養殖密度對雜交鱧生長和生理指標的影響

吳曉清, 馬卉佳, 高勝男, 陳擁軍, 林仕梅

( 1.重慶市水產技術推廣站，重慶 401147；2.西南大學 動物科技學院，淡水魚類資源與生殖發育教育部重點實驗室，重慶 400715 )

養殖密度對雜交鱧生長和生理指標的影響

吳曉清1, 馬卉佳2, 高勝男2, 陳擁軍2, 林仕梅2

( 1.重慶市水產技術推廣站，重慶 401147；2.西南大學 動物科技學院，淡水魚類資源與生殖發育教育部重點實驗室，重慶 400715 )

設置0.8、1.1、1.4、1.7 kg/m34個養殖密度，研究放養密度對雜交鱧[均質量為(16.5±0.5) g]生長和生理指標的影響。60 d的飼養表明，隨著養殖密度的增加，雜交鱧的終末體質量、攝食率、特定生長率和蛋白質效率顯著降低，而飼料系數顯著升高(P<0.05)。雜交鱧紅細胞數隨放養密度的增加而顯著升高(P<0.05)，而白細胞數無顯著變化(P>0.05)。0.8 kg/m3密度組血紅蛋白含量顯著低于其他試驗組(P>0.05)。隨著放養密度的增加，血清總膽固醇和血糖含量顯著升高(P<0.05)，而甘油三酯、球蛋白含量以及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性顯著下降(P<0.05)。各試驗組血清總蛋白含量無顯著變化(P>0.05)。1.7 kg/m3密度組血清丙二醛含量顯著高于其他密度組(P<0.05)。總之，高密度養殖對雜交鱧生長、攝食和代謝產生不利的影響。

雜交鱧；養殖密度；生長；生理指標

我國有限的土地資源迫使魚類生產者通過增加放養密度來提高單位水體的產量，以獲取更高的養殖效益[1-2]。眾所周知，養殖密度是影響魚類生長[3-4]和品質[5-6]的重要因素。研究表明，不適宜的放養密度會影響養殖魚類的攝食、生長和飼料轉化率，甚至魚體健康[5,7-8]。而高密度養殖會引起魚類一系列的生理生化和免疫響應[9]，進而影響魚的攝食和生長[10-12]，導致個體間生長差異增大,出現生長級差，甚至還會影響養殖水質[13]。

雜交鱧(Channamaculata♀×C.argus♂)因生長快、抗逆性強、產量高、肉質鮮美等特點，成為我國的經濟養殖魚類。目前，雜交鱧主要采用池塘高密度集約化養殖，產量在45 000 kg/hm2以上，由于養殖技術資料的缺乏，以致諸多問題在生產中凸顯出來，如生長、病害、個體均勻等問題。高密度養殖不僅是許多疾病的重要誘因[14]，而且還影響魚的生長性能。為此，本研究探討了不同放養密度對雜交鱧生長和生理指標的影響，旨在補充和完善其養殖學資料，為雜交鱧的規模化、生態化養殖生產提供依據和技術指導。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

以魚粉和豆粕為主要蛋白源，魚油和豆油為脂肪源，配制一種生產實用飼料(粗蛋白42%，總能18 MJ/kg)。飼料原料均過80目篩，采用逐級稀釋法混合均勻，制成粒徑為3.0 mm的膨化浮性顆粒飼料(洋工TSE65S型雙螺桿濕法膨化機)，風干后放入冰箱中4 ℃保存備用。

1.2 試驗設計與飼養管理

設置0.8、1.1、1.4、1.7 kg/m34個密度組，每組設3個重復，在室內循環養殖系統(每個缸的有效容積為3000 L)中飼養雜交鱧[均質量為(16.5±0.5) g] 60 d。試驗處理均投喂同一種飼料，日投飼率為體質量的3%～5%，每日08:30、13:30、17:30各投喂1次。水源為曝氣自來水，養殖期間水溫為(26.5±2.3) ℃，溶解氧>6.8 mg/L，氨氮<0.39 mg/L，pH 7.2±0.3。

