肢帶型肌營養不良癥2D型一家系臨床表型及基因突變分析

歐俐羽 孫毅明 利婧 王倞 李歡 曾纓 梁穎茵 張成

·神經系統遺傳性疾病·

肢帶型肌營養不良癥2D型一家系臨床表型及基因突變分析

歐俐羽 孫毅明 利婧 王倞 李歡 曾纓 梁穎茵 張成

目的總結肢帶型肌營養不良癥2D型（LGMD2D型）臨床表型和基因突變特點。方法報道一家系2例女性LGMD2D型患兒臨床表現、肌電圖、肌肉MRI、肌肉病理學和基因檢測結果，并結合相關文獻進行分析。結果先證者及其妹均于3歲發病，以進行性四肢近端無力為主要臨床表現；血清肌酸激酶水平顯著升高；肌電圖呈肌源性損害；肌肉MRI顯示部分肌肉萎縮、脂肪化或纖維水腫；其妹肌肉病理學顯示局灶性骨骼肌壞死、再生，部分橫紋肌消失，肌纖維大小不等。基因檢測顯示，先證者及其妹存在相同基因突變，即SGCA基因第3外顯子移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）和第5外顯子錯義突變c.409G＞A（p.Glu137Lys），其母為SGCA基因c.409G＞A（p.Glu137Lys）突變攜帶者，其中，c.409G＞A（p.Glu137Lys）為已知突變，c.262delT（p.Phe88SerfxX123）為新發突變。結論對于臨床類似Duchenne型肌營養不良癥的女性患者，排除DMD基因攜帶者后，還應行家系分析和肢帶型肌營養不良癥相關基因檢測，以明確具體亞型。

肌營養不良，肢帶型； 表型； 基因； 突變； 系譜

肢帶型肌營養不良癥2D型（LGMD2D型）是臨床罕見的常染色體隱性遺傳性肌營養不良癥的一種亞型，通常于兒童期發病，臨床表現為四肢近端無力、上樓梯和蹲起困難，血清肌酸激酶（CK）水平升高，肌電圖呈肌源性損害，不易與Duchenne型肌營養不良癥（DMD）區分，故亦稱為類Duchenne型肌營養不良癥肌病。目前，我國僅有1篇臨床病理報告描述2例男性LGMD2D型患者［1］，以及1篇文獻報道臺灣地區一家系共4例男性和1例女性LGMD2D型患者［2］。本研究報道一臨床資料齊全家系共2例女性LGMD2D型患兒的家族史、臨床表現、影像學、肌電圖、肌肉病理學和基因突變特點，以期提高臨床醫師對LGMD2D型臨床表型和基因突變的認識。

臨床資料

一、臨床特征

例1（先證者） 女性，8歲，主因四肢近端無力進行性加重5年，于2016年8月15日至我院神經科門診就診。患兒5年前無明顯誘因出現四肢近端無力，跑步和上樓梯較同齡正常兒童緩慢，可平路行走，上肢可抬舉，進行性加重，無感覺異常。外院肌電圖檢查顯示，神經傳導速度正常，呈肌源性損害。為求進一步診斷與治療，遂至我院就診。患兒足月剖宮產，出生時體重3.10 kg，無產傷和窒息史；智力發育正常，1歲時可獨立行走，會說話；2歲時運動功能與同齡正常兒童無明顯差異；3歲時跑步和上樓梯較同齡正常兒童緩慢；幼兒園（4～6歲）時跑步較同齡正常兒童緩慢，易疲勞、跌倒；7歲上小學，體育課上運動功能較同學落后，但無肌肉疼痛；8歲時行走緩慢，上樓梯和蹲起困難，需坐高凳子，可自行梳頭，學習成績中等。父母身體健康，無相似癥狀，否認近親婚配。門診體格檢查：高級智能正常，腦神經檢查未見異常；雙上肢近端肌力4+級、遠端5-級，雙下肢近端肌力4級、遠端5-級，肌張力均降低；雙側腓腸肌無肥大，但有韌性，無肌肉壓痛，輕微腰椎前凸，無翼狀肩胛、跟腱攣縮，可足尖行走，足跟行走欠佳，Gowers征陽性，可連跳3次，但跳不高；雙上肢腱反射正常，雙下肢膝反射和踝反射減弱，病理反射未引出。實驗室檢查：2016年8月15日血清肌酸激酶為 58 378 U/L（25～200 U/L），2017年3月13日血清肌酸激酶10 058 U/L、肌酸激酶同工酶（CK?MB）為150 U/L（2～24 U/L）、乳酸脫氫酶（LDH）518 U/L（114～240 U/L），α?羥丁酸脫氫酶（α?HBDH）275 U/L（80～220 U/L）、B型利尿鈉肽（BNP）24.70 ng/L（0～84 ng/L）。心臟彩超顯示心臟形態和結構無明顯異常，心臟彩色多普勒超聲（CDVS）無明顯異常，左心室收縮和舒張功能正常。雙側大腿MRI檢查（2017年3月20日）顯示，大腿肌肉萎縮和脂肪化，以臀大肌、股二頭肌、股四頭肌和內收肌群為主，而縫匠肌、股薄肌、半腱肌相對保留（圖1）。

