血清游離輕鏈檢測在腎臟相關疾病中的診斷意義和應用價值

余悠悠，潘秀軍

(上海交通大學醫學院附屬新華醫院 檢驗科,上海200092)

血清游離輕鏈檢測在腎臟相關疾病中的診斷意義和應用價值

余悠悠，潘秀軍*

(上海交通大學醫學院附屬新華醫院 檢驗科,上海200092)

目的定量檢測血清游離輕鏈(serum free light chain,sFLC κ、λ )在慢性腎臟疾病(CKD)中的水平，分析在不同情況下腎損傷時血清游離輕鏈的變化，探討其在腎臟疾病中的臨床意義和應用價值。方法將慢性腎臟疾病患者分為3組，62例非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者，22例骨髓瘤性腎病κ型患者，12例骨髓瘤性腎病λ型患者，另選取40例健康體檢人群作為對照，采用散射比濁法定量檢測血清游離輕鏈 (κ、λ)的含量并計算κ/λ，并對結果進行分析。結果62例非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者sFLCκ和λ，κ/λ比值均升高,與健康對照組比較有顯著性差異(P<0.05)；22例骨髓瘤性腎病κ型患者sFLCκ和λ，κ/λ比值與對照組比較，均有顯著性差異(P<0.05)；12例骨髓瘤性腎病λ型患者的sFLCκ 的結果與對照組比較無顯著性差異(P>0.05)，sFLC λ結果與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)，κ/λ比值下降，與對照組比較亦有顯著性差異(P<0.05)。另外，隨著CKD分期的進展，血清游離輕鏈 κ、λ進行性地升高，尤其是在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的慢性腎臟疾病中，腎臟功能的損傷對血清游離輕鏈λ比對血清游離輕鏈κ 的影響更顯著。結論血清多克隆游離輕鏈(sFLC κ、λ)水平檢測，尤其κ/λ比值可反映腎損傷程度，當用于多發性骨髓瘤疾病的輔助診斷時，可作為腎損傷情況的評估，提高臨床診斷治療的準確性。在CKD患者腎損傷程度評估中亦具有重要的臨床意義。

慢性腎臟疾病；骨髓瘤性腎病；血清游離輕鏈；散射免疫比濁

(ChinJLabDiagn,2017,21:2087)

健康人的免疫球蛋白(immunoglubin，Ig)由兩條重鏈和兩條輕鏈經二硫鍵聯結而成的完整分子，其中輕鏈有兩型，即 Kappa(κ)和Lambda(λ)，在一個Ig分子中兩條輕鏈的比值接近2∶1[1]。輕鏈(light chain,LC)由B淋巴細胞產生，健康人每天產生LC約為0.5-1 g，多于重鏈(heavy chain,HC)[2]，部分輕鏈與重鏈以1∶1的比例結合形成完整的免疫球蛋白，還有部分未與重鏈結合而游離地存在于血清中,稱為血清游離輕鏈(serum free light chain,sFLC)。對于正常成人而言，血清FLC主要通過腎臟清除和代謝，清除速率和分子大小有關。腎小球相對分子質量在40-60×103的小分子物質可以自由濾過，L鏈的相對分子質量約22．5×103，因此可以自由通過腎小球，然后在近曲小管被重吸收和代謝。血清中L鏈的量最終取決于B細胞的合成分泌與腎臟清除的動態平衡結果[3]。非骨髓瘤性慢性腎臟疾病和骨髓瘤性腎病患者都由不同病因造成腎臟損傷，本試驗的主要目的是評價不同病因造成腎損傷時血清sFLC(κ、λ)結果變化及比值(κ/λ)的水平。以探討其在腎臟疾病中的臨床意義和應用價值，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1研究對象收集2015年11月至2016年6月上海交通大學附屬新華醫院34例多發性骨髓瘤患者，系臨床骨髓活檢、免疫電泳等確診患者，其中22例骨髓瘤性腎病κ型患者，12例骨髓瘤性腎病λ型患者。22例骨髓瘤性腎病κ型患者，男性13例，女性9例，平均年齡分別為63.9歲和57.8歲。12例骨髓瘤性腎病λ型患者，男性5例，女性7例，平均年齡分別為62.6歲和58.4歲。62例非骨髓瘤性腎臟疾病患者，男性34例，女性28例，且根據GFR的水平分為5期[4],各期病例數分別為8、8、16、15和15，平均年齡分別為34.8、55.4、62.4、64.1和69.1。健康體檢人群40例，其中男女性各20例，平均年齡分別為47.90歲和48.75歲。

