VEGF、IL-6表達水平在糖尿病性視網膜病變患者中的差異性分析

嚴鳴光,殷衛兵,解傳奇

(河南省商丘市第一人民醫院,河南 商丘476000)

VEGF、IL-6表達水平在糖尿病性視網膜病變患者中的差異性分析

嚴鳴光,殷衛兵,解傳奇

(河南省商丘市第一人民醫院,河南 商丘476000)

目的探究不同程度糖尿病性視網膜病變患者血清及房水中的VEGF、IL-6水平差異。方法研究對象選取2015.1-2015.12我院收治的90例糖尿病患者，根據視網膜病變程度進行分組，包括無糖尿病性視網膜病變組32例(A組)，非增殖期糖尿病視網膜病變27例(B組)，增殖期糖尿病視網膜病變31例(C組)，并選取同期收治的30例老年性白內障患者作為對照組，采用ELISA法對4組患者的血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平進行測定并分析其差異性。結果無論在血清還是眼房水中，VEGF、IL-6表達程度均為C組>B組>A組>對照組，且兩兩比較差異均具有統計學意義(P<0.05)，從同組表達水平來看，四組患者血清中的VEGF、IL-6的表達水平顯著低于眼房水中的VEGF、IL-6的表達水平，差異均具有統計學意義(P<0.05)；從相關性分析來看，A、B、C三組患者血清中的VEGF、IL-6的表達水平均與眼房水中的表達水平呈正相關。結論VEGF、IL-6水平隨著糖尿病病變程度的加深表達水平存在差異性，提示兩者可能在視網膜病變的發生發展中有著重要的作用，血清及眼房水中的VEGF、IL-6表達具有一致性。

視網膜病變；糖尿病；病變程度；血管內皮生長因子；白細胞介素-6

(ChinJLabDiagn,2017,21:2119)

糖尿病是常見的內分泌疾病，可能引發多種并發癥，其中糖尿病性視網膜病變是糖尿病患者最常見也最嚴重的并發癥之一，如果長期未能得到有效控制甚至可能致盲[1]。隨著近年來生活習慣和飲食結構的改變，我國糖尿病患者人數逐漸增多，糖尿病性視網膜病變也成為了影響患者健康及生存質量的一大重要問題。隨著分子生物學的發展，臨床發現多種細胞因子可能是引起血-視網膜屏障破壞的重要因素[2]，也是引發視網膜病變的主要原因，主要包括腫瘤壞死因子(TNF)、血管內皮生長因子(VEGF)、轉化生長因子(TGF-β)、胰島素樣生長因子(IGF)等，其中VEGF被認為是導致多種新生血管性視網膜病變的主要作用因子[3,4]。此外也有學者認為糖尿病性視網膜病變患者的發病與自身免疫機能有關[5,6]，被激活的免疫細胞產生的細胞因子在促胰島β細胞損傷中有著重要的意義。因此本文就不同程度的糖尿病性視網膜病變患者血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平差異性及相關性進行了研究分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料研究對象選取為2015.1-2015.12我院收治的90例糖尿病患者，根據視網膜病變程度進行分組，包括無糖尿病性視網膜病變32例(A組)，非增殖期糖尿病性視網膜病變27例(B組)，增殖期糖尿病視網膜病變31例(C組)，并選取同期收治的30例老年性白內障患者作為對照組。A組患者包括男性18例，女性14例，年齡52-76歲，平均63.5±5.7歲，病程3-16年，平均9.9±3.2年；B組患者包括男性15例，女性12例，年齡54-78歲，平均64.1±6.0歲，病程5-15年，平均10.3±4.0年；C組患者包括男性18例，女性13例，年齡51-79歲，平均63.9±5.6歲，病程6-18年，平均10.8±3.8年；對照組患者包括男性17例，女性13例，年齡55-79歲，平均64.4±6.9歲。4組患者在年齡、性別等一般資料對比上無顯著差異(P>0.05)。