1.3 樣品制備與分析

養殖試驗結束后，禁食24 h稱體質量。每缸隨機取4尾魚, 取其內臟、肝臟和脾臟稱質量；隨機取10尾于尾靜脈取血，部分保存于醫用真空采血管，用于血液學分析，其余血樣4 ℃靜置過夜, 3000 r/min 離心10 min后取血清, -80 ℃保存備用。

全血樣品經磷酸緩沖液稀釋(1∶10000)后, 采用血球計數板統計白細胞數和紅細胞數。血紅蛋白含量采用試劑盒(南京建成生物工程研究所生產)測定。全血中葡萄糖(血糖)含量采用上海強生血糖儀測定。血清指標采用日立7100生化分析儀測定，包括總膽固醇、甘油三酯、總蛋白、球蛋白含量以及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性。血清丙二醛含量采用試劑盒(南京建成生物工程研究所生產)測定。蛋白質含量采用考馬斯亮藍法測定。

1.4 計算公式

攝食率/%·d-1=m1/[t×(m2+m3)/2]×100%

特定生長率/%·d-1=(lnm3-lnm2)/t×100%

飼料系數/%=m1/m4×100%

蛋白質效率/%=m4/m5×100%

臟體比/%=m6/m×100%

肝體比/%=m7/m×100%

脾臟系數/%=m8/m×100%

式中，m1為干物質攝入量(g)，m2為初體質量(g)，m3為末體質量(g)，m4為魚體凈增質量(g)，m5為蛋白質攝入量(g)，m6為內臟質量(g)，m7為肝胰臟質量(g)，m8為脾臟質量(g)，m為體質量(g)，t為試驗時間(d)。

1.5 數據處理與分析

采用SPSS 22.0對所得數據進行單因素方差分析，若差異達到顯著水平，則進行Tukey多重比較，顯著水平為0.05。除成活率外，數據均以平均值和標準差表示。

2 結 果

2.1 放養密度對雜交鱧生長的影響

隨著放養密度的增加，雜交鱧的末質量、特定生長率、蛋白質效率和攝食率顯著降低，而飼料系數顯著升高(P<0.05)(表1)。各試驗組臟體比、肝體比和脾臟系數無顯著差異(P>0.05)。試驗魚的成活率為100%。

表1 不同放養密度對雜交鱧生長的影響

注：同行肩標不同小寫字母表示顯著差異(P<0.05)，下表同.

2.2 放養密度對雜交鱧血液指標的影響

隨著放養密度的增加，雜交鱧紅細胞數顯著升高(P<0.05)，而白細胞數無顯著變化(P>0.05)(表2)。0.8 kg/m3密度組血紅蛋白含量顯著低于其他試驗組(P>0.05),其余密度組血紅蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。

表2 養殖密度對烏鱧血液學指標的影響

2.3 放養密度對雜交鱧血清生化指標的影響

隨著放養密度的增加，血清總膽固醇和血糖含量顯著升高(P<0.05)，而甘油三酯、球蛋白含量以及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性顯著下降(P<0.05)(表3)。各試驗組血清總蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。1.7 kg/m3密度組血清丙二醛含量顯著高于其他密度組(P<0.05)。

表3 不同養殖密度對烏鱧血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 放養密度對雜交鱧生長的影響

本研究發現, 隨著養殖密度的增加, 雜交鱧的生長性能顯著下降。這與在青石斑魚(Epinephelusawoara)[1]、大菱鲆(Scophthalmusmaximus)[2]、中華鱘(Acipensersinensis)[15]、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[16]和點籃子魚(Siganusguttatus)[17]上的研究結果一致。而養殖密度過低，魚類的生長也會受到抑制作用[4,18]。從已有的研究資料來看，不同的養殖魚類對密度的響應是有差異的[4,8-9]，這表明養殖密度與魚種、養殖方式和養殖環境密切相關。相反，也有研究指出，放養密度對養殖對象影響較小或幾乎沒有影響[19-20]。從生長和效益來講，養殖密度過高或過低對漁業的可持續發展都不利。在不同的養殖方式下，雜交鱧適宜的放養密度還有待深入探討。

