2017年蘇州市規模豬場豬偽狂犬病血清學調查

顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

(江蘇省蘇州市動物疫病預防控制中心,江蘇蘇州 215125)

2017年蘇州市規模豬場豬偽狂犬病血清學調查

顧津僮 盛水興 何文峰 徐嘉萍

(江蘇省蘇州市動物疫病預防控制中心,江蘇蘇州 215125)

為了解我蘇州地區豬偽狂犬病的野毒感染情況,對蘇州市3個市(區)的15家自繁自養規模豬場共971份豬血清樣品進行了豬偽狂犬病gB抗體和gE抗體的監測與分析,結果顯示:971份樣品中,偽狂犬gE抗體陽性497份,gE抗體陽性率為51.15%,其中生產母豬樣品394份,偽狂犬gE抗體陽性率為63.2%;公豬樣品130份,偽狂犬gE抗體陽性率為46.92%。結果顯示,蘇州地區中存在豬偽狂犬病痛毒感染,且某些豬場豬偽狂犬病病毒的感染率較高。

豬偽狂犬病;血清學調查;凈化

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的豬的急性傳染病。該病在豬呈爆發性流行。引起妊娠母豬流產、死胎，公豬不育，新生仔豬的大量死亡，育肥豬呼吸困難、生長停滯等，是危害全球養豬業的重大傳染病之一[1]。偽狂犬病毒在全世界廣泛分布，偽狂犬病自然發生于豬、牛、綿羊、犬和貓，另外，多種野生動物、肉食動物也易感。我國將其列為二類動物疫病。2006～2007年度，豬偽狂犬病在全國大范圍的傳播流行，使豬病的感染流行復雜化；2011年以來，豬偽狂犬變異株在全國多地區流行，造成了嚴重的經濟損失。

疫苗接種是預防和控制偽狂犬病的根本措施。目前我國普遍使用的是偽狂犬病病毒gE基因缺失疫苗，且使用偽狂犬病毒gE抗體ELISA檢測試劑盒能夠檢測豬群中的偽狂犬野毒感染豬[2]。為了解我市豬偽狂犬的免疫和野毒感染情況，2017年2月至6月，對我市部分地區的18個自繁自養規模豬場進行偽狂犬病抗體監測，希望能為我市偽狂犬病的防控和凈化提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

2017年2月-2017年6月，采自蘇州市常熟市、太倉市、吳江區共18家自繁自養規模豬場的971份豬血清樣品。其中有15家豬場均免疫豬偽狂犬gE基因缺失疫苗，有3家豬場未免疫豬偽狂犬疫苗。

1.2 檢測試劑

美國IDEXX公司生產的偽狂犬gB抗體檢測試劑盒，批號：HM634、LM951、CN405；美國IDEXX公司生產的偽狂犬gE抗體檢測試劑盒，批號：KM818、AN178、CN428。

1.3 試驗儀器

微量移液器、微量振蕩儀、洗板機、酶標儀等。

1.4 方法步驟

采取ELISA方法檢測：1取出抗原包被板，在每孔中加入50μl樣品稀釋液，在相應的孔中加入50μl陰性對照、陽性對照和待檢樣品，充分混勻，陰、陽性對照各兩孔，在室溫下孵育60in；2用300ul洗滌液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100μl酶標抗體，在室溫下孵育20min；3再用300μl洗滌液洗板5次，在吸水材料上拍干后，每孔加入100μlTMD底物溶液，在室溫下避光孵育15min；4每孔加入50μl終止液終止反應；5酶標儀調至650nm波長，讀取對照及樣品的OD值。

1.5 結果判定

S/N=樣品OD值/陰性對照OD值。S/N值小于等于0.6判定為抗體陽性，S/N值大于0.7判定為抗體陰性，S/N值大于0.6同時小于等于0.7的判定為可疑。

2 結果

（1）對18個自繁自養的規模豬場偽狂犬疫苗免疫情況進行統計，15個場使用了偽狂犬疫苗，占采樣場數的83.33%。疫苗免疫場共采集樣品864份，其中PRV gB抗體陽性數686份，陽性率79.40%，PRV gE抗體陽性數446份，陽性率51.62%。3個未免疫場共采集樣品107份，PRV gB抗體陽性數65份，陽性率60.75%；PRV gE抗體陽性數51份，陽性率47.66%。（見表1、表2）

（2）本次調查的18個豬場偽狂犬野毒感染場達100%，其中PRV gE抗體陽性率大于10%的場（高風險場）有17個，占94.44%；PRV gE抗體陽性率達到100%的場有3個，占16.66%。

表1 免疫豬場偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測結果

（3）本次調查按照生產母豬、公豬、后備母豬、育肥豬分別進行了統計（見表3）：生產母豬樣品共394份，PRV gB抗體陽性數364份，陽性率92.39%；PRV gE抗體陽性數249份，陽性率63.2%。公豬樣品共130份，PRV gB抗體陽性數110份，陽性率84.62%；PRV gE抗體陽性數61份，陽性率46.92%。后備母豬樣品共195份，PRV gB抗體陽性數146份，陽性率74.87%；PRV gE抗體陽性數95份，陽性率48.72%。育肥豬樣品共252份，PRV gB抗體陽性數135份，陽性率77.34%；PRV gE抗體陽性數92份，陽性率36.51%。

