養殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響

林 琳，孫學亮，邢克智，郭永軍，陳成勛，于學權，王慶奎

( 1. 天津農學院 水產學院，天津 300384； 2. 天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384； 3. 天津市海發珍品實業發展有限公司，天津 300452 )

養殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響

林 琳1,2，孫學亮1,2，邢克智1,2，郭永軍1,2，陳成勛1,2，于學權3，王慶奎1,2

( 1. 天津農學院 水產學院，天津 300384； 2. 天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384； 3. 天津市海發珍品實業發展有限公司，天津 300452 )

為探究養殖密度對濕體質量為(132.75±0.51) g的豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響，設計了低(9.34 kg/m3)、中(19.23 kg/m3)、高(37.22 kg/m3)3個養殖密度，每個密度設3個重復，連續飽食投喂56 d后取樣，測定相關指標。試驗結果表明，37.22 kg/m3組的終末體質量、平均質量增加率和特定生長率均顯著低于其他兩組(P<0.05)，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著(P>0.05)；養殖密度對飼料系數、攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數無顯著影響(P>0.05)。血清總超氧化物歧化酶的活力在37.22 kg/m3組最高，19.23 kg/m3組最低，且各密度組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組血清總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05)，19.23 kg/m3組高于9.34 kg/m3組，但差異不顯著(P>0.05)；37.22 kg/m3組血清丙二醛顯著高于其他兩組(P<0.05)，而其他兩組間差異不顯著(P>0.05)；乳酸脫氫酶隨養殖密度的升高顯著增加，且各密度組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶顯著高于其他兩組(P<0.05)，而37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05)，其他兩組間差異不顯著(P>0.05)；養殖密度對血漿葡萄糖、膽固醇、C反應蛋白、總蛋白、乳酸無顯著影響。

養殖密度；豹紋鰓棘鱸；生長；血液生化指標

豹紋鰓棘鱸(Plectropomusleopardus)，隸屬鱸形目、科、鰓棘鱸屬，俗稱東星斑，主要分布在西太平洋至印度洋海區，我國海南東岸和南部海區有少量分布[1]。豹紋鰓棘鱸體色鮮紅，肉味鮮美，營養豐富，含有二十幾種人體所需的微量元素，具有高蛋白，低脂肪，低膽固醇等優點[2]，具有很高的經濟價值。目前市場上銷售的豹紋鰓棘鱸絕大部分為野生魚，該魚的人工養殖尚處于起步階段。目前國內對豹紋鰓棘鱸的研究報道見于胚胎及仔稚幼魚發育[3]，鹽度、光照度和溫度對其受精卵孵化和仔魚成活率的影響[4]，工廠化養殖試驗[5]，主要營養素源對工業化養殖豹紋鰓棘鱸生長、體色和消化吸收的影響[6]，投喂不同飼料對幼魚生長效果的影響[7]等方面；國外僅見豹紋鰓棘鱸幼魚游泳和定居行為[8]、野生種群生物學[9]的報道。目前，人工養殖條件下豹紋鰓棘鱸生長緩慢、成活率低、體色暗淡，養殖難度較大。與同亞科的石斑魚屬(Epinephelus)養殖魚類相比，豹紋鰓棘鱸不適于較高的養殖密度，但其適宜的養殖密度，目前尚未見報道。

在魚類集約化養殖過程中，較高的養殖密度雖然有利于提高單位水體魚產量，但也會導致養殖魚類產生應激脅迫，生長減緩，飼料利用率下降，個體間生長差異增大[10]，更易患病[11]；較低的養殖密度雖然有利于養殖對象的生長和健康，但單位水體魚產量較低。因此，采用適宜的養殖密度既能保障養殖魚類的健康，又能提高單位水體魚產量。本試驗初步研究高、中、低3種養殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標的影響，探索豹紋鰓棘鱸在工廠化養殖條件下的適宜養殖密度，為其集約化健康養殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗魚

試驗魚210尾，濕體質量(132.75±0.51) g，體長(18.69±0.24) cm。

1.2 試驗設計

將試驗魚隨機分配到9個水體容積為138 L的水族箱(80 cm×55 cm×40.5 cm)中，高密度組40尾/箱(37.22 kg/m3)，中密度組20尾/箱(19.23 kg/m3)，低密度組10尾/箱(9.34 kg/m3)，每個密度設3個重復。日飽食投喂2次，連續飽食投喂56 d后取樣，測定生長和血液生化指標。

