M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌惡性程度的相關性分析

王國慶，陶 陶 ，蘇 歡，王雪晴 ，陳恕求，陳 明，張麗華

M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌惡性程度的相關性分析

王國慶1，陶 陶2，蘇 歡3，王雪晴1，陳恕求3，陳 明3，張麗華1

目的探討前列腺癌組織M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌病理分級和分期的相關性。方法選取58例行根治性前列腺癌切除患者，對病理標本行HE和免疫組化SP法染色，確定腫瘤分期、病理分級及有無M2型巨噬細胞浸潤，采用χ2檢驗分析M2型巨噬細胞浸潤與腫瘤分級和分期的相關性。結果M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組≥T2c為71.4%，發生淋巴結轉移為60.0%，明顯高于無M2型巨噬細胞浸潤組(χ2=5.97，P=0.015；χ2=10.28，P=0.001)；M2型巨噬細胞浸潤與無M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組的病理分級差異無統計學意義(P>0.05)。結論M2型巨噬細胞浸潤可能參與前列腺癌細胞的生長和轉移；其相關病理、生理機制有待進一步分析。

前列腺腫瘤；巨噬細胞；病理分級；臨床分期

前列腺癌是男性泌尿生殖系統常見的惡性腫瘤，有數據顯示2009年我國前列腺癌的發病率為9.92/10萬，2015年我國前列腺癌發病率增至60.3/10萬，病死率達26.6/10萬[1]。前列腺癌已成為威脅中國男性健康的主要疾病之一，其發生和進展機制亟待深入分析。

既往研究表明，炎癥反應的主要作用是促進傷口愈合、組織修復以及對抗各類感染。近年研究發現，炎癥反應尤其是慢性非可控炎癥反應中的炎性細胞浸潤于腫瘤組織中可顯著促進腫瘤的惡性進展。在肝癌、胃癌、食管癌、結腸癌和膀胱癌等多種實體腫瘤中，人們發現炎癥細胞可以促進腫瘤滋養血管生成、DNA損傷、改變微環境以促進腫瘤轉移和逃避免疫應答[2]。這些炎癥細胞包括巨噬細胞、肥大細胞、中性粒細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞等[3-6]。文獻報道[7-8]循環血液中的炎癥細胞比值(中性粒細胞/淋巴細胞)可以作為預測前列腺癌臨床分期、病理分級和預后的重要指標。本實驗檢測58例前列腺癌，分析腫瘤組織有無炎癥細胞浸潤與臨床病理特征的關系，探討前列腺癌炎癥微環境與前列腺癌的惡性表型之間的相關性。

1 材料與方法

1.1臨床資料選取2014～2015年東南大學附屬中大醫院泌尿外科58例前列腺癌標本(均行腹腔鏡前列腺癌根治+淋巴清掃)，平均年齡(72.3±7.2)歲；Gleason評分≤7分者35例，8～10分者23例。臨床分期

1.2方法腫瘤組織行HE染色和免疫組化SP法染色，200倍顯微鏡下觀察腫瘤組織周圍有無M2型巨噬細胞浸潤。

2 結果

2.1臨床特征HE染色示部分前列腺癌組織間質內存在M2型巨噬細胞浸潤，巨噬細胞體積較大，形態不規則，胞質嗜酸性染色，核稍偏位，核卵圓形，染色質深染(圖1)；部分前列腺癌組織間質內無M2型巨噬細胞浸潤(圖2)。免疫組化SP法染色示M2型巨噬細胞標志物CD163蛋白呈陽性(圖3)；M2型巨噬細胞標志物CD163蛋白呈陰性(圖4)。

①②③④

圖1有M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌病理組織HE染色，可見典型的M2型巨噬細胞，細胞體積較大，形態不規則，核稍偏位，染色質深染圖2無M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌病理組織HE染色圖3巨噬細胞標志物CD163蛋白呈陽性，SP法圖4巨噬細胞標志物CD163蛋白呈陰性，SP法

2.2M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌局部進展的相關性M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組≥T2c為71.4%，鏡下未見M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組≥T2c為39.1%(χ2=5.97，P=0.015，表1)。

