關于中藥檢測中頂空氣相色譜法的應用

田壯

摘 要：在藥物的檢測方法中，特別是對于那些含有效芳香成分作為質量評價標準的中藥，較為快捷的分析方法是頂空氣相色譜法。本文應用色譜及儀器條件，進行中藥檢測中頂空氣相色譜法的研究。提出了頂空氣相色譜法在中藥研究中的應用，包括頂空氣相色譜法在藥物溶劑殘留分析中的應用與在中藥芳香物質分析中的應用。

關鍵詞：中藥檢測；頂空氣相色譜法；應用

前言

頂空氣相色譜法是一種局限空間內的樣品是在系統達到平衡狀態時，蒸汽揮發性成分的氣相色譜分析技術，通過氣體在樣品成分的氣相色譜分析，以確定在原始樣品中這些成分的含量。這種方法主要用于氣體采樣，當色譜分析在使用該方法時可以具體收集樣品中的揮發性組分，可以有效地避免溶劑中揮發物的去除，而且還減少了提取引起的噪聲問題。該技術廣泛應用于世界各個領域。

1.頂空氣相色譜法的工作原理

頂空氣相色譜法主要有三種分析方式，主要是靜態頂空分析方法、動態頂空分析方法和頂空固相微萃取法。

1.1靜態頂空分析方法

這種方式主要是將適量的樣品封閉在容器中，在一定的溫度下放置一段時間后使樣品的氣體和液體達到平衡，這個時候，取這個封閉容器上方的空氣進行分析，就可以分析出容器下方的液體或者固體的成分。但是，這種分析法主要分析沸點在200℃以下的組分，并且較容易揮發的樣品使用這種方式更合適。而對于那些不容易揮發的物質，則需要首先進行化學衍生化的處理。

1.2動態頂空分析方法

靜態頂空分析方法需要在密閉且一定溫度下，氣液達到一定的平衡狀態才能進行，而動態頂空分析的方法則不需要達到平衡狀態，而是在還未達到平衡狀態的時候就多次取樣，直到樣品的揮發物全部萃取出為止。

1.3頂空固相微萃取法

固相微萃取法是利用待測物對活性固體表面有一定的吸附親和力而達到分離富集的目的，這種方式是將萃取的纖維頭放置在待測樣品上空，將分析物萃取出。在氣化室中，由于溫度的上升，分析物對于纖維的親和力下降，分析物被分離出，而它們所處的較小的體積可以保證分析物可以快速地轉入色譜柱。

2.資料與方法

2.1色譜及儀器條件

色譜柱：HP—PLOT/Q毛細管柱（柱長30m，內徑0.32mm，涂層厚度20i.Lm；氣相色譜參數：程序升溫（初始溫度50℃，1rain的保持度，結合10°C每分提升到150°C，也要保持5min左右），氮載氣，載氣流速1.5mL/min，分流注射（1∶1），入口溫度為220°C左右。

2.2溶液制備與測定

二氧化硫的標準溶液被吸收，水被制成10、20，30、50和100料斗G的溶液，該溶液作為控制溶液被搖勻。對照溶液1mL，這是接近樣品中的二氧化硫殘留量、準確地吸收。在20mL頂空瓶，0.5mol/L氫氧化鈉溶液5mL時迅速而準確地密封。將頂空進樣器放入頂部空氣樣品中，取適量2g的微粉（如果實驗的質量是軟的，可以適當地減少）。在20mL頂空瓶中，在0.2mol/L的鹽酸溶液中快速而準確地加入6mL，密封，在沸水浴中30rain加熱，放入頂空頂空進樣器。

2.3方法考察

專屬性試驗：中藥湯劑，而用硫磺熏蒸，作為陰性對照品，按照試驗方法進行操作，記錄色譜圖。結果表明，在陰性對照溶液的色譜圖中沒有發現色譜峰，沒有雜質峰干擾樣品的測定。

2.4線性關系考察

采用一系列控制方案，采用頂空氣采樣法記錄峰值面積的積分值。以二氧化硫濃度（g/mL）為水平坐標，峰面積積分值為縱坐標繪制標準曲線。計算得回歸方程為Y=2.301+2.229，X=0.9991（n=5）。結果表明，二氧化硫質量濃度在lO～100kg/mL范圍內與峰面積積分值呈較好的線性關系。

3.結果

二氧化硫平均殘留量為0.027mg/g，RSD=2.1%（n=6）。加樣回收試驗：從已知殘留6例，20mL頂空瓶中，分別快速添加二氧化硫標準溶液（參照GB/t15262-94，校準后，用亞硫酸鈉碘量法編制的0.050g/L的濃度）和1mL0.2mol/L5mL鹽酸溶液，煮沸30min水浴密封和加熱，在頂空進樣器，頂空進樣測定，依照測定。結果見表1。

4.頂空氣相色譜法在中藥研究中的應用

4.1頂空氣相色譜法在藥物溶劑殘留分析中的應用

采用氣相色譜法對白樂眠膠囊中苯、甲苯、二甲苯、正己烷、苯乙烯和一二乙苯的殘留量進行檢測，氣相色譜條件為：色譜柱HP-5，載氣為高純氮，蒸發室溫度為200。柱初始溫度60，恒溫5min，以30min的速率升至90，恒溫3.5min；由30min的速率，它上升到140，恒溫4min，最后上升到190在30min內，穩定在恒定的溫度3min。檢測器是FID，溫度為220。

4.2頂空氣相色譜在中藥芳香物質分析中的應用

頂空氣相色譜法進行頂空氣體成分對芳香類中藥的分析RadixCynanchipaniculati和芳香類中藥具有方便、快捷的優點，準確和具體的方法表明，在芳香藥材的質量鑒定和質量控制，尤其適用于以含有效芳香成分多少作為質量評價標準的中藥。魏寧漪等利用GC—MS和頂空進樣、固相微萃取進樣結合的技術，對麝香中的摻偽物質進行鑒別。對其中摻加的苯甲酸、苯酚、樟腦、龍腦和一系列的烷烴用PDMS萃取頭采集后都可以檢測出來。

4.3頂空氣相色譜在測定中藥材成分含量中的應用

在中草藥成分測量中，采用頂空氣相色譜法也具有非常好的效果。其實驗操作簡單，準確性高，并且還具有專屬性強的特點。而中藥中的一些芳香類物質的測定中，更是具有非常準確和簡便的測量效果。在對中藥中的一些揮發油的成分檢測和對中藥質量控制中，頂空氣相色譜法更是得到了廣泛的應用，并且，在采用此法進行實驗的時候，由于溫度偏低，還能避免中藥中的一些組分由于溫度較高而分解的現象發生。

這種分析的方法應用在中藥的檢測中，特別是分析具有芳香類物質的檢測中，不但有快速簡單易于操作的特點，而且其準確性和專屬性都比較高。

結語

綜上所述，頂空氣相色譜（GC）可以消除樣品中難揮發物質的干擾，減少對毛細管柱的污染，可廣泛應用于大孔吸附樹脂殘留物和溶劑殘留等中藥安全檢查，保證人民用藥安全，同時也為中藥生產企業和檢驗單位的質量標準提供了理論依據和確定方法。

參考文獻：

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