MMP-9、EGFR和E-cadherin的表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

張安文

（廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科，廣西 柳州 545000）

MMP-9、EGFR和E-cadherin的表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

張安文

（廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科，廣西 柳州 545000）

目的：研究基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）和E-鈣黏蛋白（E-cadherin）的表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性。方法：選取2010年2月至2014年5月期間在廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科接受檢查的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者作為本次研究的對(duì)象。將其按病理標(biāo)本采集方式的不同分為乳腺癌組（包含50例乳腺癌患者，其病理標(biāo)本均來(lái)自其癌灶）、癌旁正常乳腺組（包含20例未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，其病理標(biāo)本均來(lái)自其癌灶旁正常的乳腺組織）、乳腺增生組（包含20例乳腺增生患者）。采用免疫組織化學(xué) S-P 法檢測(cè)這三組患者病理標(biāo)本中EGFR、MMP-9和E-cadherin的表達(dá)水平，分析該檢測(cè)結(jié)果與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。結(jié)果：三組患者病理標(biāo)本中E-cadherin的陽(yáng)性率相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。乳腺癌組患者病理標(biāo)本中EGFR的陽(yáng)性率低于癌旁正常乳腺組和乳腺增生組患者，其病理標(biāo)本中MMP-9的陽(yáng)性率高于癌旁正常乳腺組和乳腺增生組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者病理標(biāo)本中EGFR和MMP-9的陽(yáng)性率均高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05 ）。結(jié)論：MMP-9、EGFR的表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。對(duì)乳腺癌患者進(jìn)行EGFR和MMP-9聯(lián)合檢測(cè)可判斷其是否發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。E-cadherin的表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生及乳腺癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)關(guān)聯(lián)。

EGFR；MMP-9；E-cadherin；乳腺癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

乳腺癌是常見的惡性腫瘤之一。近年來(lái)，該病在我國(guó)的發(fā)病率呈逐年升高的趨勢(shì)。進(jìn)行早期診斷和治療是降低該病患者死亡率的關(guān)鍵[1]。基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）具有降解細(xì)胞外基質(zhì)（主要是Ⅳ型膠原）、破壞基膜、促進(jìn)腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的作用。有報(bào)道顯示，MMP-9可在乳腺癌、胃癌及甲狀腺癌等多種腫瘤中呈過(guò)度表達(dá)，并參與腫瘤細(xì)胞的增殖、脈管的生成和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等過(guò)程，其與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。E-鈣黏蛋白（E-cadherin）是一類鈣離子依賴性跨膜糖蛋白，主要存在于人體的乳腺、胃上皮與甲狀腺等非神經(jīng)性上皮組織中。E-cadherin主要介導(dǎo)同源細(xì)胞間的黏附，維持細(xì)胞極性和組織結(jié)構(gòu)的完整性。有研究結(jié)果表明[2]，機(jī)體中缺失E-cadherin可導(dǎo)致細(xì)胞間黏附能力的下降，從而引起腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移。表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）是一種常見的表皮生長(zhǎng)因子，屬于酪氨酸激酶跨膜受體蛋白。EGFR在促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、血管的生成、腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移等方面均發(fā)揮重要的作用。目前，臨床上關(guān)于EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌相關(guān)性的研究較少。在本次研究中，廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科通過(guò)對(duì)該院在2010年2月至2014年5月期間收治的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，探討EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性，以期為乳腺癌的診斷與治療提供科學(xué)的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本次研究的對(duì)象為2010年2月至2014年5月期間在廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院確診的50例乳腺癌患者和20例乳腺增生患者。這70例患者均經(jīng)腫塊切除活檢術(shù)或術(shù)前空芯針穿刺術(shù)確診患有乳腺癌及乳腺增生，均為女性患者，其臨床資料完整。在50例乳腺癌患者中，有47例浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者，3例浸潤(rùn)性小葉癌患者；其中，有30例發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，20例未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者；其年齡介于23～68歲之間，平均年齡為（48.7±12.9）歲。20例乳腺增生患者的年齡介于22～67歲之間，平均年齡為（49.6±4.5）歲。按病理標(biāo)本采集方式的不同將這70例患者分為乳腺癌組（包含50例乳腺癌患者，其病理標(biāo)本均來(lái)自其癌灶）、癌旁正常乳腺組（包含20例未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，其病理標(biāo)本均來(lái)自其癌灶旁正常的乳腺組織）、乳腺增生組（包含20例乳腺增生患者）。這三組患者的病理標(biāo)本檢查結(jié)果均由兩名副高職稱的病理科醫(yī)生進(jìn)行復(fù)檢。這70例患者在參與本次研究前均無(wú)放療、化療及內(nèi)分泌治療史。