例2（先證者之妹） 女性，3歲，因血清肌酸激酶升高1月余、四肢近端無力20 d余，于2013年8月26日首次至我院神經科門診就診。患兒于2013年7月曾因“咳嗽”住院，實驗室檢查血清肌酸激酶水平升高（2013年7月9日為8905 U/L和2013年7月11日為41 527 U/L），肌電圖檢查顯示，雙側股四頭肌肌源性損害。8月初家人發現其上樓梯困難，跑步較同齡正常兒童緩慢，可平路行走，上肢可抬舉，無進行性加重，未見感覺異常。患兒足月順產，出生時體重2.90 kg，無產傷和窒息史；智力發育正常，1歲時可獨立行走；14個月時會說話；3歲時家人發現其上樓梯困難，跑步較同齡正常兒童緩慢。門診體格檢查：高級神經活動正常，腦神經檢查未見異常；無明顯肌萎縮，四肢近端肌力5-級、遠端5級，肌張力均正常；雙側腓腸肌肥大，無肌肉壓痛，平路行走正常，可足跟、足尖行走，可連跳；雙上肢腱反射正常，雙下肢膝反射減退、踝反射正常，病理反射未引出。實驗室檢查：2013年8月27日血清肌酸激酶12 215 U/L、肌酸激酶同工酶312 U/L、乳酸脫氫酶969 U/L、α?羥丁酸脫氫酶826 U/L，2016年8月15日血清肌酸激酶59 714 U/L、肌酸激酶同工酶371 U/L、乳酸脫氫酶1388 U/L。胸部X線和心電圖未見明顯異常。雙下肢MRI檢查（2015年9月22日）顯示，廣泛性脂肪浸潤和纖維水腫，以臀大肌、比目魚肌、腓腸肌為主（圖2，3）。左側腓腸肌肌肉組織活檢可見局灶性骨骼肌壞死、再生，部分橫紋肌消失，肌纖維大小不等。

圖1 雙側大腿MRI檢查顯示肌肉萎縮和脂肪化，以臀大肌（白箭頭所示）、股四頭肌（股外側肌，黑箭頭所示）和內收肌群（大收肌，紅箭頭所示）為主，縫匠肌、股薄肌和半腱肌形態和信號相對正常 1a 橫斷面T1WI 1b 橫斷面T2WI 1c 橫斷面抑脂T2WIFigure 1 Muscle MRI of the proband's thighs.Muscle of both thighs showed muscular atrophy and adipose infiltration mainly found in gluteus maximus (white arrows indicate),quadriceps(vastus lateralis,black arrows indicate)and adductors(adductor magnus,red arrows indicate).The shape and signal of sartorius,gracilis and semitendinosus were relatively normal. Axial T1WI(Panel 1a). Axial T2WI(Panel 1b). Axial fat saturation T2WI(Panel 1c).