2.3M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌淋巴結轉移的相關性M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組發生淋巴結轉移為60.0%；鏡下無M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組發生淋巴結轉移為17.4%(χ2=10.28，P=0.001，表1)。

表1 M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌局部進展和淋巴結轉移的相關性

*P<0.05

2.4M2型巨噬細胞浸潤與前列腺癌病理分級的相關性M2型巨噬細胞浸潤與無M2型巨噬細胞浸潤的前列腺癌組的病理分級，差異無統計學意義(P>0.05)

3 討論

目前，根治性切除和放療是治愈局限性前列腺癌的主要方法。但是，對于已有遠處轉移、不適宜手術或治療后復發(轉移)等情況，通常選擇內分泌治療。研究表明，80%以上的患者可通過雄激素剝奪治療獲得疾病的緩解，但經過14～30個月的中位時間后，大部分患者的病變均逐漸發展為去勢抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer, CRPC)。患者一旦發生去勢抵抗和遠處轉移，預后較差[9]。雖然多種藥物包括多西紫杉醇、阿比特龍、恩雜魯胺等可用于CRPC的治療，但其療效仍然有限。目前，CRPC已成為晚期前列腺癌患者主要死因[10]。因此，探討前列腺癌的進展機制，尋找新的分子靶點，對延緩疾病進程和降低晚期腫瘤的病死率具有重大作用。

近年越來越多的研究證實腫瘤相關炎癥反應與腫瘤的發生、發展密切相關，很多腫瘤起源于感染、慢性炎性刺激和炎癥反應：腫瘤相關炎癥反應的主要特點是炎性細胞的滲透、細胞因子產生、組織重建以及血管生成。其中，中性粒細胞可以分泌大量血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)，而內皮細胞分泌的趨化因子又可以誘導中性粒細胞向腫瘤趨化，為腫瘤生長和增殖提供適宜的環境，促使腫瘤血管形成，進而加快腫瘤的生長[2]。Nonomura等[11]發現在接受內分泌治療的前列腺癌患者病理切片中，腫瘤相關巨噬細胞(tumour-associated macrophage,TAM)計數較低組的預后明顯優于計數較高組。Lanciotti等[12]通過對93例前列腺癌根治術后的病理切片與生化復發進行關聯分析發現，高密度的TAM浸潤是前列腺癌復發的獨立危險因子。

巨噬細胞有兩種已經明確的分化表型，即M1型和M2型。M1型巨噬細胞常分泌引起輔助性T細胞(Th)1型免疫反應的細胞因子，M2型巨噬細胞則常分泌引起Th2型免疫反應的細胞因子。研究表明，TAM具有M2型巨噬細胞特性，高表達CD163、CD206、Arg-1等M2型巨噬細胞的標記分子，同時主要組織相容性復合體低表達，并且介導VEGF、MMP-9、殼多糖酶樣蛋白等細胞因子的分泌，促進腫瘤的血管生成、浸潤、轉移等[13]。本組回顧性分析58例前列腺癌患者術后病理切片中炎性細胞浸潤與腫瘤臨床分期、病理分級的相關性，發現M2型巨噬細胞的浸潤與腫瘤的局部生長和淋巴轉移呈顯著的正相關，與腫瘤的病理分級未見明顯相關性。本組由于樣本量較少，且可能存在地域差異；M2型巨噬細胞浸潤是否影響前列腺癌患者的生化復發，以及M2型巨噬細胞浸潤促進前列腺癌細胞生長和轉移的相關分子機制尚有待于進一步深入探討。

[1] Chen W, Zheng R, Baade P D,etal. Cancer statistics in China, 2015[J]. CA Cancer J Clin, 2016,66(2):115-132.

[2] Khan S, Jain M, Mathur V,etal. Chronic inflammation and cancer: paradigm on tumor progression, metastasis and therapeutic intervention[J]. Gulf J Oncol, 2016,1(20):86-93.

[3] Coffelt S B, Lewis C E, Naldini L,etal. Elusive identities and overlapping phenotypes of proangiogenic myeloid cells in tumors[J]. Am J Pathol, 2010,176(4):1564-1576.

[4] Denardo D G, Andreu P, Coussens L M. Interactions between lymphocytes and myeloid cells regulate pro-versus anti-tumor immunity[J]. Cancer Metastasis Rev, 2010,29(2):309-316.

