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沙門氏菌檢驗中不同培養基的檢出效果

2018-01-16 13:49:47周兆華王志杰楊一帆江蘇省常熟市疾病預防控制中心微生物檢驗科江蘇常熟215500
轉化醫學電子雜志 2018年10期

周兆華,王志杰,楊一帆 (江蘇省常熟市疾病預防控制中心微生物檢驗科,江蘇常熟215500)

0 引言

沙門氏菌屬于腸桿菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。除可感染人外還可感染很多動物,屬于人畜共患疾病之一[1]。本研究探討了在沙門氏菌的檢驗中采用不同的培養基進行檢驗的檢出效果,并將結果進行了有效的分析,現報道如下。

1 材料和方法

1.1 樣品來源選擇2018年1至7月市面上進行售賣的豬肉/羊肉進行隨機購買,共計167份,在市場中進行正常采購的同時,也隨機選取部分被污染的豬肉/羊肉,將其一同作為研究對象送于實驗室內。

1.2 培養基SS培養基,基礎培養基為牛肉膏5 g/L,脙胨 5 g/L,三號膽鹽 3.5 g/L,瓊脂 17 g/L,乳糖10 g/L,檸檬酸鈉 8.5 g/L,硫代硫酸鈉 8.5 g/L,10%檸檬酸鐵溶液10 mL,1%中性紅溶液2.5 mL,0.1%煌綠溶液0.33 mL。將其溶入1000 mL蒸餾水中,并進行均勻加熱攪拌,校正pH為7.0,制好后備用。

HE 培養基為牛肉膏 3 g/L,乳糖 12 g/L,蔗糖12 g/L,水楊素 2 g/L,膽鹽 20 g/L,氯化鈉 5 g/L,瓊脂 15 g/L,溴麝香草酚蘭 0.064 g/L,酸性復紅0.1 g/L,硫代硫酸鈉 6.8 g/L,檸檬酸鐵鈉 0.8 g/L,去氧膽酸鈉2 g/L。將其溶入1000 mL蒸餾水中,進行均勻加熱攪拌,制好后備用。

XLD 培養液為牛肉膏 3 g/L,L-賴氨酸 5 g/L,乳糖 7.5 g/L,蔗糖7.5 g/L,木糖 3.75 g/L,氯化鈉5 g/L,硫代硫酸鈉 6.8 g/L,檸檬酸鐵銨 0.8 g/L,去氧膽酸鈉2.5 g/L,苯酚紅 0.08 g/L,瓊脂 15 g/L。 將其溶入1000 mL蒸餾水中,進行均勻加熱攪拌,制好后備用[2]。

1.3 方法無菌操作稱取25 g(mL)樣品置于盛有225 mL BPW的無菌均質袋中,用拍打式均質器拍打 1~2 min于(36±1)℃培養 8~18 h。 輕輕搖動培養過的樣品混合物,移取1 mL轉種于10 mL TTB內,于(42±1)℃培養18~24 h。 同時另取 1 mL轉種于10 mL SC 內,于(36±1)℃培養 18~24 h。 分別用直徑3 mm的接種環取增菌液1環,劃線接種于SS、HE、XLD三種不同的培養基上,于(36±1)℃分別培養 40 h~48 h[]或 18~24 h,觀察各個平板上生長的菌落[3]。

1.4 觀察指標沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征分別為:SS瓊脂菌落為黑色有光澤、棕褐色或灰色,菌落周圍培養基可呈黑色或棕色,有些菌株形成灰綠色的菌落,周圍培養基不變;HE瓊脂菌落為藍綠色或藍色,多數菌落中心黑色或幾乎全黑色,有些菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色;XLD瓊脂菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現大的帶光澤的黑色中心,或呈現全部黑色的菌落,有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。如發現可疑菌落則利用沙門氏菌生化鑒定或者MID細菌鑒定系統進行鑒定[4]。

2 結果

對167份樣品進行MID細菌鑒定系統檢驗,陽性檢出率為28.74%,48例,并以此作為金標準進行對比。樣品在3種不同培養基上的假陽性情況分別為SS培養基5.99%(10例),HE培養基9.58%(16例),XLD培養基10.78%(18例)。3種培養基在假陽性檢驗方面差異明顯。在檢出率結果中,SS培養基的檢出率為25.75%(43例),HE培養基的檢出率為19.76%(33例),XLD培養基的檢出率為17.37%(29例)。檢出率結果進行對比,SS培養基的檢出率明顯高于HE培養基與XLD培養基,HE培養基與XLD培養基經過對比,差異并不明顯。其中,SS培養基的敏感性為89.58%,特異性為87.5%,HE培養基的敏感性為82.16%,特異性為81.11%,XLD培養基的敏感性為79.85%,特異性81.45%。SS培養基敏感性與特異性均高于HE培養基與XLD培養基。

3 討論

沙門氏菌的檢驗較常采用的培養基為SS培養基、HE培養基以及XLD培養基[5]。這3種培養基在進行檢驗培養時均有不同的優缺點,在沙門氏菌的實際檢驗中,仍然存在一定的誤差,并不能十分有效并且準確地檢出食物樣本中的沙門氏菌[6]。在本次檢驗中,SS、HE以及XLD 3種培養基對豬肉樣本進行培養時,培養結果也有所不同。在3種培養基中,SS培養基的沙門氏菌檢出率明顯較高,其余兩種培養基的檢出率較差。SS培養基在進行沙門氏菌檢驗時,擁有強選擇性,這就使SS培養基在進行沙門氏菌檢驗時可以非常準確地檢驗出食物樣本中包含的沙門氏菌,也可以與其余兩種培養基共同使用來確保沙門氏菌的檢出效果[7]。隨著沙門氏菌檢測方法不斷研究,更多新方法如科馬嘉顯色培養基均得到臨床應用,并且可以較好地提高臨床檢出率,擁有更多優點[8]。

綜上所述,沙門氏菌在不同的培養基中,有不同的檢出率,SS培養基的檢出率明顯高于HE培養基與XLD培養基,可以有效提高食品中沙門氏菌的檢出率。

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