1.2 試劑及方法

本次研究使用的抗體和試劑包括鼠抗人MMP-9、EGFR、E-cadherin單克隆抗體、SP免疫組化染色試劑盒和DAB顯色劑等，均購(gòu)自福州邁新公司。采用免疫組化S-P染色法檢測(cè)這三組病理標(biāo)本中MMP-9、EGFR和E-cadherin的表達(dá)情況。所有的病理標(biāo)本切片均經(jīng)微波抗原修復(fù)。按照試劑盒及儀器說(shuō)明書進(jìn)行免疫組化染色操作。用已知的陽(yáng)性乳腺癌組織作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察MMP-9、EGFR和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。MMP-9、EGFR和E-cadherin的主要著色部位為細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜。以病理標(biāo)本的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。其中，陰性表達(dá)：指細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性細(xì)胞的計(jì)數(shù)＜5%；陽(yáng)性表達(dá)：指細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中的陰性細(xì)胞計(jì)數(shù)≥5%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本次研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用X2檢驗(yàn)，兩變量的相關(guān)性用 Spearman進(jìn)行相關(guān)性分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患者病理標(biāo)本中EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率的對(duì)比

三組患者病理標(biāo)本中E-cadherin的陽(yáng)性率相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。乳腺癌組患者病理標(biāo)本中EGFR的陽(yáng)性率低于癌旁正常乳腺組和乳腺增生組患者，其病理標(biāo)本中MMP-9的陽(yáng)性率高于癌旁正常乳腺組和乳腺增生組患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。乳腺增生組患者與癌旁正常乳腺組患者病理標(biāo)本中EGFR的陽(yáng)性率相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表1。

2.2 EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

在乳腺癌組的50例患者中，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與未發(fā)生并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者其病理標(biāo)本中E-cadherin的陽(yáng)性率相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05 ）。發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者病理標(biāo)本中EGFR和MMP-9的陽(yáng)性率均高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05 ）。詳見表2。

表1 三組患者病理標(biāo)本中EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率的對(duì)比

表2 EGFR、MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

2.3 MMP-9和EGFR表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

50例乳腺癌患者病理標(biāo)本中MMP-9和EGFR的表達(dá)呈正相關(guān)（X2=6.44，r=0.302）。詳見表3。

表3 MMP-9和EGFR表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

2.4 EGFR和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

50例乳腺癌患者病理標(biāo)本中EGFR和E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（X2=5.19，r=-0.279）。詳見表4。

表4 EGFR和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

2.5 MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

50例乳腺癌患者病理標(biāo)本中MMP-9和E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（X2=16.15，r=-0.279）。詳見表5。

表5 MMP-9和E-cadherin表達(dá)與乳腺癌的相關(guān)性

3 討論

腫瘤從原位增殖到侵襲轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程。腫瘤細(xì)胞具備降解細(xì)胞外基質(zhì)的能力是其中的關(guān)鍵。MMP-9具有降解細(xì)胞外基質(zhì)、破壞基膜、促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的作用，與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[3]。E-cadherin是鈣黏素家族中的一員，其可通過(guò)介導(dǎo)同源細(xì)胞間的黏附，維持細(xì)胞極性和組織結(jié)構(gòu)的完整性。E-cadherin的缺失可導(dǎo)致細(xì)胞間黏附能力的下降，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移。不過(guò)，臨床上對(duì)E-cadherin的表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性尚存在爭(zhēng)議。時(shí)志民等[4]認(rèn)為，E-cadherin在乳腺癌患者的病理組織中呈低表達(dá)，且與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。譚敏華等[5]則認(rèn)為，E-cadherin在乳腺癌患者病理組織中的表達(dá)與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。EGFR屬于原癌基因的產(chǎn)物，是單個(gè)跨膜螺旋的酪氨酸蛋白激酶受體，其在促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮重要的作用。楊迎旭等[6-7]的研究表明，EGFR在分化差或伴有轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤中呈過(guò)度表達(dá)。趙穎海等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9參與了乳腺癌的發(fā)生和演化進(jìn)展的過(guò)程，其在發(fā)生和未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者病理組織中的陽(yáng)性率存在顯著差異。李治等[9]的報(bào)道指出，MMP-2和MMP-9的高表達(dá)與NSCLC 的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

綜上所述，MMP-9、EGFR的表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。對(duì)乳腺癌患者進(jìn)行EGFR和MMP-9聯(lián)合檢測(cè)可判斷其是否發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。E-cadherin的表達(dá)水平與乳腺癌的發(fā)生及乳腺癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)關(guān)聯(lián)。

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2095-7629-（2017）18-0110-03