二、基因檢測

采用二代基因測序（NGS）技術對先證者（例1）外周靜脈血樣本進行肌肉病相關基因外顯子捕獲測序，結果顯示，SGCA基因第3外顯子存在移碼突變 c.262delT（p.Phe88SerfsX123）和第 5外顯子存在錯義突變c.409G ＞A（p.Glu137Lys，圖 4a）。進一步對先證者之母和妹c.262delT（p.Phe88SerfsX123）位點進行Sanger測序驗證，結果顯示，其母未攜帶該突變基因，其妹攜帶該突變基因（圖4b）；對c.409G＞A（p.Glu137Lys）位點進行驗證，結果顯示，其母（圖4c）和妹（圖4b）均攜帶該突變基因。盡管先證者之父因故未行基因檢測，但根據先證者及其母和妹的基因檢測結果，推測移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）來自其父。采用Mutation Taster軟件（http://www.mutationtaster.org/）預測上述兩位點均為致病性突變，其中c.409G＞A（p.Glu137Lys）是已報道的致病性突變，而c.262delT（p.Phe88SerfsX123）是移碼突變，尚未見諸報道，為新發突變。經基因檢測，先證者及其妹最終明確診斷為LGMD2D型。

三、家系分析

結合基因檢測結果，得出該家系圖，證實該家系為LGMD2D型常染色體隱性遺傳性家系（圖5）。

討 論

肢帶型肌營養不良癥（LGMD）是以肩胛帶肌、骨盆帶肌、四肢近端肌肉不同程度進行性萎縮和無力為主要特點的一組肌肉病，根據遺傳方式可以分為常染色體顯性遺傳性肢帶型肌營養不良癥（LGMD1型）和常染色體隱性肢帶型肌營養不良癥（LGMD2型）；根據不同基因缺陷將LGMD1型和LGMD2型進一步分為多種亞型，目前已報道30余種亞型（http://www.musclegenetable.fr/），且具有高度遺傳異質性。其中，LGMD2C、2D、2E和2F型分別與第 13、17、4和 5號染色體γ、α、β、δ?肌聚糖（sarcoglycan）編碼基因突變有關，統稱為肌聚糖病。γ、α、β、δ?肌聚糖組成一個跨膜的異四聚體，且與Sarcospan、抗肌萎縮蛋白（dystrophin）、肌營養不良蛋白聚糖（dystroglycan）、互生蛋白（syntrophin）和α?異聯蛋白（α?dystrobrevin）形成抗肌萎縮蛋白?糖蛋白復合物（DGC）［3］，該復合物在細胞外基底層、肌膜和細胞內骨架蛋白之間形成機械連接，在肌肉收縮和舒張過程中發揮穩定細胞膜的作用［4］。

圖2 雙側大腿MRI檢查顯示脂肪化和纖維水腫，以臀大肌為主（箭頭所示） 2a 橫斷面T1WI 2b 橫斷面T2WI 2c 橫斷面抑脂T2WIFigure 2 Muscle MRI of thighs of the proband's younger sister. Fatnessand fiberedema were mainly found in gluteus maximus(arrows indicate).Axial T1WI(Panel 2a).Axial T2WI(Panel 2b).Axial fat saturation T2WI(Panel 2c).

圖3 雙側小腿MRI檢查顯示脂肪化和纖維水腫，以比目魚肌（白箭頭所示）和腓腸肌（黑箭頭所示）為主 3a 橫斷面T1WI 3b橫斷面T2WI 3c 橫斷面抑脂T2WIFigure 3 Muscle MRI of calves of the proband's younger sister.Fatness and fiber edema were mainly found in soleus(white arrows indicate)and gastrocnemius(black arrows indicate). Axial T1WI(Panel 3a). Axial T2WI(Panel 3b). Axial fat saturation T2WI(Panel 3c).

