丹紅注射液激活A(yù)MPK保護心肌缺血再灌注損傷模型大鼠的實驗研究*

田 心 王淵博

（1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院，陜西 西安 710003；2.沈陽軍區(qū)總醫(yī)院，遼寧 沈陽 110015；3.第四軍醫(yī)大學(xué)，陜西 西安 710032）

腺苷酸活化的蛋白激酶（AMPK）是調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝的重要分子［1］，當(dāng)細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)時，胞內(nèi)的AMP不斷堆積，由此激活A(yù)MPK。AMPK通過增加在胞內(nèi)的葡萄糖轉(zhuǎn)運以及糖酵解，維持ATP濃度，而使細(xì)胞生存。丹紅注射液在臨床治療缺血性心臟病多年，療效良好。本實驗旨在闡明丹紅注射液保護心肌的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SD雄性大鼠由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。36只，體質(zhì)量200～250 g，SPF級飼養(yǎng)條件，標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，動物合格證號：SCXK（軍）字第2007-007號。

1.2 試藥與儀器

丹紅注射液購自陜西步長制藥有限公司 （國藥準(zhǔn)字：Z20026866，規(guī)格：10mL/支，批號：15041024）。兔抗p-AMPKα、AMPKα抗體購自美國abcam公司；肌鈣蛋白 T（TnT）、乳酸脫氫酶（LDH）的 ELISA 試劑盒購自AMEKO公司；酶標(biāo)儀為美國Molecular Devises公司產(chǎn)品；倒置顯微鏡為日本Nikon公司產(chǎn)品；透射電鏡為日本JEOL公司產(chǎn)品；電泳系統(tǒng)及凝膠成像系統(tǒng)均為Bio Rad公司產(chǎn)品。

1.3 造模方法

用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠（1.5mL/kg），氣管插管，微型動物呼吸機給予正壓機械通氣，常規(guī)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖記錄心電活動，分離左側(cè)頸靜脈，經(jīng)左側(cè)頸靜脈插管，建立給藥途徑；于大鼠胸骨左緣第4～5肋間開胸，暴露心臟，撕開心包膜，在左心耳下緣處穿線（6/0絲線），以備結(jié)扎冠狀動脈左前降支（LAD），用直徑約0.2 cm細(xì)塑料管穿過結(jié)扎線，以心電圖ST段明顯抬高、缺血數(shù)分鐘后出現(xiàn)明顯的心律失常作為心肌缺血標(biāo)志。缺血30min，再灌注2 h。

1.4 分組與給藥［2］

將36只實驗大鼠隨機分為對照組、對照加丹紅組、缺血/再灌注組、缺血/再灌注加丹紅組。……