1.3 日常管理

試驗魚先在試驗水族箱內馴化14 d，待其正常攝食后開始試驗。試驗期間每日7:30和19:30投喂天津市海發珍品實業發展有限公司生產的海水魚配合飼料，投喂30 min后吸出殘餌，計算攝食量。試驗用海水為豹紋鰓棘鱸養殖車間的海水，海水通過管道流入水族箱中，通過溢水口溢出箱外。每個水族箱內放置一個散氣石，連續充氣。試驗期間海水鹽度27.7～29.4，水溫(28.8±0.1) ℃，溶解氧(6.32±0.01) mg/L，氨氮0.023～0.146 mg/L，亞硝酸鹽0.005～0.025 mg/L。

1.4 樣品采集

分別在試驗開始和試驗結束時測量每尾魚的體質量。試驗結束后，用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉(100 mg/L)后，尾靜脈采血，肝素鈉抗凝。4 ℃，4000 r/min離心15 min，取血漿，-80 ℃保存備用。

1.5 測定指標

1.5.1 計算公式

特定生長率/%·d-1=[lnmt-lnm0]/t×100%

平均質量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

攝食率/%=mf/[0.5×(mt+m0)]t×100%

飼料系數=mf/(mt-m0)

瞬時生長率/%=mt=m0(1+α/100)t，α = (lnmt-lnm0)×100/t

公式中，mt為試驗結束體質量(g)，m0為試驗開始體質量(g)，t為試驗天數，mf為攝食量(g)，T為試驗期間平均水溫(℃)。

1.5.2 血液生化指標

血漿中總超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、丙二醛、溶菌酶、C反應蛋白、總蛋白、乳酸、乳酸脫氫酶，采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒測定。血糖、膽固醇、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶測定采用中生北控生物科技股份有限公司所生產的測試盒測定。

1.6 數據分析

數據用SPSS 17.0軟件進行方差分析，差異顯著(P<0.05)的用Duncan′s法作多重比較。表中數據用平均值±標準差表示。

2 結 果

2.1 攝食和生長

試驗結束時，37.22 kg/m3組的終末體質量、平均質量增加率、特定生長率均顯著低于其他兩組；19.23 kg/m3組的上述指標稍高于9.34 kg/m3組，但差異不顯著(P>0.05)；隨著密度的增加，各組飼料系數也隨之增加，但差異不顯著(P>0.05)；各組間的攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數差異不顯著(P>0.05)(表1)。

表1 養殖密度對豹紋鰓棘鱸生長的影響

注：同一行數據標有不同字母的，表示差異顯著(P<0.05).下同.

2.2 抗氧化指標

總超氧化物歧化酶活力在各養殖密度組間差異顯著(P<0.05)，37.22 kg/m3組高于其他兩組；37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05)；而37.22 kg/m3組丙二醛含量顯著高于其他兩組(P<0.05)，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05)(表2)。

表2 養殖密度對豹紋鰓棘鱸抗氧化指標的影響

2.3 血液生化指標

乳酸脫氫酶活性隨養殖密度的升高而增加，且各組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活力顯著高于其他兩組(P<0.05)，9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05)；37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05)；葡萄糖、膽固醇、C反應蛋白、總蛋白、乳酸在各密度組間差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 養殖密度對豹紋鰓棘鱸血液生化指標的影響