1.2方法采用免疫散射比濁法。美國Beckman公司IMMAGE 800全自動免疫散射濁度儀(Beckman Coulter)，英國The Binding Site公司(FreeliteTM)提供sFLCκ、λ檢測試劑。

1.3統計學分析

采用SPSS19.0軟件進行統計學分析。用直線回歸計算相關性，統計描述采用中位數(四分位數)。兩樣本比較采用Mann-Whitney檢驗，多個樣本之間的比較采用Kruskal Willis檢驗，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1血清游離輕鏈(FLC κ 、λ )在非骨髓瘤性腎臟疾病，及骨髓瘤性腎病中的結果分析，采用中位數表示，見表1。

表1 各組血清游離輕鏈(sFLC κ 、λ )結果及比值(κ/λ)(M)

注：與健康對照組比較：*P<0.05

2.2健康對照組與CKD各期sFLC(κ 、λ )結果及比值比較，見圖1。

3 討論

CKD患者腎功能受損后，腎小球濾過率(GFR)下降，sFLC在腎臟中的代謝受到影響。隨著腎臟受損程度逐漸加重，腎臟清除功能進行性下降，本文結果顯示非骨髓瘤性慢性腎臟疾病患者血清游離輕鏈(sFLC κ、λ)結果及比值(κ/λ)均升高，與正常對照組有顯著差異(P<0.05)。Desjardins L[5]等人也得出相同的結論。并且分子量大小不同的物質腎臟對其的清除能力不相同[6]。因此當腎臟受損后，由于FLC κ以單體形式存在，分子較FLC λ小，在 它在腎臟中更易濾過，在CKD早期它所受的影響較小(見圖2：在CKDⅠ期到Ⅲ期的進展過程中，s FLC κ游離輕鏈的上升速度比sFLCλ的速度慢)。但FLC λ與腎臟功能變化比FLC κ關系更密切，更能準確反映腎臟功能變化，有研究顯示血清游離輕鏈logκ和logλ與末期腎功能衰竭死亡因素密切相關，但是當eGRF調節后，logκ顯著性的減少，不具有統計學意義，但是logλ血清游離輕鏈仍然具有統計學意義[7]。這個結果與本實驗所獲得的數據結果一致。當腎功能受損嚴重，網狀內皮系統成為血清游離輕鏈κ、λ的主要清除部位。網狀內皮系統對血清游離輕鏈的清除不受分子大小的影響，κ、λ型血清游離輕鏈的清除速度相近[8]。在病情進展中，sFLC κ/λ比值應呈現逐漸升高的表現。因此，CKD患者除了完善血清免疫固定電泳，sFLC檢測也是十分必要的，可以更早、更準確地評估腎功能的損傷程度[1]。