本試驗期間，各試驗組都保持了良好的水質和較高的溶解氧水平，排除了水質條件對雜交鱧生長的影響，高密度組雜交鱧生長受到抑制的因子可能是擁擠脅迫。當然，養殖密度對魚類生長的影響不僅僅是水質變化造成的[11]。同時還發現，隨著養殖密度的增加，攝食率和蛋白質效率降低，而飼料系數升高。這進一步證實過高的養殖密度降低了雜交鱧對飼料的吸收利用率, 繼而影響其生長，類似的文獻較多[1-6]。有研究認為，高密度組魚類攝食率的降低是由于擁擠限制了食物可得性[21]。本試驗中雜交鱧采取飽食投喂, 即沒有限制對食物的可得性。因此, 高密度養殖條件下魚類低攝食量可能就是對擁擠脅迫的一種適應[22]。密度過高還會引起魚類出現一定程度的應激反應[23], 導致機體能耗升高。本研究中, 高密度組血紅蛋白含量顯著高于低密度組, 也證實了高密度組雜交鱧個體血液的攜氧能力提高,新陳代謝相對旺盛，這與此前結果類似[8,11,24]。通常魚類的應激狀況可通過生長受抑制反映出來[25]。由此可見, 高密度組雜交鱧處于擁擠脅迫造成的應激狀態，導致攝入的營養物質用于消耗供能的比例偏高[26]，飼料利用率降低，從而抑制了魚的生長。

3.2 放養密度對雜交鱧血液生理的影響

在現代集約化養殖生產中，密度脅迫可引起魚類生理生化指標及行為學的變化[27],通過血液中生化指標的變化還可了解魚類的健康與營養狀況[28]。在高耗能狀態(高密度)下，養殖魚類通過增加血紅蛋白含量和紅細胞數量來提高氧的運輸能力，這是魚類的一種生理性適應反應[6,11]。本研究結果也證實，養殖密度能明顯增加雜交鱧紅細胞的數量。這與在雜交鱘(A.baerii×A.schrenckii)[6]、俄羅斯鱘(A.gueldenstaedtii)[8]、虹鱒[12]和褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)[29]上的研究結果一致，而青石斑魚的紅細胞數量卻隨養殖密度的增加而遞減[6]。由此可知, 養殖密度確實引起了魚類紅細胞數量發生了變化, 但是存在種間差異。同時以上結果也表明，在高密度養殖條件下,通過增加血紅蛋白的含量來提高紅細胞的攜氧能力,以滿足魚體生長、代謝對氧的需求。

研究表明, 養殖密度作為魚類的一種應激因子,通常用皮質醇來評估魚類應激反應的強度。而血漿皮質醇與血糖水平又密切相關[30]，皮質醇通過糖原異生或肝糖原分解途徑誘導血糖水平的升高，滿足機體對額外能量的需求[31]。因此，血糖被看成是研究魚類對脅迫適應性的一個重要參數[32]。高密度作為一種重要脅迫因子易引起雜交鱧對額外能量的需求，糖異生作用加強，從而導致血糖水平升高。這與在雜交鱘[6]、虹鱒[12]和歐洲狼鱸(Dicentrarchuslabrax)[33]上的研究結果一致。相反，高密度養殖對歐洲鰉(Husohuso)[34]血糖水平無顯著影響。同樣，血脂的變化也是反映動物處于應激狀況的一個重要特征。已有研究表明，養殖密度會影響歐洲狼鱸[35]和虹鱒[36]血清中甘油三酯和總膽固醇含量。本研究結果也證實了這一點，揭示了魚體還可通過加速甘油三酯的分解產生應對脅迫所需的能量[37]，所以密度越高甘油三酯含量就越低[36]。