1.2方法采用ELISA法對4組患者的血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平進行測定。患者抽取空腹靜脈血3 ml，注入無菌離心管混勻，3 000 r/min下離心10分鐘，去血清保存于-20℃環境下備用；患者行白內障手術前打開前房，用無菌1 ml注射器在角膜緣內1 mm進行穿刺，從中央瞳孔區抽取房水0.2 ml，注意操作時避免觸及晶狀體或虹膜，將標本置入0.5 ml的Eppendorf管保存于-80℃環境下備用。檢驗儀器為日本日立公司7170型全自動生化分析儀，VEGF檢驗試劑盒由北京晶美生物工程有限公司提供，IL-6檢驗試劑盒由北京百奧萊博科技有限公司提供，操作過程嚴格按照說明書進行。

1.3觀察指標對比各組患者血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平，對比并分析血清與眼房水中VEGF、IL-6水平的相關性。

2 結果

2.1血清VEGF、IL-6水平對比各組患者血清中VEGF、IL-6表達程度為C組>B組>A組>對照組，兩兩比較差異均具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組患者血清VEGF、IL-6表達水平統計對比

注：*表示與對照組相比P<0.05；#表示與A組相比P<0.05；&表示與B組相比P<0.05

2.2眼房水VEGF、IL-6水平對比 各組患者血清中VEGF、IL-6表達程度為C組>B組>A組>對照組，兩兩組間差異均具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組患者眼房水VEGF、IL-6表達水平統計對比

注：*表示與對照組相比P<0.05；#表示與A組相比P<0.05；&表示與B組相比P<0.05

2.3血清及眼房水中VEGF、IL-6水平表達差異及相關性從表1、表2數據對比來看，四組患者血清中的VEGF、IL-6的表達水平顯著低于眼房水中的VEGF、IL-6的表達水平，差異均具有統計學意義(P<0.05)。從相關性分析來看，A、B、C三組患者血清中的VEGF、IL-6的表達水平均與眼房水中的表達水平呈正相關(P<0.05)。

3 討論

糖尿病性視網膜病變是世界范圍內最常見的后天致盲性眼病，其中增殖性視網膜病變占總數的10%左右，超過50%的患者會在5年內發展成盲[7]，雖然目前玻璃體切除和激光光凝技術已十分成熟，但此類患者發展成盲的風險性仍遠遠高于其他患者。目前糖尿病性視網膜病變的發病機制臨床尚未闡明，以往主要認為是長期高血糖導致血栓形成，白細胞淤積所致，近年來隨著生物分子學的進展，臨床發現多種生長因子表達增加和細胞因子的活化也可能是導致此類疾病發生的重要原因[8]。

糖尿病性視網膜病變的病理基礎是血-視網膜屏障的破壞和新生血管的形成，因此VEGF在此類疾病中的作用逐漸被重視。VEGF屬于一種促內皮生長糖蛋白，具有誘導血管生成、促進血管內皮細胞增殖的生理功能，在正常人體內同樣存在，具有維持血管正常生理活動的意義，但正常情況下VEGF的表達較低[9]。研究發現視網膜血管內皮細胞具有多種VEGF受體，VEGF能夠選擇性的與這些受體結合，導致血管通透性增加，促進血管內皮細胞增殖，誘導新生血管形成，進而導致血-視網膜屏障的破壞[10]。Kurihara T等人[11]的研究顯示視網膜缺血性疾病患者的視網膜中含有大量的VEGF，且一些其他的血管滲透性因子也能夠通過VEGF間接發揮作用。一項研究采用原位雜交技術對新生血管性青光眼失明患者的摘除眼球進行了分析，結果顯示視網膜是唯一存在VEGFmiRNA表達的組織，VEGF廣泛存在于視網膜的內核層[12]。從本次研究數據來看，無論在血清還是眼房水中，VEGF的表達均為C組>B組>A組>對照組，這說明VEGF的表達與視網膜病變程度有密切相關。有研究指出VEGF與糖尿病視網膜病變患者的病程有密切相關[13]，但本文各組病例間病程對比并無顯著差異，這說在排除病程因素的情況下，VEGF的表達仍與視網膜病變程度密切相關。從血清和眼房水中VEGF的相關性分析來看，兩者呈正相關性，這提示視網膜病變患者血清的VEGF含量會一定程度上影響眼房水中的VEGF含量，這不單體現在糖尿病患者中，還同樣體現在非糖尿病性視網膜病變患者中。