[5] Egeblad M, Nakasone E S, Werb Z. Tumors as organs: complex tissues that interface with the entire organism[J]. Dev Cell, 2010,18(6):884-901.

[6] Johansson M, Denardo D G, Coussens L M. Polarized immune responses differentially regulate cancer development[J]. Immunol Rev, 2008,222:145-154.

[7] 晉學飛，李宏巖，劉恒昌，等. 根治性前列腺癌切除術患者外周血中性粒細胞-淋巴細胞比值與預后的關系[J]. 中華實驗外科雜志, 2015,32(12):2967-2969.

[8] 付 凱，陳楚杰，林藩雄，等. 術前中性粒細胞與淋巴細胞比值與前列腺癌惡性度的關系探討[J]. 中華腔鏡泌尿外科雜志(電子版), 2015,9(5):13-16.

[9] Tao T, Liu D, Liu C,etal. Autoregulatory feedback loop of EZH2/miR-200c/E2F3 as a driving force for prostate cancer development[J]. Biochim Biophys Acta, 2014,1839(9):858-865.

[10] Tyson M D, Bryce A. The effect of enzalutamide and bicalutamide on patient-reported quality of life outcomes: results from the TERRAIN study[J]. Eur Urol, 2016,71(4):543-544.

[11] Nonomura N, Takayama H, Nakayama M,etal. Infiltration of tumour-associated macrophages in prostate biopsy specimens is predictive of disease progression after hormonal therapy for prostate cancer[J]. BJU Int, 2011,107(12):1918-1922.

[12] Lanciotti M, Masieri L, Raspollini M R,etal. The role of M1 and M2 macrophages in prostate cancer in relation to extracapsular tumor extension and biochemical recurrence after radical prostatectomy[J]. Biomed Res Int, 2014,2014:486798.

[13] Chen Y, Zhang S, Wang Q,etal. Tumor-recruited M2 macrophages promote gastric and breast cancer metastasis via M2 macrophage-secreted CHI3L1 protein[J]. J Hematol Onco, 2017,10(1):36.

RelationshipbetweenM2microphageinfiltrationandthemalignantdegreeofprostatecancer

WANG Guo-qing1, TAO Tao2, SU Huan3, WANG Xue-qing1, CHEN Shu-qiu3, CHEN Ming3, ZHANG Li-hua1

(1DepartmentofPathology,3DepartmentofUrology,ZhongdaHospital,MedicalSchool,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;2DepartmentofUrology,AnhuiProvincialHospital,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230001,China)

PurposeTo investigate the relationship between M2 microphage infiltration and the pathological grading and staging of prostate cancer.Methods58 patients who accepted the radical resection of prostate cancer were selected. After operation, pathologic specimens were hematoxylin eosin stained and immunohistochemical of SP stained to identify the pathological grading, staging, and M2 microphage infiltration. Then, Chi-squared test was used to analyze the relationship between M2 microphage infiltration and the pathological grading and staging of prostate cancer.ResultsThere were 71.4% high stage (≥T2c) cases and 60% lymph node metastasis cases in M2 microphage infiltration group, which was significantly higher than those in non M2 microphage infiltration group. However, there was no relationship between M2 microphage infiltration and pathological grading.ConclusionM2 macrophage infiltration may participate in the prostate cancer cell growth and metastasis, whose pathophysiological mechanism needs further exploration.

prostate neoplasm；macrophage；pathological grading; clinical stage

時間：2017-9-18 6:23 網絡出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170918.0623.006.html

R 737.25

A

1001-7399(2017)09-0969-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.09.006

接受日期：2017-07-24

江蘇省自然科學基金(BK20160705)

1東南大學附屬中大醫院病理科、3泌尿外科，南京 210009

2安徽醫科大學附屬安徽省立醫院泌尿外科，合肥 230001

王國慶，男，醫師。Tel:(025)83272037，E-mail: wanggq130@sina.com

張麗華，女，博士，主任醫師，通訊作者。E-mail：15905179393@126.com

網絡出版時間：2017-9-18 6:23 網絡出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170918.0623.007.html