3 討 論

3.1 養殖密度對水產動物生長的影響

養殖密度是影響魚類生長的一個重要因子。一般來說，低養殖密度能促進水產動物的生長，而過高的養殖密度則會對其造成脅迫。在高養殖密度下，低溶解氧、高氨氮和亞硝酸鹽、對食物和生活空間的競爭等，都會對水產動物的生長和代謝產生負面影響。眼斑星麗魚(Astronotusocellatus)幼魚質量增加率、體長增加率、特定生長率和質量平均日增長均隨養殖密度的增加而降低，高養殖密度組(400尾/m2，200尾/m2)個體生長速度離散度明顯加大[12]。施氏鱘(Acipenserschrenckii)在養殖密度為1.347 kg/m2和2.469 kg/m2時生長效率、特定生長率和質量日增長顯著降低，且各密度組生長差異顯著[13]。王永波等[5]報道，在工廠化養殖豹紋鰓棘鱸過程中，當水溫適宜、溶解氧充足、鹽度適宜、水質清澈、換水率達50%～200%時，豹紋鰓棘鱸放養密度可按10～20 kg/m3計算，在魚體質量為150 g時，其參考的放養密度為9～15 kg/m3。本試驗中，37.22 kg/m3組的終末體質量、平均質量增加率和特定生長率均顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著。考慮到養殖成本，豹紋鰓棘鱸養殖密度以19.23 kg/m3為宜，這與上述報道接近。黃姑魚(Nibeaalbiflora)在1.49、3.0、4.8 kg/m3和5.81 kg/m34個密度下養殖30 d，4.8 kg/m3和5.81 kg/m3養殖密度的飼料系數明顯升高，分別為1.12和1.26[14]。本試驗中各養殖密度組攝食率差異不顯著(P>0.05),飼料系數隨養殖密度的增加而增加，平均質量增加率9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著，但均顯著高于37.22 kg/m3組，顯示高密度(37.22 kg/m3)的養殖條件導致豹紋鰓棘鱸生長緩慢。

3.2 養殖密度對水產動物抗氧化指標的影響

抗氧化指標的高低能反映魚體的健康狀況。總抗氧化能力能清除機體代謝過程中產生的過多的活性氧自由基，保護機體免受自由基氧化損傷，因而總抗氧化能力與機體健康程度密切相關[15]。機體中的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和抗氧化酶的總水平，即體現了總抗氧化能力。丙二醛是多烯不飽和脂肪酸被自由基氧化生成的脂質過氧化代謝產物，其含量的多少可間接反映細胞膜的氧化損傷程度。養殖密度對魚類總抗氧化能力的影響，目前尚未見報道。本試驗中，37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，而丙二醛含量顯著高于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組；9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組總抗氧化能力和丙二醛含量差異不顯著。這表明，高養殖密度(37.22 kg/m3)導致豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力顯著降低，機體遭受明顯的氧化損傷；而中、低養殖密度(19.23 kg/m3、9.34 kg/m3)不會對豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力產生顯著影響，機體氧化損傷程度較低。

超氧化物歧化酶能清除超氧陰離子自由基，保護細胞免受自由基損傷[16-17]。半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)在高養殖密度(8.20 kg/m2)下，總超氧化物歧化酶顯著低于中(4.83 kg/m2)、低(2.32 kg/m2)養殖密度組[18]。本試驗中，各密度組間總超氧化物歧化酶活力差異顯著(P<0.05)，且37.22 kg/m3試驗組顯著高于其他兩組，這與半滑舌鰨[18]的研究結果相反。

3.3 養殖密度對水產動物血液生化指標的影響

高養殖密度會導致魚類血液溶菌酶活力降低。如黃姑魚在5.81 kg/m3的養殖密度下，其血清溶菌酶活力顯著低于養殖密度為4.84、3.00、1.49 kg/m3的試驗魚[14]。8.20 kg/m2試驗組半滑舌鰨血漿溶菌酶活力顯著低于4.83 kg/m2、2.23 kg/m2組[18]。同樣，密度脅迫也會導致鯽魚(Carassiusauratus)血清溶菌酶活性顯著降低[19]。本試驗也發現，37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿溶菌酶活性顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，這與上述報道一致。

正常狀態下，機體中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶主要存在于肝臟細胞中，血清中含量很少，當細胞受到損傷時，二者由肝臟細胞擴散到血液，導致血清中這兩種酶的活性升高[20-21]。因此，檢測血液中這兩種酶的活性，可用來判斷肝細胞是否受到損傷[22-23]。本試驗中，37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性顯著升高，9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組中兩種酶活力差異不顯著，表明高養殖密度加劇了豹紋鰓棘鱸肝細胞損傷。

