炎癥因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝細胞肝癌診斷和生存預測中的作用

曾明曦，康長明，王瓊芳,李政偉

1.四川省人民醫院消化內科(成都 610072)，2.陜西省神木市醫院(神木719300)

炎癥因子IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM在肝細胞肝癌診斷和生存預測中的作用

曾明曦1，康長明1，王瓊芳1,李政偉2△

1.四川省人民醫院消化內科(成都 610072)，2.陜西省神木市醫院(神木719300)

目的：探討血清IL-32、IL-18、IL-1β及EpCAM在肝細胞癌的診斷、預后的臨床價值。方法：前瞻性入組60例肝細胞癌患者和15例健康志愿者，在患者入院后給予相應治療前采血，采用酶聯免疫吸附法測定血清IL-32、 IL-1β、 IL-18及EpCAM水平。結果： HCC組患者血清IL-32、IL-18、EpCAM水平均顯著高于對照組(P<0.05)，HCC組與對照組的血清IL-1β水平無統計學差異(P>0.05)；血清IL-32、IL-18水平與MELD評分正相關；EpCAM曲線下面積(AUC)為0.985，截斷點為3.40，為診斷肝細胞癌最有價值的標志物；除了EpCAM，其它細胞因子與HCC患者的生存率無關(P>0.05)。結論：雖然細胞因子可作為肝癌的診斷標志物，但其對肝細胞癌患者的預后沒有參考價值；血清EpCAM可為肝細胞癌的診斷及患者的預后提供有效的參考價值。

肝細胞癌(HCC)預后與腫瘤分期和肝功能密切相關。白細胞介素(IL)-6和IL-32在肝細胞癌患者中高表達[1]，IL-32還與肝細胞癌患者預后密切相關[2]。除此之外，IL-18，IL-1β，上皮細胞黏附分子(EpCAM)可能也與肝細胞癌患者預后相關[3]。本研究通過酶聯免疫吸附(ELISA)檢測患者血清IL-32，IL-1β，IL-18及EpCAM水平，探討其對肝細胞癌的診斷和預后價值,報告如下。

資料與方法

1 一般資料 前瞻性納入2013年1月至2016 年12月我院收治的肝細胞癌患者(HCC)60例，其中男49例，女11例，平均年齡為(60±9)歲。均經MRI確診為肝細胞癌，并伴有甲胎蛋白(AFP)逐漸升高。所有患者均合并肝硬化，評估患者肝硬化的病因-乙型肝炎肝病毒(HBV)，丙型肝炎病毒或其它病因，并計算患者的Chile-Pugh和終末期肝病模型(MELD)評分。并納入15例健康患者作為對照組。HCC組60例患者的病因為酒精性4例，乙型肝炎病毒感染41例，丙型肝炎病毒感染12例，其他3例，Chile-Pugh分級中A級40例，B級18例，C級2例。HCC組與健康對照組在年齡，性別構成比上無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 在患者入院后給予相應治療前，空腹靜脈采血，分離血清置-20℃保存待測。血清IL-32， IL-1β，EpCAM均采用固相ELISA檢測，血清IL-18采用雙抗夾心ELISA檢測。對本組病例進行12～24個月的隨訪，每3個月隨訪1次，了解患者復發轉移，死亡時間，死亡原因等。

3 觀察指標 對比HCC組及對照組受試者血清IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平；對比HCC組幸存者和死亡者IL-32，IL-18，IL-1β及EpCAM水平。

結 果

1 兩組血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM檢測結果 HCC組患者血清IL-32， IL-18，EpCAM水平均顯著高于對照組(P<0.05)，HCC組與對照組的血清IL-1β水平無統計學差異(P>0.05)。隨后我們進行了相關性分析，結果表明甲胎蛋白(AFP)，臨床診斷HCC的重要血清標記物，與IL-32， IL-18，EpCAM等負相關(P>0.05)，血清IL-32，IL-18水平與MELD評分正相關(r= 0.315，P= 0.03；r= 0.297，P= 0.04)。

2 IL-32，IL-18，EpCAM診斷HCC的ROC曲線 在腫瘤標志物的ROC分析中，血清AFP，IL-32，IL-18，EpCAM區別HCC組患者和對照組均表現出了有價值的截斷水平(P<0.001)，所有腫瘤標志物均表現出了高靈敏度，特異性，準確性。血清EpCAM水平的截斷點為3.40，為診斷HCC最有價值的標志物(AUC = 0.985，P<0.001)。

3 血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平對HCC患者預后的影響 隨訪期間，HCC組共有35例患者(58%)死亡，該組的中位生存期是7.3±1.4個月。隨訪期間死亡的肝細胞癌患者EpCAM水平顯著高于幸存者(22.3 vs 17.9 pg/ml，P=0.01)。其它標記物與HCC患者的總體病死率沒有相關性，肝細胞癌患者的生存率與血清甲胎蛋白(AFP)水平沒有相關性，見表1。