注： sFLCκ在健康人群及CKD各期中的水平(A)； sFLCλ在健康人群及CKD各期中的水平(B)； sFLCκ/λ在健康人群和及CKD各期中的水平(C)。

圖1健康對照組與CKD各期sFLC結果比較

本文結果還顯示22例骨髓瘤性腎病κ型患者sFLCκ顯著升高，λ值下降，κ/λ比值15.1,顯著升高，與對照組比較，均有顯著性差異；12例骨髓瘤性腎病λ型患者的sFLCκ 的結果與對照組比較無顯著性差異，而sFLC λ結果顯著升高，與對照組比較有顯著性差異，κ /λ比值0.20，與對照組比較亦有顯著性差異。與陳海飛等研究結果一致[3]。多發性骨髓瘤(MM)致腎損害常表現繼發性腎病綜合征，稱為骨髓瘤性腎病，其特點是患者血清和尿中常能檢測到單一增殖的輕鏈Kappa(M)或Lambda(k)[9]。對于正常腎功能的漿細胞病(plasma celldyscrasia，PCD)患者只有L鏈量超出近曲小管的最大重吸收能力(10-309/d)才有可能形成溢出性蛋白尿，從而在終尿中檢測到。如L鏈的量繼續分泌增加遠大于腎臟的重吸收能力進入遠曲小管并且可能形成管型堵塞腎小管，導致腎小球壞死腎功能下降，這樣，血清中的L鏈進一步升高，而尿中L鏈減少，殘存的腎單位勢必濾過更多的L鏈，如此惡性循環，最終腎功能進一步惡化。如上所述，血清L鏈水平上升提示病情進展，尿中L鏈的下降無法區分是治療有效還是疾病進展惡化。因此，血清FLC的水平和病情相關，尿L鏈水平則和病情不完全平行[3]。所以血清游離輕鏈分析提供了一個比尿蛋白電泳更準確的檢測游離輕鏈的方法[10]。FLC測定的敏感度明顯優于IFE和PE[11]。因此，在疑似為“非分泌型骨髓瘤” 時，免疫比濁法檢測sFLC是一種高度敏感的檢測方法,有助于NSMM患者輕鏈克隆性的判斷[12]。避免漏診和誤診。在臨床上90%的AL型淀粉樣變性患者存在血游離輕鏈水平升高和比值異常(<0．26或>1．65)，其中80%為λ輕鏈的異常。κ 輕鏈異常雖較少見，但患者臨床表現常較重，多伴腎功能不全。有觀察表明，患者游離輕鏈的水平與疾病的臨床表現和預后相關[13]。

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Diagnosticsignificanceandapplicationvalueofserumfreelightchaindetectioninkidneyrelateddiseases

YUYou-you,PANXiu-jun.

(Departmentoflaboratory,XinhuaHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200092,China)

ObjectiveQuantitative detection of serum free light chain (serum free light chain sFLC,kappa and lambda) in chronic kidney disease (CKD) in the level of analysis in renal injury changes of serum free light chain in different conditions,explore the kidney disease with clinical significance and application value.MethodsKidney disease patients were divided into 3 groups,62 cases of non tumor bone marrow of patients with chronic kidney disease,22 cases of myeloma nephropathy in patients with type κ,12 cases of myeloma nephropathy patients with type λ,the other 40 healthy cases were selected as control group,using nephelometry quantitative detection of serum free light chain (kappa,lambda) content and calculated the kappa/lambda,and the results were analyzed.Results62 cases of non myeloma kidney disease in patients with chronic sFLC kappa and lambda,kappa / lambda ratio were increased,there were significant differences between the control group and health (P<0.05); 22 cases of sFLC myeloma nephropathy patients with type k kappa and lambda,kappa/lambda ratio compared with the control group,there were significant differences(P<0.05);the results of 12 cases of myeloma nephropathy in patients with type λ sFLC kappa compared with the control group had no significant difference (P>0.05,sFLC).Results of lambda there was significant difference compared with the control group (P<0.05),kappa / lambda ratio decreased,compared with the control group,there was significant difference (P<0.05).In addition,with the CKD stage of development,serum free light chain kappa and lambda was increased,especially in patients with chronic kidney disease Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ.In the effect of kidney on serum free light chain lambda is more significant than serum free light chain kappa.ConclusionPolyclonal serum free light chain (sFLC kappa,lambda) level detection,especially the kappa/lambda ratio can reflect the severity of kidney damage,when used in the diagnosis of multiple myeloma disease,can be used as the assessment of kidney injury,improve the accuracy of clinical diagnosis and treatment.In the evaluation of the degree of renal injury in CKD patients also has important clinical significance.

chronic kidney disease;bone marrow tumor nephropathy;serum free light chain;scattering immune turbidity

*通訊作者

1007-4287(2017)12-2087-04

R692

A

余悠悠，女，主管技師，主要從事免疫學項目檢驗；潘秀軍，女，碩士，副主任技師，主要從事免疫醫學研究。

2016-09-15)