LGMD2D型是肌聚糖病的最常見類型，由Roberds等［5］于 1994 年確定編碼α?肌聚糖的 SGCA基因定位于17q12～q21.33，其錯義突變導致α?肌聚糖缺陷引起的LGMD2D型。同年，McNally等［6］也將SGCA基因定位于17q21。SGCA基因包含10個外顯子和2個啟動子，α?肌聚糖cDNA由1410個核苷酸組成，其中開放閱讀框包含1161個核苷酸，編碼387 個氨基酸［7］。α?肌聚糖相對分子質量50×103，主要表達于骨骼肌，少量表達于心肌［8］。由于肌聚糖α、β、γ和δ 4個亞單位緊密連接，1個亞單位缺陷可以導致其他亞單位缺失，任意一種SGCA基因突變均可以引起部分或全部肌聚糖缺陷，甚至累及抗肌萎縮蛋白缺陷［9］。因此，免疫組織化學染色難以區分上述幾種類型，明確診斷需借助基因診斷。

圖4 SGCA基因檢測所見 4a 先證者存在SGCA基因復合雜合突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123，箭頭所示，左圖）和c.409G＞A（p.Glu137Lys，箭頭所示，右圖） 4b 先證者之妹與先證者相同，存在SGCA基因復合雜合突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123，箭頭所示，左圖）和c.409G＞A（p.Glu137Lys，箭頭所示，右圖） 4c 先證者之母僅存在SGCA基因雜合突變c.409G＞A（p.Glu137Lys，箭頭所示）Figure 4 SGCA gene sequencing finding Compound heterozygous mutation c.262delT(p.Phe88SerfsX123,arrow indicates,left panel)and c.409G＞A(p.Glu137Lys,arrow indicates,right panel)were seen in the proband(Panel 4a). The same SGCA gene sequencing results of the proband was seen in proband's younger sister(arrows indicate,Panel 4b).SGCA gene heterozygous mutation c.409G＞A(p.Glu137Lys,arrow indicates)was seen in proband's mother(Panel 4c).

LGMD2D型與多種無義突變和錯義突變有關，主要是SGCA基因第3外顯子c.229C＞T（p.Arg77Cys）突變，導致精氨酸突變為半胱氨酸［10?12］。本研究2例患兒均存在SGCA基因第3外顯子移碼突變 c.262delT（p.Phe88SerfsX123）和第 5外顯子錯義突變c.409G＞A（p.Glu137Lys），其中c.409G＞A（p.Glu137Lys）是已報道的致病性突變［10］，而 c.262delT（p.Phe88SerfsX123）尚未見諸報道，從致病性突變分析原則看，可以認為系致病性突變。盡管先證者之父未行基因檢測，但根據先證者及其母和妹的基因檢測結果，可以推測移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）源自其父，這并不影響遺傳信息學分析。

本研究家系患兒的可能發病機制為：SGCA基因第 3外顯子存在 c.262delT（p.Phe88SerfsX123）堿基缺失，導致該基因編碼的第88位密碼子從苯丙氨酸突變為絲氨酸，并出現移碼突變，提前出現終止密碼子（第123位密碼子），從而造成蛋白功能缺失；同時，SGCA基因第5外顯子存在c.409G＞A（p.Glu137Lys）堿基改變，導致該基因編碼的第137位密碼子由谷氨酸突變為賴氨酸，故可以確定2個突變位點位于2條染色體上，并經Mutation Taster軟件預測均為致病性突變。2例患兒均存在SGCA基因移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）和錯義突變c.409G ＞ A（p.Glu137Lys），其 母 c.409G ＞ A（p.Glu137Lys）為雜合突變，推測移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）可能源自其父，但患兒父母均無相似癥狀，推測其父親可能為c.262delT（p.Phe88SerfsX123）雜合缺失，因此，該家系遺傳方式呈常染色體隱性遺傳。目前，關于SGCA基因移碼突變c.262delT（p.Phe88SerfsX123）尚無相關報道，為新發突變，根據基因突變致病性判定標準［13］，屬致病性突變。已有文獻報道，SGCA基因錯義突變c.409G ＞ A（p.Glu137Lys）具有致病性［10］；此外，該密碼子其他突變如c.410G＞A（p.Glu137Gly）亦具有致病性［14］。

