多肉植物玉露的組培快繁技術研究

[摘 要] 為了提高多肉植物玉露的繁殖效率，滿足多肉植物玉露產業快速發展的需求，以多肉植物草玉露葉片為試驗材料進行組織培養與快速繁殖的研究。結果表明：玉露不定芽誘導培養的最佳培養基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽分化率最高（達到95%）；不定芽增殖培養的最佳培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽增殖分化率最高（達到380%）；生根誘導效果最佳的培養基是1/2MS+IBA 2 mg/L，生根率最高，達到95%以上。

[關鍵詞] 玉露；組織培養；快速繁殖

[中圖分類號] S682.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-7909（2017）24-56-2

植物組織培養也稱離體培養，是指將植物體各部分組織，如葉肉組織、胚乳、薄壁組織等進行培養，從而獲得再生植株；也指在培養過程中從各組織上得到愈傷組織，愈傷組織經過再分化形成再生的完整植株。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

草玉露作為原材料，以草玉露幼嫩的葉片為外植體進行誘導分化不定芽試驗，以2 cm左右的組培苗進行生根試驗。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體的取得和滅菌處理。用剪刀剪取草玉露幼嫩的葉片作為外植體，放入燒杯中，再將其放在水龍頭下流水沖洗30 min，然后在洗衣粉水中浸泡7～10 min，最后用自來水沖洗干凈。在無菌室內的超凈工作臺上，外植體先用75%酒精進行表面消毒2～5 s，再用無菌水沖洗一兩次，然后放入2%次氯酸鈉溶液中消毒5～10 min，再用無菌水漂洗兩三次，用無菌濾紙吸干表面水分。將滅菌后的葉片切成0.5 cm切段，分別接種于預先滅菌的培養基上。為了減少出現雜菌，要在火焰旁進行接種。

1.2.2 培養基及培養條件。以MS培養基作為基本培養基，外加蔗糖30 g/L、瓊脂6 g/L，再根據試驗要求加入不同量的植物激素制成試驗所需的培養基，調節pH值到5.8。

培養溫度為（25±2） ℃，恒溫，培養光照為2 000 Lx，每天光照時間不少于10 h。叢生芽的快速增殖和生根培養條件與此相同。

1.2.3 誘導分化培養基的篩選。本試驗以MS培養基為基本培養基，培養基配方根據兩個因素兩個水平正交試驗進行設計：其中，A因子為6-BA，設1.5、3.0、4.5 mg/L 3個水平，B因子為NAA，設0.0、0.1、0.2 mg/L 3個水平。將切好的玉露外植體接種到培養基中，每瓶接種4個外植體，每個處理接種10瓶。接種后按照上述培養條件進行培養，30 d后進行統計。根據葉片外植體上再生出的不定芽數量及生長狀況，經過比對，得出最適分化培養基配方。

2 結果與分析

2.1 不同激素濃度配比對芽誘導分化的影響

本試驗探討了6-BA與NAA的不同濃度配比對玉露不定芽分化的影響。結果表明（見表1）：當6-BA的濃度不變時，隨著NAA濃度的增加，不定芽增殖率大體趨勢是增加的；當NAA的濃度不變時，隨著6-BA濃度的增加，不定芽增殖率大體趨勢是增加的，但也有一定的濃度范圍。部分培養基出現了污染的情況，外植體在該培養基上萌芽較快，不定芽分化率最高（達到95%），每個外植體誘導出的單芽數最多為12.2，單芽形態粗壯且正常。經過10 d左右的培養，玉露葉片外植體明顯增厚變大，部分切口還出現了綠色的愈傷組織，但也有部分外植體愈傷組織不明顯，30 d左右會從外植體邊緣分化，形成不定芽。不定芽誘導培養的最佳培養基配方為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L，pH=5.8。

2.2 不同激素濃度配比對芽增殖的影響

不定芽增殖不同處理的培養結果如表2所示。結果表明：當6-BA的濃度不變時，隨著NAA濃度的增加，不定芽增殖率大體趨勢是增加的；當NAA的濃度不變時，隨著6-BA濃度的增加，不定芽增殖率大體趨勢是增加的，但也有一定的濃度范圍。培養30 d后，在不定芽的基部可繼續分化并形成8～10個單芽，這樣每個外植體的不定芽都得到了大量增殖，不定芽增殖培養的最優培養基配方為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L，pH=5.8，不定芽在該培養基上增殖分化率最高（達到380%），每個外植體誘導增殖出的不定芽平均數達到11.5個，不定芽的平均長度達到1.1 cm，單芽生長狀況最好，不定芽粗壯，部分芽也可長成小苗。

2.3 不同IBA濃度對芽生根的影響

本試驗將長至2 cm以上的無根試管苗，轉接到生根培養基中。以不加激素的1/2MS培養基為參照，對比添加不同濃度的IBA后，統計不定芽的生根率，得出最優配比。由表3可以得出，在未加激素的1/2MS培養基中，不定芽也會分化出根，但生根率較低，僅為23.3%，每個芽上誘導出的根數很少，平均只有1條，根長平均1.81 cm。加入一定濃度的IBA可以促進于玉露不定芽分化形成根，以1/2MS+IBA 2 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂6 g/L（pH=5.8）的生根培養基效果最佳，此條件下玉露每個芽上誘導出的平均根數為4條，根長平均3.64 cm，試管苗的生根率高，達到95%以上。

3 結論

本研究結果表明：草玉露不定芽誘導培養的最佳培養基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽分化率最高，達到95%；不定芽增殖培養的最佳培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L，不定芽增殖分化率最高，達到380%；試管苗的生根培養試驗，生根效果最佳的培養基是1/2MS+2 mg/L IBA，生根率最高，達到95%以上。