乳酸是機體劇烈運動時肌肉無氧呼吸酵解的代謝產物，乳酸脫氫酶將乳酸催化生成丙酮酸，丙酮酸可參與糖異生作用生成葡萄糖[24]。在此過程中，乳酸脫氫酶的活性顯著提高。點帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus) 在1.1、2.1、3.2、4.2 kg/m34個養殖密度下飼養42 d，后2個養殖密度試驗魚肝胰臟中的乳酸脫氫酶顯著升高[25]。本試驗發現，隨養殖密度增加，試驗魚血漿乳酸脫氫酶活力顯著升高，但各組間乳酸含量卻差異不顯著，這可能是19.23 kg/m3、37.22 kg/m3組較高的乳酸脫氫酶活性將一部分乳酸催化生成丙酮酸所致。在豹紋鰓棘鱸飼養過程中也發現，隨著養殖密度的增大，其游動頻率和速度也增加。

4 結 論

高養殖密度(37.22 kg/m3)導致豹紋鰓棘鱸生長性能顯著下降，血液總抗氧化能力、溶菌酶活力顯著降低，丙二醛含量、轉氨酶和乳酸脫氫酶活力顯著升高。中(19.23 kg/m3)、低(9.34 kg/m3)養殖密度對豹紋鰓棘鱸生長、血液總抗氧化活力、丙二醛含量、轉氨酶和溶菌酶無顯著影響。建議豹紋鰓棘鱸的養殖密度為19.23 kg/m3。

致謝

在本試驗的養殖過程中，天津市海發珍品實業發展有限公司董事長張樹森先生、楊永海總經理、朋禮泉經理、王禎輝副經理、馮建華主任給予了大力支持，在此一并表示衷心感激。

[1] 張欣,孫向軍,梁擁軍,等. 北方地區東星斑工廠化養殖技術[J]. 科學養魚,2011(7):35.

[2] 王銳,齊遵利,張秀文,等.東星斑的生物學特性和人工養殖技術[J]. 中國水產,2011(4):33-34.

[3] 王永波,陳國華,林彬,等. 豹紋鰓棘鱸胚胎發育初步觀察[J]. 海洋科學,2009,33(3):21-26.

[4] 張友標,喻達輝,黃桂菊. 生態因子對豹紋鰓棘鱸受精卵孵化和仔魚成活率的影響[J]. 廣東農業科學,2011(10):102-105.

[5] 王永波,鄭飛,劉金葉,等. 豹紋鰓棘鱸工廠化養殖試驗[J].熱帶生物學報,2014,5(1):16-19.

[6] 周邦維. 主要營養素源及光色對工業養殖豹紋鰓棘鱸生長、膚色及生理指標的效應研究[D]. 北京:中國科學院大學，2014.

[7] 徐實懷,頡曉勇,陳怡飚,等. 投喂不同飼料對豹紋鰓棘鱸幼魚生長效果的研究[J]. 科學養魚,2015(3):67-68.

[8] Leis J M, Carson-Ewart B M. In situ swimming and settlement behaviour of larvae of an Indo-Pacific coral-reef fish, the coral troutPlectropomusleopardus(Pisces: Serranidae)[J]. Marine Biology, 1999, 134(1):51-64.

[9] Williams A J, Currey L M, Begg G A, et al. Population biology of coral trout species in eastern Torres Strait: implications for fishery management[J]. Continental Shelf, 2008, 28(16):2129-2142.

[10] 黃寧宇,夏連軍,么宗利,等. 養殖密度和溫度對瓦氏黃顙魚幼魚生長影響實驗研究[J]. 浙江海洋學院學報,2005(3):208-212.

[11] Klinger H, Delventhal H, Higle V. Water quality and stocking density as stressors of channel catfish (IctaluruspunctatusRaf.)[J]. Aquaculture, 1983, 30(1/4):263-272.

[12] 邵鄰相,謝煒,葉菲菲. 養殖密度對地圖魚幼魚生長發育的影響[J]. 水產科學,2005,24(4):7-9.

[13] 莊平,李大鵬,王明學,等. 養殖密度對史氏鱘稚魚生長的影響[J]. 應用生態學報,2002,13(6):735-738.

[14] 薛寶貴,樓寶. 密度脅迫對黃姑魚幼魚生長、代謝及非特異性免疫的影響[J]. 漁業科學進展,2013,34(2):45-52.

[15] 鄧超準. 養殖密度和原花青素對星洲紅魚生長及生理生化的影響[D]. 廈門:集美大學，2015.