LGMD2D型主要臨床特征為兒童期緩慢發病、四肢近端對稱性肌萎縮和肌無力逐漸加重、呈“鴨步”步態，Gowers征陽性，不伴肌肉疼痛、肌強直，心肌受累少見［8，15］，可累及呼吸肌，嚴重時可出現呼吸衰竭［8，16］；血清肌酸激酶水平明顯升高；肌電圖和肌肉組織活檢提示肌源性損害。本研究2例患兒均于3歲時出現上樓梯、蹲起、立位、跑步等運動功能較同齡正常兒童差，血清肌酸激酶水平高于正常參考值約50倍，肌電圖和肌肉組織活檢證實為肌源性損害，肌肉MRI顯示廣泛性脂肪化，基因檢測為復合雜合突變，且在家系中出現共分離現象，復習相關文獻，1種為已報道的致病性突變、1種為移碼突變，故明確診斷為LGMD2D型。

圖5 LGMD2D型家系圖Figure 5 The pedigree of LGMD2D.

LGMD2D型具有高度臨床異質性，同一蛋白功能缺失，臨床癥狀和病情嚴重程度不盡一致，甚至無明顯臨床癥狀。本研究2例患兒為同一種基因突變，先證者臨床癥狀較其妹嚴重。1998年，Angelini等［17］報道2例LGMD2D型患者（一家系姊弟）均為同一種純合突變，但臨床表現截然不同：先證者為女性，40歲，于10～12歲發病，表現為輕度胸椎側彎，28歲時出現下肢近端無力，30歲時出現上肢近端無力，Gowers征陽性，血清肌酸激酶1016 IU/L，超聲心動圖正常，肌電圖提示肌源性損害，肌肉CT提示肌營養不良；其弟35歲，僅血清肌酸激酶水平升高（1037 IU/L），輕微脊柱側彎，余未見異常。本研究2例患兒基因型相同，盡管先證者之妹較先證者癥狀輕微，但由于二者年齡相差較小（相差2歲），仍需進一步隨訪。

本研究先證者及其妹血清肌酸激酶水平明顯升高，最高均超過50×103U/L，提示疾病處于活動期。研究顯示，Duchenne型肌營養不良癥和Becker型肌營養不良癥（BMD）患者血清肌酸激酶水平較肢帶型肌營養不良癥患者高［18］，前兩者血清肌酸激酶可達正常參考值的25～200倍，后者為1～80倍，其中尤以LGMD2D型患者顯著［19］。本研究2例患兒血清肌酸激酶水平升高，出現類似Duchenne型肌營養不良癥表現，而先證者及其妹均無心臟受累，與心臟受累少見的報道相符［8，15］。先證者及其妹肌肉MRI均提示雙下肢肌肉對稱性受累，與臨床表現相符。LGMD2D型肌肉MRI多表現為大腿前肌群較大腿后肌群更易受累［20］。先證者肌肉MRI顯示大腿肌肉前后內側肌群均受累，受累范圍較廣，而縫匠肌、股薄肌和半腱肌相對保留；其妹肌肉MRI顯示以雙下肢后肌群受累為主。隨著肌肉MRI的普及，對可疑肌肉病的患者先行肌肉MRI檢查，可以發現肌肉脂肪化和炎性水腫，結合肌肉受累順序和病變程度，有助于判斷肢帶型肌營養不良癥性質，并為肌肉組織活檢部位的選擇提供有效信息。

