氨基酸自動分析儀測定鹿皮膏中氨基酸的種類

【摘 要】 中國是鹿產品應用開發最早并具有鹿產品消費市場的國家，鹿產品的種類非常多，如鹿茸、鹿血、鹿心等，對鹿皮膏性質功能的研究已具有悠久的歷史，鹿皮膏一般呈棕紅色，有著特有香氣，富含多種氨基酸，本文主要講述氨基酸自動分析儀以外標法測定鹿皮膏中氨基酸的種類。

【關鍵詞】 鹿皮膏 氨基酸 氨基酸分析儀

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2017.11.004

鹿皮膏是用梅花鹿或馬鹿的皮為主料熬制而成的。鹿皮無毒，治一切漏瘡、婦女白帶、血崩不止、腎虛滑精等病。鹿皮膠富含多種氨基酸與微量元素，具有升高白細胞的作用，能顯著地提高動物的免疫功能，并有滋陰潤燥、補血上血的功效。而鹿皮膏是在鹿皮膠基礎上經過進一步加工而成，與鹿皮膠具有同樣的功效。

氨基酸是羧酸碳原子上的氫原子被氨基取代后的化合物，氨基酸分子中含有氨基和羧基兩種官能團。與羥基酸類似，氨基酸可按照氨基連在碳鏈上的不同位置而分為α-，β-，γ-，w-氨基酸，但經蛋白質水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸，而且僅有二十幾種，他們是構成蛋白質的基本單位。

氨基酸是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有堿性氨基和酸性羧基的有機化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質的氨基酸大部分為α-氨基酸。

氨基酸在人體內通過代謝可以發揮下列一些作用：①合成組織蛋白質；②變成酸、激素、抗體、肌酸等含氨物質；③轉變為碳水化合物和脂肪；④氧化成二氧化碳和水及尿素，產生能量。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

6mol/L鹽酸：濃鹽酸與水1+1。混合50nmol/50μL混合氨基酸標準液（biochrom公司自帶）。

緩沖液（biochrom公司自帶）：

緩沖液1：pH3.2檸檬酸鈉；緩沖液2：pH4.54磷酸鹽；緩沖液3：水；緩沖液4：水；緩沖液5：pH6.45檸檬酸鈉；緩沖液6：NaOH；緩沖液：pH2.2檸檬酸鈉；茚三酮緩沖液（biochrom公司自帶）。

流動相：異丙醇+水1：1；流動相：水。

高純氮氣：純度99.99%。

1.2 儀器與設備

SHD—Ⅲ型循環水式多用真空泵、水解管35mL（SYNTHWARE GLASS）、668—真空干燥器、氮吹儀HSC-12B（天津恒奧）、biochrom氨基酸自動分析儀。

1.3 儀器參數

氨基酸自動分析儀條件：

Buffer1—pH3.2；Buffer2—pH4.54；Buffer3—水；

Buffer4—水；Buffer5—pH6.45；Buffer6—NaOH；

陽離子交換樹脂：柱溫：135℃，色譜柱：2.6×150mm。

茚三酮流速—Nin：25.0ml/h；緩沖液流速—Pump：35.0ml/h。

柱壓：緩沖液150bar；茚三酮30bar；反應圈15bar。

進樣量：20μL。

1.4 標準溶液的配制

準確吸取0.200mL混合氨基酸標準溶液，用pH2.2的緩沖液稀釋到5mL，此標準稀釋液濃度為5.00nmol/50μL。

1.5 樣品處理

稱取0.0500g樣品，于35mL水解管內，加入6mol/L鹽酸8mL，置于110℃烘箱中水解22h，冷卻后打開水解管，將水解液過濾到25mL容量瓶內，并用去離子水沖洗試管過濾合并定容。取1mL于5mL容量瓶內，用真空干燥器在50℃干燥，殘留物用1mL水復溶，在干燥，反復2次，氮吹吹干，加1mL pH2.2緩沖溶液溶解，上機。

2 結果與分析

詳見下圖。

3 結論

綜上所述，氨基酸自動分析儀測定鹿皮膏中含有16種氨基酸分別為：天冬氨酸（Asp）、蘇氨酸（Thr）、絲氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、胱氨酸（Cys）、纈氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）異亮氨酸（Iso）、亮氨酸（Leu）、酪氨酸（Tyr）、苯丙氨酸（Phe）、組氨酸（His）、賴氨酸（Lys）、脯氨酸（Pro）。因無標準品而未測含量。

參考文獻

[1] 張瀟予，徐厚平，劉代成.鹿皮膠的成分分析[J].山東師范大學學報（自然科學版），2010，（25）4.

[2] GB 5009.124-2016 食品安全國家標準 食品中氨基酸的測定[S].

作者簡介

侯婷婷，工程師，現就職于撫順市產品質量監督檢驗所，從事化學與食品檢測。