川楝素和吡蟲啉對瓜蚜聯合作用的研究

張波+郁春柳+楊得恩+賀秋磊

摘要：采用浸葉法測定川楝素與吡蟲啉對瓜蚜2齡若蟲的毒力，篩選復配的最佳配比，并測定復配劑的共毒系數。結果表明，在11個配比處理中，川楝素與吡蟲啉的質量比分別為3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5的毒效比分別達到1.81、1.90、1.90，明顯高于其他組，3組復配劑均具有明顯的增效活性；對上述3組復配劑進行室內毒力測定，求出各自的回歸方程和半數致死濃度（median lethal concentration，簡稱LC50），結合川楝素與吡蟲啉2種單劑的LC50，測得3種復配劑的共毒系數分別為219.46、331.77、220.37，均大于100，為增效復配。綜上所述，川楝素與吡蟲啉的質量比為4 ∶ 6時共毒系數可達331.77，增效作用最大，為最佳配比。

關鍵詞：川楝素；吡蟲啉；瓜蚜；聯合作用；毒力測定

中圖分類號： S433.39 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2017）20-0121-02

瓜蚜（Aphis gossypii Glover）別稱棉蚜，屬同翅目蚜科，廣泛分布于世界各地，是危害瓜類、豆類及棉花等多種農作物的主要害蟲之一，其中對棉花、瓜類的危害最為嚴重。該蟲以成蟲和若蟲在寄主植物葉背和嫩莖上取食汁液，植物被害后葉片卷縮，老葉受害變黃，提前枯落，同時瓜蚜為害時不但排出大量蜜露，引發植株煤污病，還會傳播花葉病毒病等多種病害[1]。當前，瓜蚜的主要防治措施仍是化學防治，由于瓜蚜發生量大、世代短，其抗藥性發展迅速。研究表明，瓜蚜對有機磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類等殺蟲藥劑均產生了抗藥性，已經成為抗藥性嚴重和難以治理的主要害蟲之一[2-5]。

川楝素是從楝屬植物川楝（Melia toosendan Sieb.et Zucc.）樹皮中提取的一種植物源殺蟲劑。川楝素在醫藥上具有驅蟲、抗癌、抗菌，影響神經肌肉、細胞、呼吸中樞等多種生物活性。在農業上，已有報道顯示川楝素對多種農業害蟲表現出一定的生物活性，特別是對菜粉蝶、小菜蛾等蔬菜上的主要害蟲均表現出明顯的防治效果[6-8]。吡蟲啉是新一代氯代尼古丁殺蟲劑，有觸殺、胃毒和內吸多重藥效，主要用于防治刺吸式口器害蟲，如蚜蟲、飛虱、粉虱、葉蟬、薊馬等，但對鱗翅目昆蟲的藥效不理想，在我國主要用于防治蚜蟲、飛虱等同翅目昆蟲，也是防治瓜蚜的主要化學藥劑[9-11]。

關于川楝素、吡蟲啉生物活性的研究和報道有很多，但尚無關于它們之間復配的增效作用及復配比例的報道，為解決川楝素和吡蟲啉單獨使用時殺蟲譜較窄、藥效較慢、易產生抗藥性的問題，提高二者對瓜蚜以及其他蔬菜害蟲防治效果，為蔬菜蟲害的田間防治探索出更加高效且環境友好的防治策略，本研究通過測定川楝素、吡蟲啉以及二者不同配比復配劑對瓜蚜的毒力，篩選出對瓜蚜具有增效活性的復配劑配方。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試昆蟲：將溫室中飼養在黃瓜上的瓜蚜成蟲，接種到展2～3張葉片的黃瓜幼苗上，在成蚜生產若蚜后，及時將成蚜清除，并把黃瓜的幼苗置于環境溫度為25 ℃的光照恒溫培養箱中，光—暗周期為14 h—10 h的條件下，等到若蚜發育至2齡時待用。

供試藥劑：1%川楝素母液，購自陜西昂盛生物醫藥科技有限公司；吡蟲啉95%原藥，由江蘇省農藥研究所提供。

1.2 川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力測定

吡蟲啉原藥用適量丙酮初步溶解后用蒸餾水配制成不同濃度待用，川楝素母液直接用水稀釋，2種藥劑的濃度均配制成160、80、40、20、10 mg/L，另外用清水作空白對照（CK），共11個處理。采用浸葉法[12-13]處理帶蟲葉片，選取瓜蚜數量在30～50頭的葉片放入配好的藥液，浸泡5 s后取出，陰涼處晾干，把蟲葉置于直徑為9 cm且墊有濕潤濾紙的培養皿中。然后將培養皿置于溫度為25 ℃、濕度為70%～80%、光—暗周期為14 h—10 h的養蟲室內。每個處理重復3次，每個重復3張葉片，分別在24、48 h時檢查死亡的瓜蚜數量，如果CK死亡率在10%以上，則須重新開展本次重復。蟲體死亡確認判斷標準為用細針輕輕刺觸受試蟲體，無明顯自主反應者判斷為死亡。參照張志祥等的方法[14]計算半數致死濃度（median lethal concentration，簡稱LC50）。

