AOTF-NIR快速檢測精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量新方法

馬子君，李亞東，劉芳時，姜文月，任緒華，蘇婷，鄭廣晶，齊美欣，高 陸*

（1.吉林省現代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長春 130000；2.吉林長白山藥業集團股份有限公司，吉林 白山 134300；3.長春中醫藥大學，吉林 長春 130000；4.吉林農業大學，吉林 長春 130000）

AOTF-NIR快速檢測精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量新方法

馬子君1，李亞東2，劉芳時3，姜文月1，任緒華3，蘇婷1，鄭廣晶2，齊美欣4，高 陸*

（1.吉林省現代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長春 130000；2.吉林長白山藥業集團股份有限公司，吉林 白山 134300；3.長春中醫藥大學，吉林 長春 130000；4.吉林農業大學，吉林 長春 130000）

目的采用聲光可調近紅外（AOTF-NIR）光譜技術，探索快速檢測精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量新方法。方法 建立近紅外光譜法測定人參皂苷Rb1含量，建立含量與NIR光譜之間的校正模型，利用NIR模型對未知樣品的人參皂苷Rb1含量進行預測。結果 人參皂苷Rb1的NIR模型校正均方根偏差為0.0247，預測均方根偏差為0.0282，決定系數為0.9533，采用驗正集樣品進行外部驗證，偏差為3.49%。結論 AOTFNIR快速分析法對人參皂苷Rb1含量預測結果較好，為精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1快速定量分析提供了新方法。

聲光可調近紅外光譜技術；精芪雙參膠囊；人參皂苷Rb1

精芪雙參膠囊具有補氣養陰、活血化瘀、養心安神功效。現代藥理學證明人參皂苷Rb1對心血管系統具有調節作用，并對血管內皮細胞具有保護作用，該膠囊作為改善心腦血管疾病的特效藥可能與人參皂苷Rb1含量密切相關[1]。該產品現行質量標準未對人參皂苷Rb1進行質量控制，本研究采用聲光可調近紅外光譜儀，通過AOTF-NIR對人參皂苷Rb1含量控制方法研究，建立精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量快速測定新方法，以期為成品快速定量分析提供有效方法[2]。

本研究采用HPLC與NIR進行關聯快速檢測成品人參皂苷Rb1含量，HPLC方法參考15年版《中華人民共和國藥典》人參皂苷檢測項并對提取方法進行了優化，進行了方法學考察，結果表明超聲提取方法優于索氏提取方法，方法學良好，大大節約了含測時間。

1 儀器與材料

近紅外光譜分析儀L u m i n a r-5 0 3 0購買于美國BRIMROSE，高效液相色譜儀購買于美國Thermo公司，ACEC18（250×4.6 mm，5 μm）；人參皂苷Rb1對照品（批號：120506-170101購買于中國食品藥品檢定研究院）；乙腈購買與Fisher為色譜純試劑。

2 實驗步驟

2.1 樣品收集采集與測定[3]

樣品的采集直接影響模型的預測能力[4]，本研究收集65批近3年不同批次的成品，其中60批用于校正、5批用于驗證。利用HPLC色譜儀，測定成品人參皂苷Rb1含量，建立方法如下。

用乙腈（A）及水（B）為流動相，按以下梯度進行洗脫，流速為1 mL/min；檢測波長為203 nm。見表1。

表1 人參皂苷Rb1含量測定高效液相測定方法

對照品溶液的制：用甲醇定容人參皂苷Rb1對照品成1 mL含0.15 mg Rb1的溶液。

供試品溶液：取本品粉末約1 g，精密稱定，置錐形瓶中，加三氯甲烷超聲處理30 min，棄去上清液，藥渣揮干，倒入100 mL錐形瓶中，使用移液管加水飽和正丁醇50 mL，過夜，超聲處理30 min，濾紙濾過，移液管取續濾液25 mL，使用蒸發皿蒸干，殘渣使用5 mL量瓶定容，搖勻，濾過即得。

進樣量為10 μL，進行測定。

2.2 模型建立并驗證

關聯測定結果與預處理光譜，并使用軟件建立模型，使用校正模型對樣品進行預測。

3 結 果

3.1 結果測定

依據2.1方法進行測定，對人參皂苷Rb1進行質量控制，人參皂苷Rb1含量測定用平均值計，色譜圖見圖1，測定結果見表2。

表2 精芪雙參膠囊成品人參皂苷Rb1含量測定含量測定結果

圖1 樣品測定色譜圖

3.2 采集光譜

依據光譜采集方式，按照3次光譜采集，60個樣品的總光譜圖見圖2、圖3。

圖2 校正集NIR原始光譜圖4 校正集預處理光譜

圖3 校正集樣品NIR預處理光譜

3.3 模型建立與驗證

校正模型顯示，模型的主成分維數為18，R2=0.9800，RMSEC=0.0247，RMSEP=0.0282。得到的樣品實測值與預測值相關性較好，模型較好，PLS模型見圖4。預測結果見表3。

圖4 人參皂苷Rb1含量模型

表3 NIR模型預測結果

結果可知，通過5批外部驗證集樣品中人參皂苷Rb1的HPLC實測值與預測值偏差為3.49%，表明該指標測定準確性較高。

4 討 論

本研究建立了精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1含量控制方法，HPLC法方法學良好，為成品質量控制增添了新標準，人參皂苷Rb1含量質量控制NIR模型具有良好的預測性，快速、無損的測定了成品人參皂苷Rb1含量，完善了精芪雙參膠囊人參皂苷Rb1快速檢測體系，為成品生產及質量控制節約了成本。

[1]王一博,肖 丹,李曉宇,戴雨霖,越 皓,劉淑瑩.液相色譜-質譜聯用技術結合多探針底物法研究人參皂苷Rb1的體外代謝[J].高等學校化學學報,2015,36(10):1894-1899.[2017-09-28].

[2]何智慧,練文柳,吳名劍,等.聲光可調-近紅外光譜技術分析煙草主要化學成分[J].分析化學,2006,05:702-704.

[3]汪靜靜.不同產地和年限人參樣品皂苷類成分的比較研究[D].安徽中醫藥大學,2015.

[4]汪靜靜,閆述模,楊 濱.近紅外光譜技術對人參藥材人參皂苷含量測定及產地識別的研究[J].光譜學與光譜分析,2015,35(07):1885-18

R927.2

B

ISSN.2095-8242.2017.64.12492.02

吉林省“雙十工程”重大科技成果轉化項目（20150301009YY）

高陸，女，教授

本文編輯：吳玲麗