LGMD2D型臨床表現類似Duchenne型肌營養不良癥：先證者發病年齡較早，于3歲發病，四肢近端進行性肌無力，Gowers征陽性，血清肌酸激酶水平顯著升高，高度懷疑女性Duchenne型肌營養不良癥；其妹發病年齡也較早，于3歲發病，雙側小腿肥大，血清肌酸激酶水平顯著升高，臨床癥狀輕微，考慮DMD基因攜帶者。但二者本質上為LGMD2D型，與Duchenne型肌營養不良癥的鑒別診斷要點為：性別不同；Duchenne型肌營養不良癥為X連鎖隱性遺傳，多為男性；先證者無小腿肥大。因此，對于類似Duchenne型肌營養不良癥的女性患者，除外DMD基因攜帶者，還應行家系分析和肢帶型肌營養不良癥相關基因檢測，以明確具體分型。

由于肢帶型肌營養不良癥具有高度遺傳異質性，故在臨床上難以區分具體亞型，明確診斷主要依靠基因檢測。然而某些臨床特征可以縮小鑒別診斷范圍，有助于基因檢測包的選擇。例如，女性肢帶型肌營養不良癥應注意與女性Duchenne型肌營養不良癥相鑒別，二者均表現為兒童期近端肌萎縮和肌無力、血清肌酸激酶水平明顯升高，但前者呈常染色體隱性或顯性遺傳，癥狀較后者嚴重，肌肉組織活檢抗肌萎縮蛋白陰性；后者呈X連鎖隱性遺傳，肌肉組織活檢抗肌萎縮蛋白部分陽性。此外，肢帶型肌營養不良癥還應注意與炎性肌病、代謝性肌病相鑒別：均表現有近端肌無力，血清肌酸激酶水平升高，肢帶型肌營養不良癥起病隱匿、進展緩慢，不伴肌肉疼痛；炎性肌病無家族史，起病急驟，進展迅速，可伴肌肉疼痛，肌電圖多呈活動性肌源性損害，可見較多正尖纖顫波，糖皮質激素治療有效，可資鑒別；代謝性肌病方面主要是脂質沉積性肌病，病程呈波動性，肌肉組織活檢可見肌纖維內堆積大量脂肪滴，而肢帶型肌營養不良癥病程無波動，肌肉組織活檢提示肌纖維破壞，無脂肪滴堆積，可資鑒別。

［1］Song XQ,Yao MM,Wu HR,Liu LL,Wang X,Li W,Chen XX.Clinicaland pathologicalfeatures ofα ?Sarcoglycanopathy(report of 2 cases).Lin Chuang Shen Jing Bing Xue Za Zhi,2015,28:131?133［.宋學琴,要萌萌,吳紅然,劉璘琳,王雪,李薇,陳秀曉.α?Sarcoglycanopathy的臨床和病理學特征：附2例報告.臨床神經病學雜志,2015,28:131?133.］

［2］Liang WC,Chou PC,Hung CC,Su YN,Kan TM,Chen WZ,Hayashi YK,Nishino I,Jong YJ.Probable high prevalence of limb?girdle muscular dystrophy type 2D in Taiwan.J Neurol Sci,2016,362:304?308.

［3］Rando TA.The dystrophin?glycoprotein complex,cellular signaling,and the regulation of cell survival in the muscular dystrophies.Muscle Nerve,2001,24:1575?1594.

［4］Ervasti JM,Campbell KP.A role for the dystrophin?glycoprotein complex as a transmembrane linker between laminin and actin.J Cell Biol,1993,122:809?823.

［5］Roberds SL,Leturcq F,Allamand V,Piccolo F,Jeanpierre M,AndersonRD,Lim LE,LeeJC,ToméFM,RomeroNB,Fardeau M,Beckmann JS,Kaplan JC,Campbell KP.Missense mutations in the adhalin gene linked to autosomal recessive muscular dystrophy.Cell,1994,78:625?633.

［6］McNally EM,Yoshida M,Mizuno Y,Ozawa E,Kunkel LM.Human adhalin is alternatively spliced and the gene is located on chromosome 17q21.Proc Natl Acad Sci USA,1994,91:9690?9694.

［7］Ozawa E,Mizuno Y,Hagiwara Y,Sasaoka T,Yoshida M.Molecular and cell biology of the sarcoglycan complex.Muscle Nerve,2005,32:563?576.