（4）據統計，公豬樣品采自17個豬場，16個場被檢出PRV gE抗體，公豬野毒感染場占94.12%；生產母豬樣品采自17個豬場，17個場均檢出PRV gE抗體，生產母豬野毒感染場達100%；后備母豬樣品采自13個豬場，8個場檢出PRV gE抗體，后備母豬野毒感染場占61.54%；育肥豬樣品采自15個豬場，8個場檢出PRVgE抗體，育肥豬野毒感染場占53.33%。

表2 未免疫豬場偽狂犬病gB抗體和gE抗體檢測結果

表3 不同豬群偽狂犬gB抗體和gE抗體檢測結果

3 分析與討論

（1）本次調查顯示，蘇州市部分地區豬偽狂犬野毒感染很嚴重，感染率達51.18%，調查的18個豬場均有不同程度的野毒感染，且這18個豬場分布于3個市（區），說明偽狂犬病毒的感染在我市分布較為廣泛。根據調查，這18個豬場中有2個豬場表示曾確診過豬偽狂犬病，其他豬場均未曾確診相關病例；但據統計這些場的平均死胎流產等繁殖障礙率為2.69%，平均仔豬早期死亡率為7.69%，說明大多數豬場呈隱形感染狀態。綜上調查，筆者認為本地區開展偽狂犬防控和凈化措施已迫在眉睫。

（2）調查顯示我市偽狂犬病免疫效果層次不齊，未免疫場占本次調查的16.67%，免疫場中多數場存在免疫程序不規范、疫苗接種形式單一、疫苗選擇不科學等問題。因此，加強偽狂犬病疫苗免疫是防控偽狂犬病的首要任務：選擇質量穩定的疫苗，滅活苗和弱毒苗科學使用；根據當地流行狀況和疫苗廠家的推薦，指定符合各豬場切實有效的免疫程序，不要盲目、片面的免疫；加強仔豬和育肥豬的免疫，采用滴鼻+肌注的形式免疫接種。

（3）本次調查的18個豬場的野毒感染率非常高，很大程度上是因為公豬和生產母豬野毒感染非常嚴重引起的，公豬和生產母豬的PRV gE抗體陽性率分別達到46.92%和63.2%。由于規模養殖場一般都是采取“自繁自養”方式，若種豬感染偽狂犬病則該病將在養殖場內持續存在[3]，做好種豬PRV野毒抗體檢測，及時清除帶毒豬，加快培育健康優質的后備豬群，并結合進行免疫抗體的監測和評估，對偽狂犬病的控制和凈化至關重要[4]。

（4）本次試驗同時對偽狂犬gB抗體和gE抗體進行了檢測，檢測結果顯示gB抗體陽性率為77.34%，但由于gE野毒抗體的陽性率也較高，因此本次偽狂犬gB抗體的檢測結果并不能準確反映疫苗免疫效果的好壞，只能作為部分參考用。但筆者建議常規監測中仍應同步檢測gB抗體與gE抗體，在凈化工作中掌握好仔豬的母源抗體水平、野毒陰性豬的免疫抗體保護水平非常重要，免疫程序的制定也需要清楚免疫抗體的消長規律。

（5）偽狂犬病毒感染與豬場生物安全管理、區域病毒變異及豬群自身免疫水平相關[5]。良好的飼養管理水平，完善的生物安全措施，是凈化偽狂犬病的必要條件。如豬場禁養犬貓，定期滅鼠、殺蟲，定期對豬舍、場地、用具消毒，飼喂優質、新鮮飼料，對病死豬嚴格進行無害化處理等措施。

（6）《國家中長期動物疫病防治規劃（2012-2020）》中已明確豬偽狂犬病的根除計劃，我省也出臺了多種政策來促進豬偽狂犬病的凈化工作，各大科研機構對豬偽狂犬病的研究不斷深入，再加上各豬場對豬偽狂犬病的凈化意識逐漸提高。筆者相信偽狂犬病的形勢會不斷好轉，很快達到凈化標準。

[1]陸承平.獸醫微生物學[M]. 北京：中國農業出版社，2001：411-483.

[2]楊文萍，顧真慶，孫海鳳，等.偽狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析[J].畜牧與獸醫，2014，46（10）：11-14.

[3]王瓊秋，李阿黑，蘇寶昆，等.綠春縣2003-2008年豬偽狂犬病血清流行病學調查[J].中國畜禽種業，2009，（3）：35-36.

[4]畢峻龍，楊培昌，肖俊，等.2009年-2003年云南省楚雄地區豬偽狂犬病血清流行病學調查和防控措施研究[J].動物醫學進展，2015，36（4）：117-120.

[5]焦顯芹，杜紅喜，賀紀云，等.我國規模化豬場偽狂犬病野毒感染規律的調查[J].畜牧與獸醫，2014，46（11）：92-96.

江蘇省農業三新工程項目“生豬偽狂犬病綜合凈化技術”合同編號：SXGC[2016]084