三陰乳腺癌組織PTEN蛋白表達變化及與患者預后的關系

萬珍玲，劉超

(1海南省婦幼保健院，海口570206；2天津市胸科醫院)

·臨床研究·

三陰乳腺癌組織PTEN蛋白表達變化及與患者預后的關系

萬珍玲1，劉超2

(1海南省婦幼保健院，海口570206；2天津市胸科醫院)

目的觀察三陰乳腺癌組織同源性磷酸酶-張力蛋白(PTEN)的表達變化，并探討其與患者預后的關系。方法選擇三陰乳腺癌組織標本80例份、乳腺纖維腺瘤正常乳腺組織石蠟標本25例份，采用免疫組化法檢測二者PTEN蛋白表達。對80例三陰乳腺癌患者進行隨訪，記錄無病生存期及總生存期。用Cox多因素回歸分析三陰乳腺癌患者預后的影響因素。結果乳腺癌組織PTEN陽性表達率低于正常乳腺組織(P<0.05)。臨床分期為Ⅰ、Ⅱ期的三陰乳腺癌患者，其組織中PTEN蛋白陽性表達率高于臨床分期Ⅲ、Ⅳ期患者(P<0.05)；發生淋巴結轉移的三陰乳腺癌患者，其組織中PTEN蛋白陽性表達率低于未發生淋巴結轉移的患者(P<0.05)。PTEN蛋白表達陰性的三陰乳腺癌患者術后1、2、5年生存率均低于PTEN蛋白表達陽性患者(P均<0.05)。Cox多因素回歸分析結果顯示，腫瘤直徑、淋巴結轉移、臨床分期及PTEN蛋白表達是三陰乳腺癌患者5年無瘤生存的獨立影響因素(P均<0.05)。結論三陰乳腺癌組織中PTEN蛋白呈低表達；PTEN蛋白表達陰性的三陰乳腺癌患者預后差。

三陰乳腺癌；同源性磷酸酶-張力蛋白；預后

三陰乳腺癌是指孕激素受體、陰性人表皮生長因子受體2和雌激素受體均表現為陰性的乳腺癌[1]。三陰乳腺癌發病年齡早、惡性程度高、易發生早期局部復發及遠處轉移、侵襲性強，是乳腺癌分型中預后最差的一種[2]。15%～20%乳腺癌為三陰乳腺癌[3]。研究結果顯示，27.3%～80.0%乳腺癌組織同源性磷酸酶-張力蛋白(PTEN)表達異常[4]，即PTEN表達缺失或低表達會影響乳腺腫瘤細胞的增殖及患者預后。PTEN可作為診斷乳腺癌發展程度的潛在指標。PTEN基因啟動子區異常甲基化的乳腺癌患者預后較差。本研究觀察三陰乳腺癌組織中PTEN蛋白的表達變化，并探討其與患者預后的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年5月～2015年4月本院收治的乳腺癌患者，均為女性，年齡42～65(51±8.56)歲；均行手術治療，并根據情況進行放化療，均未進行內分泌治療；患者均初診，以前未做過治療。乳腺纖維腺瘤患者均為女性，年齡41～65(51±9.25歲)。二者年齡具有可比性。均排除肝炎病毒及人類免疫缺陷病毒感染者；合并自身免疫性疾病、惡性腫瘤、嚴重心腦血管疾病、精神疾患者。患者及家屬均簽署知情同意書。收集手術切除的三陰乳腺癌組織、乳腺纖維腺瘤正常乳腺組織石蠟標本。

1.2 乳腺癌組織與正常乳腺組織PTEN蛋白表達檢測 采用免疫組化法。用10%甲醛固定組織標本，石蠟包埋，制成4 μm厚的組織切片，常規脫蠟、水化，抗原熱修復采用枸櫞酸鹽緩沖液。PTEN抗體按照1∶100的比例進行稀釋。采用PBS替代一抗體，陽性對照物為試劑盒自帶已知陽性組織。由2名具有豐富經驗的病理醫師觀察結果。PTEN蛋白表達于細胞膜及細胞質，陽性染色為深褐色。隨機選擇10個高倍鏡視野(×400)計數1 000個乳腺癌細胞。參考張慧宇等[5]的計分方法，即深色計3分，中間色計2分，淡色計1分，無色計0分；陽性細胞百分比≥51%計3分，26%～50%計2分，6%～25%計1分，≤5%計0分。以上二者積分乘積≥3為陽性。

1.3 隨訪 通過門診及電話對80例三陰乳腺癌患者的身體狀況進行隨訪，包括患者無病生存期及總生存期。自手術切除腫瘤開始至發生復發或死亡的時間為無病生存期；自手術切除腫瘤開始至死亡或末次隨診的時間為總生存期。隨訪至術后24個月。

