痛瀉安腸方對腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠NGF/PLC-γ/TRPV1信號通路表達的干預效應*

韓亞飛 石 磊 賈博宜 毛堂友 郭 一 王允亮 謝添弘 陳 晨 譚 祥 李軍祥 △

（1.北京中醫藥大學，北京 100029；2.北京中醫藥大學東方醫院，北京 100078）

腹瀉型腸易激綜合征（IBS-D）為功能性胃腸道疾病，以腹痛、腹瀉為主要臨床表現，但缺乏可解釋的病理改變。目前，IBS-D的發病機制尚不明確，研究證實內臟敏感性增加是IBS-D發病的關鍵因素［1-2］。神經生長因子（NGF）作為重要的參與痛覺過敏的物質，介導的NGF/激活磷脂酶C-γ （PLC-γ）/瞬時受體電位香草酸亞型-1（TRPV1）信號通路在IBS-D的發病中發揮著重要作用。因此，本研究以NGF/PLC-γ/TRPV1信號通路為切入點，探討痛瀉安腸方治療IBS-D內臟高敏感性的作用機制。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康雄性SD大鼠72只，SPF級，體質量（120±20） g，由斯貝福（北京）實驗動物科技有限公司提供，合格證號SCXK（京）2016-0002，飼養在北京中醫藥大學東方醫院動物中心，許可證編號SYXK（京）2014-0008。普通飼料適應性喂養1周。

1.2 試藥與儀器 痛瀉安腸方水煎劑（炒白術15 g，炮姜 9 g，炒白芍 12 g，烏梅 9 g，蜘蛛香 6 g，黃連 6 g，蟬蛻 6 g，0.5 g 生藥/mL），匹維溴銨片（得舒特），中藥飲片由北京中醫藥大學東方醫院中藥房提供，陽性藥物匹維溴銨由法國蘇威特制藥公司生產（批號H20070059）。乙酸（北京化學試劑公司，貨號CAS64-19-7）；液體石蠟 （北京化學試劑公司）；MEDEX中心靜脈導管 （單腔）（美國）；BARD-FOLEY雙腔兒科導尿管 （美國）；TRNzol總RNA提取試劑（天根生化科技有限公司，貨號DP405-02）；消除gDNA反轉錄試劑盒 （寶生物公司，貨號RR047B）、Perfect Real time染料法實時熒光定量試劑盒（寶生物公司，貨號RR82LR）、DL2000 DNA Marker（寶生物公司，貨號 3427Q）；RIPA 總蛋白提取試劑盒（Sigma公司，貨號Cat No.R0278）、苯甲基磺酰氟（Sigma公司，貨號 Cat No.PMSF-RO）、BCA 蛋白定量試劑盒（Sigma公司，貨號Cat.No.BCA1）；……