孕期無創性產前胎兒染色體非整倍體基因檢測技術在臨床的應用價值

陳艷

（蘇州市吳中人民醫院婦產科 江蘇 蘇州 215128）

染色體疾病是各種原因所致染色體數目和（或）結構異常的統稱，是一類嚴重的遺傳病，可累及多器官系統形態及功能異常，造成胚胎死亡或出生后發育遲緩、智力低下、多發畸形等問題，影響人口質量[1]。目前，臨床尚無染色體疾病有效治療方法，因此產前診斷本病以預防出生缺陷成為臨床防治關鍵。無創染色體非整倍體基因檢測是近年國內外廣泛使用及推廣的胎兒染色體疾病診斷技術[2]，它通過孕婦靜脈血為樣本得到胎兒遺傳信息，對胎兒安全無創。文章現以我院近年收治孕婦為例，分析探討無創染色體非整倍體基因檢測的臨床應用價值，具體報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

以2016年1月—2017年12月于我院行產前檢查的311例孕婦為研究對象。納入標準：（1）單胎妊娠；（2）孕中期；（3）知曉本研究目的并自愿配合研究。排除標準：（1）孕婦自身染色體異常；（2）近期異體輸血；（3）既往干細胞治療史；（4）臨床資料不全。入選孕婦年齡18～45歲，平均（29.3±8.7）歲；孕周13～24周，平均（18.2±5.1）周

1.2 方法

全部孕婦均于抽取外周靜脈血液樣本5ml置于抗凝采血管中，常規送檢實驗室。實驗室內，樣本于上機離心10min（速率2000r/min，半徑12cm，溫度4℃），取血漿置于微型離心管中，靜置一段時間后繼續上機離心10min（參數同上），去除細胞及殘留碎片，取無細胞的血漿置于-80℃冰箱保存，然后以高通量測序儀檢測血漿DNA，測定染色體核酸片段數量，生物信息學分析各染色體對應覆蓋深度值并轉化為風險指數，以此為據判斷胎兒染色體情況。檢測結果示正常的孕婦予以隨訪，胎兒娩出及3個月后常規檢查；異常者超聲定位經腹羊膜腔穿刺，抽取適量羊水，常規細胞培養G顯帶，參照ISCN2009相關標準進行計數及核型分析，確診染色體疾病者予以引產。以羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析結果為金標準，評價無創染色體非整倍體基因檢測診斷染色體疾病的準確率。

1.4 統計學方法

以SPSS17.0軟件統計分析，計量資料±標準差表示，t檢驗，計數資料以率（%）表示，χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

311例孕婦無創產前胎兒染色體非整倍體基因檢測結果示，308例染色體數目正常，3例染色體數目異常，包括21-三體綜合征2例、18-三體綜合征1例，異常檢出率0.96%。無創基因檢測示正常孕婦隨訪至分娩，常規檢查未見新生兒染色體疾病，異常患者復行羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析，診斷結果均與無創產前胎兒染色體非整倍體基因檢測結果一致，以此為金標準，無創染色體非整倍體基因檢測診斷染色體疾病準確率100%。

3.討論

染色體非整倍體指染色體中缺少或額外增加一條或多條染色體，主要包括13三體綜合征（Patau綜合征）、18三體綜合征（愛德華氏綜合征）、21-三體綜合征（唐氏綜合征）等，其中以21-三體綜合征最為常見，由生殖細胞減數分裂過程中胎兒遺傳獲得三條21號染色體所致，流行病學統計發生率約占出生嬰兒的1.5‰，實際水平更高。染色體非整倍體屬基因失衡范疇，發病與多因遺傳、孕婦年齡、環境因素等有關，是導致胚胎停育、流產、胎兒缺陷的主要原因之一，也是小兒先天性發育異常的重要影響因素，因此，早期確診此類疾病并適時引產是減少缺陷兒出生、保證母體安全、提高人口質量的關鍵。

既往，臨床診斷此類疾病主要采用血清學聯合超聲診斷檢查的方法，前者假陽性率高，檢出率低，特異性較差，后者存在診斷延遲問題，介入性穿刺取羊水、臍血進行細胞培養雖診斷敏感，準確性高，但對胎兒有創，重復性較差，臨床推廣受限。近年，臨床研究發現母體血漿中含有胎兒游離的脫氧核糖核酸（DNA），胎兒染色體異常會造成母體外周血漿游離DNA含量及片段結構的微量變化，為無創產前胎兒染色體非整倍體基因檢測奠定了基礎[3]。該項檢測技術僅需取孕婦少量外周靜脈血，利用新一代DNA測序技術對染色體進行生物信息分析，可獲得胎兒遺傳信息，從而為臨床判斷胎兒染色體非整倍體疾病提供基因學依據。本次臨床研究中，3例無創產前胎兒染色體非整倍體基因檢測異常，復行羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析得到確診，符合率100%，與文獻報道結果一致[4]，其應用對胎兒安全無創，可重復性好，適用于產前廣譜篩查，但值得注意的，其檢測結果受母源性等因素影響可能出現假陰性和假陽性的可能[5]，因此仍需加強對母嬰隨訪并以胎兒染色體核型分析結果為金標準，以確保診斷準確性，更好為臨床干預提供依據參考。

綜上所述，產前基因檢測對胎兒染色體非整倍體疾病具有良好的診斷價值，簡單易行、安全無創，是減少新生兒出生缺陷的有效產前篩查手段，對提高人口質量具有積極作用，值得臨床推廣。