1.4 統計學方法 采用SPSS20.0統計軟件。計數資料比較采用χ2檢驗；Cox多因素回歸分析三陰乳腺癌患者5年無瘤生存的影響因素。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組織及正常乳腺組織中PTEN蛋白表達比較 PTEN蛋白在乳腺癌組織及正常乳腺組織中的陽性表達率分別為41.25%(33/80)、76.00%(19/25)，二者比較差異有統計學意義(χ2=8.65，P<0.05)。

2.2 PTEN蛋白表達與三陰乳腺癌患者臨床病理參數的關系 臨床分期為Ⅰ、Ⅱ期的三陰乳腺癌患者，其組織中PTEN蛋白陽性表達率高于臨床分期Ⅲ、Ⅳ期患者(P<0.05)；發生淋巴結轉移的三陰乳腺癌患者，其組織中PTEN蛋白陽性表達率低于未發生淋巴結轉移的患者(P<0.05)；不同年齡段及腫瘤直徑大小不同的三陰乳腺癌患者其PTEN蛋白陽性表達率比較差異無統計學意義(P均>0.05)。見表1。

表1 PTEN蛋白表達與三陰乳腺癌患者臨床病理參數的關系

2.3 PTEN蛋白表達與三陰乳腺癌患者預后的關系 PTEN蛋白表達陰性的三陰乳腺癌患者術后1年生存率為72.34%(34/47)，2年生存率為59.57%(28/47)，5年生存率為42.55%(20/47)；PTEN蛋白表達陽性的三陰乳腺癌患者術后1年生存率為90.91%(30/33)，2年生存率為75.76%(25/33)，5年生存率為57.58%(19/33)。PTEN蛋白表達陰性的三陰乳腺癌患者術后1年、2年、5年生存率均低于PTEN蛋白表達陽性患者(P均<0.05)。Cox多因素回歸分析結果顯示，腫瘤直徑、淋巴結轉移、臨床分期及PTEN蛋白是三陰乳腺癌患者5年無瘤生存的獨立影響因素(P均<0.05)。見表2。

3 討論

乳腺癌是女性發病率最高的惡性腫瘤，且其發病率在逐年上升。其中三陰乳腺癌是乳腺癌中治愈率最低的一種亞型[6]。臨床上通常采取手術治療及術后化療控制疾病復發與轉移，延長患者生命。早期診斷是提高患者無瘤生存率和生活品質的主要因素。相關報道表明，多數進行信號傳導的蛋白通常為抑癌基因或癌基因的產物，而乳腺癌組織的PTEN-PI3K/AKT通路異常活躍，PTEN基因的突變缺失是引起乳腺癌的關鍵[7]。原發癌及轉移性癌組織中都檢測出大量的PTEN不斷發生啟動子甲基化，進而活性喪失。大概50%結直腸癌及大量其他腫瘤組織中都存在PTEN基因突變，并且突變后的PTEN基因功能缺失[8]。PTEN蛋白能夠抑制細胞遷移、誘導細胞凋亡、抑制細胞周期進展和局部黏附等[9]。可見PTEN基因是腫瘤的抑制基因[10]。

表2 三陰乳腺癌患者5年無瘤生存率Cox多因素回歸分析

本研究結果顯示，乳腺癌組織中PTEN蛋白陽性表達率低于正常乳腺組織，由此可以推斷，PTEN蛋白與乳腺癌的發生發展密切相關。PTEN基因缺失及突變并不是PTEN蛋白表達下降的惟一原因，翻譯后的異常調控能夠引起PTEN蛋白降解，而啟動子甲基化等基因外機制可以導致PTEN表達降低。本研究中，臨床分期為Ⅰ、Ⅱ期的三陰乳腺癌患者，其組織中PTEN蛋白陽性表達率高于臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期的患者，未發生淋巴結轉移的患者其組織中PTEN蛋白陽性表達率高于發生淋巴結轉移的患者。即PTEN蛋白陽性表達率與乳腺癌組織病變嚴重程度有關，該結果與相關研究[11]結果相同。PTEN蛋白表達變化與乳腺癌發生發展有關。

PTEN蛋白表達為陰性的三陰乳腺癌患者其術后1、2、5年生存率均顯著低于PTEN蛋白陽性患者。Cox多因素回歸分析結果顯示，腫瘤直徑、淋巴結轉移、臨床分期及PTEN蛋白是三陰乳腺癌患者5年無瘤生存的獨立影響因素。說明PTEN蛋白影響三陰乳腺癌患者預后。PTEN蛋白表達陰性的三陰乳腺癌患者預后差。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.37.013

R737.9

A

1002-266X(2017)37-0040-03

中國博士后科學基金資助項目(2015M581308)。

劉超(E-mail：896221780@qq.com)

2017-06-09)