表1 HCC組幸存和死亡者血清IL-32，IL-18，IL-1β，EpCAM水平比較( pg/ml)

注：與死亡組相比，*P<0.05

討 論

肝細胞癌是一個重要的全球健康問題。為了改善患者預后和長期生存，早期診斷肝癌是實施治療干預的關鍵。IL-32主要是由免疫調節細胞產生的一種促炎癥細胞因子，在潰瘍性結腸炎和其他多種炎癥性疾病高表達[4]。在41%胃癌患者和29%的肺癌患者腫瘤組織可見IL-32高表達[5]，這與慢性炎癥和腫瘤進展密切相關的共識一致。因此我們推測IL-32可能與HCC進展密切相關。在本研究中，我們發現HCC患者外周血中IL-32表達明顯增高，這也進一步表明IL-32可作為HCC的診斷指標。

EpCAM在多種腺癌和鱗狀細胞癌中高表達。正常情況下成熟的肝細胞不表達EpCAM，有研究發現75.9%的慢性酒精性肝炎、63.6%的丙型肝炎以及55.6%的慢性自身免疫性肝炎和乙型肝炎患者肝細胞表達EpCAM，而乙型和丙型肝炎病毒感染在HCC的發生發展中尤為重要，因此，我們推測EpCAM在HCC中也有重要作用，而基因表達測序研究也證實了這一點。本研究中，隨訪期間死亡的HCC患者EpCAM水平均顯著高于幸存者，表明HCC患者EpCAM高表達者預后也較差。

綜上所述，本研究HCC患者外周血中IL-32，IL-18，EpCAM表達顯著增高，IL-32，IL-18水平與HCC患者MELD評分正相關，但其對HCC患者的預后沒有參考價值，而血清EpCAM與患者生存率正相關，可為HCC患者的診斷及預后提供有效的參考價值。

[1] 張慧賢,馬向明,付慶江,等.肝細胞癌患者血清IL-17細胞因子水平檢測的臨床意義[J].陜西醫學雜志, 2016,45(10):1394-1395.

[2] 彭 莉,李 丹.血清IL-17和MMP-7檢測在肝細胞癌診斷中的作用[J].中國醫科大學學報, 2017, 46(3):248-250.

[3] 何海華,楊志奇,孫振綱,等.IL-10、IL-17及IL-18在肝細胞肝癌中的表達特點及其臨床意義[J].標記免疫分析與臨床,2016, 23(2):150-153.

[4] 李廣云,陳政華,徐逢皇,等.肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3和炎癥因子IL-17、IL-8相關性及臨床診斷研究[J].中華微生物學和免疫學雜志, 2016,36(3):213-218.

[5] 陳 儒,沈關心.IL-32與腫瘤生物學行為[J]. 醫學分子生物學雜志, 2017, 14(1):55-58.

RoleofIL-32,IL-1β,IL-18andEpCAMinthediagnosisandpredictionofsurvivalofhepatocellularcarcinoma

Zeng Mingxi，Kang Changmin，Wang Qiongfang，et al.

Department of Gastroenterology,People’s Hospital of Sichuan Province(Chengdu 610072)

Objective: To investigate interleukin (IL)-32,IL-1β, IL-18 and epithelial cell adhesion molecule(EpCAM) in the diagnosis and assessment of prognosis of HCC.Methods: Sixty patients with HCC and 15 healthy volunteers were enrolled into this prospective study. Serum samples were obtained at the first admission before any treatment was given. Serum IL-32, IL-1β, IL-18 and EpCAM levels were determined by ELISA kits.Results: The mean serum level of IL-32, IL-18 and EpCAM in patients with HCC were significantly higher than in the control subjects (P<0.05). The mean IL-1β level in the HCC group was not different from that in the control group (P>0.05). IL-32 and IL-18 levels showed positive correlation with MELD scores. EpCAM with a cutoff of 3.40 seems to be the most valuable marker for the diagnosis of HCC(AUC = 0.985).Cytokine levels except EpCAM did not correlate with survival (P>0.05). Conclusions: Although cytokines can be a diagnostic marker for HCC, they did not have any significant prognostic value in patients with HCC. Only EpCAM may be used to determine the prognosis of HCC,thereby assisting with treatment management.

Liver neoplasms/diagnosis Interleukin-8 Interleukin-1beta Epithelial cell adhesion molecule

△通訊作者

肝腫瘤/診斷 白細胞介素-8 白細胞介素-1β 上皮細胞粘附分子

R735.7

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.021

(收稿：2017-07-02)