［8］Politano L,Nigro V,Passamano L,Petretta V,ComiLI,Papparella S,Nigro G,Rambaldi PF,Raia P,Pini A,Mora M,Giugliano MA,Esposito MG,Nigro G.Evaluation of cardiac and respiratory involvement in sarcoglycanopathies.Neuromuscul Disord,2001,11:178?185.

［9］VainzofM,Passos?BuenoMR,CanovasM,MoreiraES,Pavanello RC,Marie SK,Anderson LV,Bonnemann CG,McNally EM,Nigro V,Kunkel LM,Zatz M.The sarcoglycan complex in the six autosomal recessive limb?girdle muscular dystrophies.Hum Mol Genet,1996,5:1963?1969.

［10］Carrié A,Piccolo F,Leturcq F,de Toma C,Azibi K,Beldjord C,Vallat JM,Merlini L,Voit T,Sewry C,Urtizberea JA,Romero N,Tomé FM,Fardeau M,Sunada Y,Campbell KP,Kaplan JC,Jeanpierre M.Mutational diversity and hot spots in the alpha?sarcoglycan gene in autosomal recessive muscular dystrophy(LGMD2D).J Med Genet,1997,34:470?475.

［11］Hackman P,Juvonen V,Sarparanta J,Penttinen M,A?rimaa T,Uusitalo M,Auranen M,Pihko H,Alén R,Junes M,L?nnqvist T,Kalimo H,Udd B.Enrichmentofthe R77C alpha?sarcoglycan gene mutation in Finnish LGMD2D patients.Muscle Nerve,2005,31:199?204.

［12］Trabelsi M,Kavian N,Daoud F,Commere V,Deburgrave N,Beugnet C,Llense S,Barbot JC,Vasson A,Kaplan JC,Leturcq F, Chelly J. Revised spectrum of mutations in sarcoglycanopathies.Eur J Hum Genet,2008,16:793?803.

［13］Richards S,Aziz N,Bale S,Bick D,Das S,Gastier?Foster J,Grody WW,Hegde M,Lyon E,Spector E,Voelkerding K,Rehm HL;ACMG Laboratory Quality Assurance Committee.Standards and guidelines for the interpretation of sequence variants:a joint consensus recommendation of the American College of Medical Genetics and Genomics and the Association for Molecular Pathology.Genet Med,2015,17:405?424.

［14］Kawai H,Akaike M,Endo T,Adachi K,Inui T,Mitsui T,Kashiwagi S,Fujiwara T,Okuno S,Shin S.Adhalin gene mutations in patients with autosomal recessive childhood onset musculardystrophy with adhalin deficiency.JClin Invest,1995,96:1202?1207.

［15］Fayssoil A,Nardi O,Annane D,Orlikowski D.Left ventricular function in alpha?sarcoglycanopathy and gamma?sarcoglycanopathy.Acta Neurol Belg,2014,114:257?259.

［16］WalterMC,DekomienG,Schlotter?WeigelB,ReilichP,Pongratz D,Müller?FelberW,Epplen JT,HuebnerA,Lochmüller H. Respiratory insufficiency as a presenting symptom of LGMD2D in adulthood.Acta Myol,2004,23:1?5.

［17］Angelini C,Fanin M,Menegazzo E,Freda MP,Duggan DJ,Hoffman EP.Homozygous alpha?sarcoglycan mutation in two siblings:one asymptomatic and one steroid?responsive mild limb?girdle muscular dystrophy patient.Muscle Nerve,1998,21:769?775.

［18］Zhang Y,Huang JJ,Wang ZQ,Wang N,Wu ZY.Value of muscle enzyme measurement in evaluating different neuromuscular diseases.Clin Chim Acta,2012,413(3/4):520?524.

［19］Passos?Bueno MR,Vainzof M,Moreira ES,Zatz M.Seven autosomal recessive limb?girdle muscular dystrophies in the Brazilian population:from LGMD2A to LGMD2G.Am J Med Genet,1999,82:392?398.