關于糖尿病視網膜病變的病理機制，也有學者認為與自身免疫有關，認為細胞因子接到的炎癥反應在視網膜病變中有著重要的作用[14]。IL-6屬于炎前細胞因子，能夠調節免疫，提高B細胞免疫活性，促進巨噬細胞成熟，在機體的多種生理病理過程中均有參與，也是外傷刺激和感染反應的主要誘導分子[15]。IL-6作為一個重要的炎癥指標直接參與了血管病變的病理過程，大量循證醫學研究證實長期的慢性炎癥會導致局部平滑肌細胞損害，增加血小板對內皮細胞的粘附，進而產生血栓前狀態[16,17]。Matsuyama K等人[18]的研究證實糖刺激能夠促進IL-6的分泌，這說明糖尿病患者體內的IL-6水平普遍高于健康人群，因此可認為IL-6的高表達可能是引發糖尿病多種并發癥的重要因素。Ohno Matsui K等人[19]的研究發現糖尿病視網膜病變患者玻璃體中的IL-6水平上升，與非糖尿病視網膜病變患者對比存在顯著差異，認為IL-6與糖尿病視網膜病變的發生發展有密切相關。從本次研究數據來看，雖然B組和C組患者血清和眼房水中的IL-6表達水平顯著高于A組，但A組血清和眼房水中的IL-6表達水平同樣顯著高于對照組，這說明IL-6在糖尿病患者體內確實存在高表達的現象，但視網膜病變本身也是引起IL-6上升的一個重要因素。考慮原因是由于IL-6屬于一種多功能細胞因子，在組織缺氧狀況下IL-6能夠誘導眼內新生血管生成[20]。從血清和眼房水中的相關性分析來看，IL-6與VEGF保持一致，兩者之間呈正相關性，且同樣與患者的病變程度密切相關。

綜上所述，VEGF、IL-6水平隨著糖尿病病變程度的加深表達水平存在差異性，提示兩者可能在視網膜病變的發生發展中有著重要的作用，血清及眼房水中的VEGF、IL-6表達具有一致性。

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AnalysisofVEGFandIL-6levelsinserumandaqueoushumorofpatientswithdiabeticRetinopathy

YANMing-guang，YINWei-bing，XIEChuan-qi.

(TheFirstPeople’sHospitalofShangQiu,ShangQiu476000,China)

ObjectiveTo explore the differences of VEGF and IL-6 in serum and aqueous humor of patients with different causes of retinopathy.MethodsNinety patients with retinopathy were enrolled in our hospital from 2015.1 to 2015.12.According to their etiology,32 retinopathy patients (group A),27 patients with simple retinopathy (group B) (Group C),30 senile cataract patients were selected as the control group.All the patients were monocular.The levels of VEGF in the serum and aqueous humor of the four groups were measured by ELISA.IL-6 levels were measured and analyzed the difference.ResultsThe results of VEGF and IL-6 showed that the expression of VEGF and IL-6 in the serum and in the ocular aqueous humor was significantly higher than that in the control group(P<0.05),and the difference was statistically significant (P<0.05).And in all groups,the expression of VEGF and IL-6 in the serum was significantly lower than that in the aqueous humor (P<0.05).From the correlation analysis,the levels of A,B,The expression levels of VEGF and IL-6 in the sera of three groups were positively correlated with the expression levels in the aqueous humor.ConclusionThe expression of VEGF and IL-6 in diabetic retinopathy may be related to the development of diabetic retinopathy.The expression of VEGF and IL-6 in serum and ocular aqueous humor has a significant difference consistency.

Retinopathy;Diabetes mellitus;Degree of lesion;Vascular endothelial growth factor;Interleukin-6

1007-4287(2017)12-2119-04

R587.1

A

嚴鳴光,男，36歲，碩士，主管技師，檢驗醫師，主要研究方向：自身免疫和感染免疫。

2016-12-11)