1.3 復配劑最佳配比的篩選

以單劑川楝素和吡蟲啉的LC50值為基礎，采用交互測定法[15-16]進行最佳配比的篩選。試驗設11個濃度梯度及空白對照共12個處理進行測定，即取川楝素和吡蟲啉2種單劑各自LC50值為100%，然后分成10等份，按0 ∶ 10、1 ∶ 9、2 ∶ 8、3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5、6 ∶ 4、7 ∶ 3、8 ∶ 2、9 ∶ 1、10 ∶ 0復配比分別計算2種單劑在各復配劑中的含量，以清水為對照，據各處理測試結果計算預期死亡率和毒效比率，公式如下：

預期死亡率=（A農藥LC50值實際死亡率×A農藥所占比例+B農藥LC50值實際死亡率×B農藥所占比例）×100%；

毒效比率=實際死亡率/預期死亡率。若1.00≤毒效比率≤1.25，為相加作用；若毒效比率>1.25，表現為增效作用；若毒效比率<0.75，則表現為拮抗作用。

1.4 川楝素和吡蟲啉復配劑共毒系數的測定

參照“1.2”節的方法測定川楝素和吡蟲啉復配劑對瓜蚜的毒力，然后計算共毒系數。據測定結果，運用Finney公式法分別求出每組復配劑中的毒力回歸方程、LC50值及相對毒力指數；最后參照孫云沛合成法公式[17]計算出復配劑的共毒系數（co-toxicity coefficient，簡稱C.T.C）：

理論（A+B）復配劑毒力指數=A單劑毒力指數×A單劑在復配劑中所占百分比+B單劑毒力指數×B單劑在復配劑中所占百分比；endprint

式中，A、B分別表示川楝素和吡蟲啉2種單劑。

2 結果與分析

2.1 川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力

室內毒力測定結果表明，川楝素的毒力回歸方程為y=2394 3x+1.557 4，r2=0.924 1，由此計算出其對瓜蚜的致死中濃度LC50值為27.405 1 mg/L；吡蟲啉的毒力回歸方程為 y=3.021 7x+0.429 4，r2=0.956 8，其對瓜蚜的致死中濃度LC50值為31.812 7 mg/L。

2.2 川楝素和吡蟲啉復配的最佳配比

由表1可知，在11個復配組合中，處理2、處理7、處理8的毒效比大于1小于1.25，表現為相加作用；處理3、處理4、處理5、處理6、處理9、處理10的毒效比均大于1.25，表現為增效作用，其中處理4、處理5、處理6這3組的毒效比分別為1.81、1.90、1.90，明顯高于其他配比組合。

2.3 川楝素和吡蟲啉混配劑共毒系數

分別對處理4、處理5、處理6這3個配比進行室內毒力測定，求出各自的回歸方程和LC50。由表2可知，處理5共毒系數最高，達到331.77，川楝素與吡蟲啉的含量分別為10.964、19.086 mg/L，為最佳配比；其次是處理6，共毒系數為 220.37，川楝素與吡蟲啉的含量分別為13.705、15.905 mg/L；配比為3 ∶ 7組合的共毒系數為219.46，川楝素與吡蟲啉的含量分別為8.223、22.267 mg/L。處理4、處理5、處理6復配劑共毒系數均大于200，表明川楝素與吡蟲啉在這3種復配比例下對瓜蚜均有明顯的增效作用，2種藥劑混用能提高防治效果。

3 結論與討論

作物在生長發育過程中，容易受到各種蟲害的侵襲，特別是蔬菜作物，其蟲害種類繁多，危害嚴重，如蚜蟲、小菜蛾、菜粉蝶等[2]。長期以來，化學防治是防治作物蟲害的主要方法[18]。但長期使用化學殺蟲劑，害蟲容易產生抗藥性。為增強防治效果必然會造成化學農藥的過量施用，這無疑加大了農業生產對生態環境的破壞，并對人類健康產生威脅。基于此，害蟲生物防治逐漸受到了人們的關注。近年來，川楝素等生物殺蟲劑的應用越來越受到人們的重視[7]。但與化學殺蟲劑相比，生物殺蟲劑往往存在殺蟲譜較窄的缺點。生產中多采用多種生物殺蟲劑復配或生物殺蟲劑與化學殺蟲劑復配來擴大殺蟲譜并提高藥效，亦可延緩害蟲產生抗藥性。因此，增效生物復配劑以其獨特的優勢，已成為農田蟲害綜合防治的重要手段[11]。

本研究通過浸葉法測定川楝素和吡蟲啉對瓜蚜的毒力，并篩選2種藥劑復配的最佳配比。室內毒力測定結果表明，川楝素和吡蟲啉復配的11組配比篩選試驗中，增效作用明顯的川楝素與吡蟲啉含量比例分別為3 ∶ 7、4 ∶ 6、5 ∶ 5，這3種復配劑的共毒系數分別達到219.46、331.77、220.37，表明川楝素與吡蟲啉在這3種復配比下對瓜蚜均有明顯的增效作用。瓜蚜對化學農藥易產生抗藥性[3]，而川楝素這一植物性殺蟲劑復配吡蟲啉，既能保證防效，又能減輕環境污染，同時還可有效延緩害蟲產生抗藥性，在我國的農田害蟲防治中具有良好的應用前景。

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