脫溶液進行洗脫后，轉蒸洗脫液、真空干燥得亮棕色固體。

4 紫外光譜分析

圖4.1為提取純化后色素紫外光譜圖，從圖中可以看出：分離后板栗殼色素在250nm～310nm和350nm～400nm有兩個主要的吸收峰，分別為A-環苯酰系統和B-環肉桂酰系統吸收峰，說明該色素為類黃酮化合物，與文獻一致[4]。

5 結論

以秦嶺野板栗殼為原料，采用浸取法提取色素，利用硅膠色譜柱對其進行分離純化，并通過紫外可見分光光度計對色素進行表征。結果表明：該色素分離提純最佳洗脫液為8：2乙醇—氯仿溶液，這一工作為秦嶺野板栗色素提取、應用提供一些參考。

【參考文獻】

[1]肖迪，孫瑾凱，許芳.板栗球苞殼棕色素提取及性能研究[J].河南化工，2009，（04）：22-24.

[2]金黎明，陳苛蒙，王寧，候熙彥，王茹，吳淵，岳玉蓮.板栗殼棕色素的提取及性質研究[J].食品研究與開發，2016，18（06）：50-54.

[3]王轉莉，方振華，尙雨潔，何亞萍.秦嶺山核桃殼中天然棕色素的提取研究[J].應用化工，2017，45（05）：891-892

[4]唐浩國.黃酮類化合物研究[M].北京：科學出版社，2001：95-100.endprint