［20］Wattjes MP,Kley RA,Fischer D.Neuromuscular imaging in inherited muscle diseases.Eur Radiol,2010,20:2447?2460.

Limb?girdle muscular dystrophy type 2D:clinical and genetic analysis of a family

OU Li?yu1,SUN Yi?ming2,LI Jing1,WANG Liang1,LI Huan1,ZENG Ying1,LIANG Ying?yin1,ZHANG Cheng11Department of Neurology,2Department of Health Care Clinic,the First Affiliated Hospital,Sun Yat?sen University,Guangzhou 510080,Guangdong,China
OU Li?yu and SUN Yi?ming contributed equally to this study
Corresponding author:ZHANG Cheng(Email:zhangch6@mail.sysu.edu.cn)

Objective To study the characteristics and diagnosis of limb?girdle muscular dystrophy type 2D(LGMD2D).Methods The clinical characteristics,EMG,muscle MRI and muscle pathological studies of 2 female patients in a family with LGMD2D were analyzed.Genetic analysis was used in the diagnosis of this disease.The cases were reported along with related literatures review.Results The onset of the proband and her younger sister occurred at 3 years old with progressive proximal muscle weakness of four limbs as the main clinical manifestation.The serum creatine kinase(CK)was significantly high(＞ 50 × 103U/L).EMG showed myogenic damage.Muscle MRI indicated partial muscle atrophy,fatness or fiber edema.Muscle pathological examination of the proband's younger sister revealed skeletal muscle necrosis and focal regeneration,partial striated muscle disappearance,and the muscle fibers in different sizes.Sequencing of all 10 coding exons of the SGCA gene in 2 patients revealed the same mutation:a c.262delT(p.Phe88SerfsX123)frameshift mutation in exon 3 and a c.409G＞A(p.Glu137Lys)missense mutation in exon 5.Their mother was a carrier of SGCA gene c.409G＞A(p.Glu137Lys)mutation.c.409G＞A (p.Glu137Lys)is a mutation already found,and c.262delT(p.Phe88SerfsX123)is a novel mutation.The proband's father did not take the genetic test for some reason.Conclusions In case of a female with Duchenne muscular dystrophy(DMD)?like symptom,if she has been excluded from the DMD gene carrier,pedigree analysis and genetic analysis involving limb?girdle muscular dystrophy(LGMD)should be conducted to facilitate the diagnosis of the LGMD and its subtypes.

Muscular dystrophies,limb?girdle; Phenotype; Genes; Mutation; Pedigree

10.3969/j.issn.1672?6731.2017.08.010

歐俐羽、孫毅明并列為本文第一作者

國家自然科學基金資助項目（項目編號：81471280）；廣東省廣州市2015年產學研專項項目（項目編號：1561000153）；國家自然科學基金青年科學基金資助項目（項目編號：81601087）；廣東省科學技術廳2014年度公益研究與能力建設專項資金資助項目（項目編號：2014A020212130）；國家自然科學基金資助項目（項目編號：81271401）；國家自然科學基金-廣東省聯合基金重點資助項目（項目編號：U1032004）

510080廣州，中山大學附屬第一醫院神經科［歐俐羽（現在廣西中醫藥大學附屬瑞康醫院神經內科，郵政編碼：530011）、利婧、王倞、李歡、曾纓、梁穎茵、張成］，保健科（孫毅明）

張成（Email：zhangch6@mail.sysu.edu.cn）

This study was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81471280,81271401),2015 Production,Study and Research Special Project of Guangzhou,Guangdong Province,China(No.1561000153),the National Natural Science Foundation of China for Young Scientists(No.81601087),Non?Profit Study and Capability Building Special Fund Support Project of Guangdong Provincial Department of Science and Technology,China in the Year 2014(No.2014A020212130),and Joint Fund of National Natural Science Foundation of China and Natural Science Foundation of Guangdong Province,China(No.U1032004).

2017?06?29）