非濃縮尿蛋白電泳在原發性高血壓腎損傷中的診斷價值

王 加，張炳峰，婁鑒芳

(南京醫科大學第一附屬醫院 醫學檢驗學部，南京210029)

非濃縮尿蛋白電泳在原發性高血壓腎損傷中的診斷價值

王 加，張炳峰，婁鑒芳*

(南京醫科大學第一附屬醫院 醫學檢驗學部，南京210029)

原發性高血壓是常見的心血管疾病，腎臟為最常受累的靶器官之一，高血壓累及腎臟的最初癥狀為輕度的蛋白尿[1]。臨床上腎臟損傷的金標準是活檢組織病理分型，但具有一定的創傷性，經過長期臨床研究證實，檢測尿中分子量不同的蛋白質成分及水平，能夠間接地反映腎臟損傷的部位和程度。十二烷基磺酸鈉-瓊脂糖凝膠(Sodium dodecyl sulphat-agarose gel electrophoresis,SDS-AGE)非濃縮尿蛋白電泳，敏感性高并能判斷尿蛋白的類型，已廣泛應用于臨床上對腎病的診斷[2,3]。尿微量白蛋白(uALB)是早期腎損傷的敏感指標[4-6]，也是高血壓患者亞臨床心血管病變的早期標志，本研究通過對原發性高血壓患者行SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳分析，并與uALB進行比較，評價其對原發性高血壓腎損傷的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2016年3月-2016年8月在南京醫科大學第一附屬醫院就診的原發性高血壓患者57例，排除糖尿病及自身免疫病等累及腎臟的疾病，參照《中國高血壓防治指南》(2005修訂版)，根據原發性高血壓腎損害的診斷標準，結合病史、靶器官受損情況及尿蛋白定性結果分為兩組：(1) 腎臟損傷組，28例，其中男性14例，女性14例，年齡41-85歲，中位年齡62(41-85)歲。(2) 無腎臟損傷組，29例，其中男性15例，女性14例，年齡36-80歲，中位年齡59(36-80)歲。

1.2主要試劑SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳檢測為法國Sebia Hydrasys自動電泳分析儀原裝配套試劑。uALB檢測為美國西門子DCA-Vantage分析儀原裝配套試劑。

1.3方法

1.3.1標本處理 收集新鮮晨尿10 ml。

1.3.2尿蛋白電泳的檢測 在20μl SDS稀釋液中加入80 μl尿液，充分混勻后吸取5 μl于凝膠片的加樣槽中，裝上緩沖條，電泳、烘片、染色、脫色和固定后，掃描并報告結果。

1.3.3uALB的檢測 測定原理為免疫比濁法，使用DCA-Vantage分析儀，嚴格按照儀器和試劑盒說明書進行操作。儀器檢測最高限為300 mg/L，超過線性范圍的標本需稀釋。

2 結果

2.1對腎臟損傷組和無腎臟損傷組進行SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳檢測后，分為5組，未檢出、單純性、腎小管性、腎小球性和混合性蛋白尿。腎臟損傷組患者尿蛋白電泳結果均為陽性，以混合性蛋白尿為主；無腎臟損傷組患者部分檢出少量單一的白蛋白帶，為單純性蛋白尿，有2例為可見低分子量蛋白的腎小管蛋白尿。兩組高血壓患者尿蛋白電泳檢測結果見表1。

表1 兩組高血壓患者尿蛋白電泳檢測結果(%)

2.2SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳與uALB的關系單純性、腎小球性、腎小管性和混合性這四種類型蛋白尿患者uALB定量水平總體不同。經兩兩比較，單純性蛋白尿uALB水平最低(20.6±5.3)mg/L，明顯低于其余三種類型，差異有統計學意義(Plt;0.05)；腎小管性蛋白尿uALB水平(218±81.9)mg/L，與其余三種類型相比，差異也有統計學意義(Plt;0.05)，腎小球性蛋白尿和混合型蛋白尿的uALB水平相比，無差異(Pgt;0.05)，見表2。

表2 四種類型蛋白尿患者uALB水平

注：與腎小球性、腎小管性和混合性蛋白尿比較，*Plt;0.05 與腎小球性、單純性和混合性蛋白尿比較，ΔPlt;0.05。

3 討論

近年來，我國因高血壓腎臟損害而進入慢性腎功能不全的患者逐年增多[7]。原發性高血壓腎臟損傷是一個長期的進行性過程，生理條件下，尿液內蛋白含量甚微，血壓高導致腎有效濾過壓增高，血流量增加致使腎小球高濾過性損害，腎小球濾過膜通透性增加，漏出蛋白增多，同時腎小管重吸收功能受損，對漏出蛋白重吸收減低，即產生蛋白尿。因此蛋白尿是原發性高血壓出現腎臟損傷的重要表現之一，而早期發現腎損害并進行合理治療，可有效延緩腎病進展。

SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳，能夠根據蛋白質相對分子質量的不同，區分出單一的白蛋白帶、中高分子量蛋白區帶、低分子量蛋白區帶和大中小分子量混合性蛋白區帶。單一的白蛋白帶為單純性蛋白尿，多為生理性蛋白尿或者腎小球輕微病變；中高分子量蛋白區帶反映了腎小球的病變，主要為白蛋白、轉鐵蛋白和IgG等；低分子量蛋白區帶見于腎小管病變，標志性蛋白有α1-微球蛋白、β2-微球蛋白和視黃醇結合蛋白等；混合性蛋白尿則提示腎小球和腎小管均有損傷。腎臟損傷組患者混合性蛋白尿占57.2%，說明高血壓患者有明確腎臟靶器官受損時，大部分小球和小管均已受累。無腎臟損傷組患者經SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳，部分檢出少量單一的白蛋白帶，為單純性蛋白尿，此外還見到2例腎小管蛋白尿，低分子量的蛋白在尿常規定性檢測中往往是陰性或者是弱陽性，這種損害具有極大的隱蔽性[8]。SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳可較直觀地反映腎損傷的部位，正確判斷蛋白尿性質，來源和了解腎臟的損傷程度。

本研究將SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳與uALB定量比較分析，單純性蛋白尿的uALB水平明顯最低，腎小球和混合性蛋白尿的uALB水平較高。uALB是帶負電荷的中分子量蛋白，當腎小球濾過屏障受損時，尿中uALB超出腎小管吸收能力或者腎小管功能下降時，uALB含量升高。腎小管性蛋白尿是以低分子量蛋白為主，檢測到的uALB水平要低于腎小球和混合性蛋白尿，而有研究表明，腎小管性蛋白尿與混合性蛋白尿腎損傷程度都較高[9,10]，由此可見，尿蛋白的組成成分比尿蛋白量的多少更能反應腎臟病變的廣泛性及疾病本身的嚴重程度，腎功能損害程度與蛋白質分子量更具有相關性。uALB能提示原發性高血壓引起的腎臟早期損害，尿蛋白電泳則更能準確判斷腎臟損害程度。

SDS-AGE非濃縮尿蛋白電泳方法簡單，快速，能區別尿蛋白類型，反映尿蛋白組成，對及時診斷高血壓腎病有重要臨床參考價值，為臨床采取干預措施，及時治療，延緩病情發展提供了時機。

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1007-4287(2017)11-1980-02

江蘇省實驗診斷學重點實驗室基金 ( XK 201114)

*通訊作者

王加(1982-)，女，主管技師，碩士研究生，研究方向：臨床生化診斷。

2016-12-20)