[16] 海春旭,馮安吉,梁欣,等. 自由基醫學[M]. 西安:第四軍醫大學出版社,2006.

[17] 鄭榮梁,黃中洋. 自由基醫學與農學基礎[M]. 北京:高等教育出版社,2001.

[18] 孫學亮,楊樹元,陳成勛,等. 不同密度對半滑舌鰨生長和血液生化指標的影響[J]. 東北農業大學學報,2012,43(6):100-105.

[19] 王文博,汪建國,李愛華,等. 擁擠脅迫后鯽魚血液皮質醇和溶菌酶水平的變化及對病原的敏感性[J]. 中國水產科學,2004,11(5):408-412.

[20] 桂遠明. 水產動物機能學實驗[M]. 北京:中國農業出版社,2004.

[21] Richard J, Strange C B, Schreck B. Corticoid stress response to handling and temperature in salmonids [J]. Trans Am Fish Soc,1977,106(3):213-218.

[22] 陳晨,黃峰,舒秋艷,等. 共軛亞油酸對草魚生長、肌肉成分、谷草轉氨酶及谷丙轉氨酶活性的影響[J]. 水生生物學報,2010,34(3):647-651．

[23] Berent D, Schmidt H, Wahl I T, et al. Effluent from a sewage treatment works causes changes in serum chemistry of brown trout (SalmotruttaL.) [J]. Ecotox Environ Safe, 2001,48(2):140-147.

[24] 劉祥云,蔡馬,王希東,等.生物化學[M]. 北京:中國農業出版社,2010.

[25] 逯尚尉,劉兆普,余燕. 密度脅迫對點帶石斑魚幼魚生長、代謝的影響[J]. 中國水產科學,2011,18(2): 322-328．

EffectsofStockingDensityonGrowthandBloodBiochemicalParametersinPlectropomusleopardus

LIN Lin1, 2, SUN Xueliang1, 2, XING Kezhi1, 2, GUO Yongjun1, 2, CHEN Chengxun1, 2，YU Xuequan3, WANG Qingkui1, 2

( 1. College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, Tianjin 300384, China; 3. Tianjin Haifa Seafood Industrial Development Co., Ltd,Tianjin 300452, China )

A 56-day experiment was performed at three stocking densities of low density (9.34 kg/m3, Group L), medium density (19.23 kg/m3, Group M) and high density (37.22 kg/m3, Group H) with triplication to evaluate the effects of stocking density on the growth, serum biochemical parameters ofPlectropomusleoparduswith initial body weight of (132.75±0.51) g. Results showed that the final body weight, percent weight gain and specific growth rate in Group H were significantly lower than those in Group M and Group L, while no significant difference were observed between Group M and Group L. No significant difference was observed in food conversion ratio, food intake, instantaneous growth rate and thermal-unit growth coefficient among three groups. Significant difference was observed on superoxide dismutase activity, with the maximum in Group H and the minimum in Group M. The total antioxidant capacity in Group H was significantly lower than that in Groups M and L. There was significantly higher malondialdehyde level in Group H than that in Groups M and L, without significant difference between Group M and Group L. The lactic dehydrogenase activity increased with the augment of stocking density, with significant difference among the three groups. The glutamic-pyruvic transaminase level and glutamic-oxaloacetic transaminase level in Group H were statistically higher than those in Group M and Gruop L, while lysozyme activity was significantly lower than those in Group M and Group L. No significant difference was observed on levels of plasma glucose, cholesterol, C-reactive protein, total protein, and lactic acid among the three groups.

stocking density;Plectropomusleopardus; growth; blood biochemical parameter

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.014

S965.399

A

1003-1111(2017)01-0083-05

2016-03-08；

2016-05-23.

國家自然科學基金(面上)項目(31270456)；國家農業科技成果轉化項目(2014GB2A100528)；天津市科技支撐計劃項目(12ZCDZNC05900，13ZCZDNC00700)；天津市高等學校科技發展基金計劃項目(20120625).

林琳(1990—)，女，碩士研究生；研究方向：水產增養殖學. E-mail:919890544@qq.com.通訊作者：王慶奎(1978—)，男，副教授；研究方向：水產動物增養殖學. E-mail: wangqk@tjau.edu.cn.