半乳糖凝集素-3和盤狀結構域受體1在食管鱗癌組織中的表達及意義

劉玉含 閆 琛 康運凱 魏 攀 (鄭州人民醫院檢驗科，河南 鄭州 450003)

半乳糖凝集素-3和盤狀結構域受體1在食管鱗癌組織中的表達及意義

劉玉含 閆 琛1康運凱 魏 攀2(鄭州人民醫院檢驗科，河南 鄭州 450003)

目的探討半乳糖凝集素(Galectin)-3和盤狀結構域受體(DDR)1在食管鱗癌組織中的表達及意義。方法采用免疫組化SP法檢測67例食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1蛋白表達，并分析二者與食管鱗癌臨床病理特征的關系。結果正常食管組織中Galectin-3和DDR1蛋白表達率分別為13.43%(9/67)和16.42%(11/67)，食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1蛋白表達率分別為76.12%(51/67)和73.13%(49/67)，Galectin-3和DDR1在食管鱗癌組織中的表達均顯著高于正常食管組織(P<0.05)，二者表達呈正相關(r=0.486，P=0.001)。Galectin-3和 DDR1蛋白表達均與食管鱗癌的TNM分期，分化程度，浸潤深度和淋巴結轉移有關(P<0.05)。結論食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1蛋白呈高表達，與食管鱗癌的發生、發展及生物學行為密切相關。

食管鱗癌；半乳糖凝集素-3；盤狀細胞域受體1

半乳糖凝集素(Galectin)-3是一種腫瘤相關蛋白，可與層黏連蛋白發生結合，是一種重要的非整合素黏連蛋白受體，可能與多種惡性腫瘤的發生、發展及生物學行為相關〔1〕。盤狀結構域受體(DDR)1是一種膠原受體，在多種上皮來源的惡性腫瘤組織中呈高表達〔2〕。本文探討Galectin-3和DDR1蛋白在食管鱗癌組織中的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012～2013年鄭州人民醫院存檔的手術切除食管鱗癌標本共67例，術前均未接受放療、化療，男40例，女27例；年齡<60歲18例，≥60歲49例。取距病變組織5 cm以上的正常食管組織67例作為正常對照組。所有標本均經10%中性甲醛溶液固定過夜，次日取材、脫水、石蠟包埋，連續切片，行HE染色及免疫組化染色。

1.2主要試劑 鼠抗人Galectin-3單克隆抗體購自福州邁新生物技術有限公司，兔抗人DDR1抗體和羊抗兔抗IgG抗體購自美國Santa Cruz公司，免疫組化SP試劑盒和二氨基聯苯胺(DAB)顯色劑購自北京中杉生物試劑有限公司。

1.3方法 采用免疫組化法對Galectin-3和DDR1進行染色，操作步驟按照試劑說明書進行。用0.01 mmol/L的磷酸鹽緩沖液(PBS)(pH7.4)替代一抗作為陰性對照。以美國Santa Cruz公司提供的陽性切片作為陽性對照。Galectin-3主要表達于細胞質中，以胞質內出現棕黃色或褐色顆粒判讀為陽性細胞；DDR1主要表達于細胞膜上，以細胞膜上出現棕黃色或黃褐色顆粒判讀為陽性細胞。

1.4評價標準 組織切片中陽性細胞占細胞總數的百分比可分為4級：陽性細胞<10%計0分，10%～25%計1分，26%～50%計2分，>50%計3分。組織切片中細胞染色強度分為3級：未著色計0分，淡黃色計1分，棕褐色計2分。2項指標的結果相乘得到0分為(-)，≥1分為(+)。染色結果及評分由兩位經驗豐富的病理科醫生獨立操作進行。

1.5統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗，Spearman相關檢驗。

2 結 果

2.1Galectin-3和DDR1的表達 正常對照組和食管鱗癌組Galectin-3陽性率〔13.43%(9/67) vs 76.12%(51/67)〕及DDR1陽性率〔16.42%(11/67) vs 73.13%(49/67)〕差異顯著(均P<0.05)。

2.2Galectin-3和DDR1的陽性表達與食管鱗癌患者臨床病理特征的關系 見表1。Galectin-3、DDR蛋白陽性表達與食管鱗癌的TNM分期、分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移有關(P<0.05)。

2.3食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1蛋白表達的相關性分析 食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1的表達呈正相關(r=0.471，P<0.05)。

表1 食管鱗癌組織中Galectin-3和DDR1陽性表達與不同臨床病理特征的關系〔n(%)〕

3 討 論

Galectin-3基因定位于人染色體14q21-22區域上，是半乳凝素家族中唯一的一個具有嵌合型結構并可抑制細胞凋亡的半乳凝素蛋白〔3〕，Galectin-3編碼的蛋白質含有251個氨基酸殘基，由3個結構域組成〔4〕。 Galectin-3的功能具有多樣性，主要參與細胞的黏附、增殖及細胞外基質的構建，通過介導細胞與細胞之間、細胞與細胞外基質之間的黏附，促進腫瘤細胞的聚集及轉移，同時也可通過與配體相結合發揮生物學作用，參與各種腫瘤發生和轉移〔1〕。Galectin-3蛋白與腫瘤關系密切，在多種人類腫瘤中發現Galectin-3蛋白表達增高，如甲狀腺微小乳頭狀癌〔5〕，肝癌〔6〕，乳腺癌〔7〕等，Galectin-3的高表達也可能與一些腫瘤的化療耐藥和不良預后密切相關〔7〕。本文提示Galectin-3可能在食管鱗癌發病機制中起一定的作用，可能與食管鱗癌的預后相關，其可能是腫瘤分期、分級及判斷惡性表達的標志。DDR1基因定位于人染色體6p21區域，編碼的蛋白質含913個氨基酸，由胞外區、跨膜區和胞內激酶區3個區域構成〔8〕，是近年來新發現的一種受體型蛋白酪氨酸激酶，能與膠原特異性結合并被其激活，進而參與一系列的細胞內外信號轉導，促進機體細胞的黏附、遷移、分化和炎性因子的釋放〔9〕。已有研究表明DDR1蛋白在胃癌〔10〕、膽管細胞癌〔11〕和結腸癌〔12〕等惡性腫瘤在呈高表達。本文提示DDR1高表達對判斷食管鱗癌患者預后具有重要的參考價值，DDR1與食管鱗癌的侵襲轉移能力密切相關，有望成為食管鱗癌早期診斷和判斷預后的輔助指標。

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R735.1

A

1005-9202(2017)24-6120-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.24.050

河南省教育廳科學技術重點研究項目(No.14A320093)

1 鄭州人民醫院病理科 2 中國煙草總公司鄭州煙草研究院

魏 攀(1983-)，男，博士，工程師，主要從事分子生物學和基因芯片研究。

劉玉含(1983-)，女，碩士，主管檢驗師，主要從事檢驗醫學研究。

〔2016-09-24修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)