3.3 放養密度對雜交鱧免疫和抗氧化能力的影響

研究表明，高密度作為脅迫因子會影響魚類的免疫和抗氧化能力[38]。本研究發現，高密度組球蛋白和堿性磷酸酶活性顯著降低，這在雜交鱘[6]、虹鱒[12]和黃姑魚(Nibeaalbiflora)[20]上有類似的報道。但高密度引起養殖魚類免疫參數的變化有差異[23,39]。由此可見，密度脅迫持續作用于養殖魚類，進而引起機體產生了一系列防御反應, 以應對外界環境的變化。雜交鱧同樣也能夠通過特異的生理調節來適應高密度脅迫的養殖環境。而環境與生理脅迫又可能對魚類產生氧化壓力，使得機體反應生成大量自由基。魚體超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的高低間接反映了機體的抗氧化能力[40]。本研究表明, 高密度顯著影響雜交鱧血清超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量，與俄羅斯鱘[8]的研究結果一致。這表明高密度組魚體受到擁擠脅迫時, 機體能耗升高, 促進了氧自由基的產生, 導致丙二醛含量升高。高密度組超氧化物歧化酶活性較其他組低, 說明密度過高也可引起機體代謝失衡，造成細胞損傷，降低了機體的抗氧化能力。

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PhysiologicalResponsesofHybridSnakehead(Channamaculata×C.argus)toDifferentStockingDensities

WU Xiaoqing1, MA Huijia2, GAO Shengnan2, CHEN Yongjun2, LIN Shimei2

( 1.Fisheries Technology Extension Station of Chongqing, Chongqing 401147, China; 2.Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development, Ministry of Education, College of Animal Science and Technology, Southwest University,Chongqing 400715, China )

The effects of chronic crowding stress on growth and physiological indices were studies in juvenile hybrid snakehead (Channamaculata×C.argus). Snakehead [mean body weight of (16.5±0.5) g] were randomly reared at four stocking densities (0.8 kg/m3，1.1 kg/m3，1.4 kg/m3and 1.7 kg/m3) for 60-days with triplicate groups.The results showed that the final body weight, specific growth rate(SGR), feed intake(FI) and protein efficiency rate(PER) were significantly decreased (P<0.05) with the increasing stocking density, but feed conversion ratio (FCR) significantly increased (P<0.05). The level of red blood cells was increased significantly with an increase in stocking density (P<0.05).However, stocking density had no significant effect on the level of white blood cells. The content of hemoglobin (HGB) was significantly (P<0.05) lower in 0.8 kg/m3group than that in other groups.With the increasing stocking density, plasma glucose(GLU) and total cholesterol (TC) increased significantly (P<0.05), but contents of triglyceride (TG) and globin(GLOB)， and activites of alkaline phosphatase (ALP) and superoxide dismutase(SOD) decreased significantly (P<0.05). Stocking density had no significant effect on total protein(TP) levels (P>0.05).There was significantly higher content of malondialdehyde (MDA) in 1.7 kg/m3group than in other groups(P<0.05).In conclusion, high stocking density will be harmful to the growth of hybrid snakehead.

Channamaculata×C.argus; stocking density; growth; physiological index

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.05.003

2016-11-11；

2017-01-06.

重慶市現代特色效益農業產業技術體系項目(2016-91).

吳曉清(1972-), 女, 工程師；研究方向：水產養殖技術推廣.E-mail: 729464038@qq.com.通訊作者: 林仕梅 (1970-), 男, 副教授；研究方向：水產動物營養與飼料.E-mail: linsm198@163.com.

S965.116

A

1003-1111(2017)05-0557-06