段元山 曲藝琳 陳貝 楊楷(通訊作者)
(湖北省中西醫結合醫院 湖北 武漢 430000)
肺炎鏈球菌是社區獲得性肺炎主要病原體,在老年患者和幼兒患者中致病率較高[1]。準確、及時地鑒定社區獲得性肺炎的病原體,可以盡早采取治療措施,降低病死率。目前,肺炎鏈球菌感染的診斷主要通過細菌分離培養和鑒定實現,該方法陽性率較低[2]。肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA具有免疫活性,可以刺激機體產生相應的抗體,而且其基因序列在不同血型間具有高度保守性,因而有可能成為血清學診斷指標。本次研究通過以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原,并檢測其抗體在健康人和社區獲得性肺炎患者外周血中水平,分析其在社區獲得性肺炎的血清學診斷中意義,現將結果報告如下。
肺炎鏈球菌(ATCC49619)由衛生部臨床檢驗中心提供。
健康組(對照組)30例,其中男14例,女16例,平均年齡49.3歲,為健康體檢者,其中痰培養肺炎鏈球菌陽性9例。社區獲得性肺炎患者組(研究組)30例,其中男15例,女15例,平均年齡48.8歲,選自我院2016~2017年呼吸內科住院患者,診斷依據為《社區獲得性肺炎診斷和治療指南》[3],其中痰培養肺炎鏈球菌陽性8例。兩組在年齡、性別之間無顯著性差異(P>0.05),具有可比性。
采用ELISA方法檢測血清抗體:將純化的rLytA蛋白用包被液稀釋到50μg/ml,并以50μL/孔加入酶標儀中,在4℃下過夜;分別加入對照組和研究組待測血清樣本50μL/孔;加入HRP-兔抗人IgM抗體;用四甲基聯苯胺顯色;測定OD450nm值,比較各組差異;以研究組OD450nm值與對照組OD450nm值之比大于2.1為陽性。
所有數據采用SPSS19.0軟件進行分析,計數數據采用χ2檢驗,P<0.05為具有統計學意義。
采用ELISA方法檢測結果顯示,研究組IgM類抗LytA抗體陽性例數為9例,陽性率為30.0%,對照組均為陰性,研究組敏感度明顯高于對照組,結果具有顯著性差異(P<0.05)。研究組中痰培養陽性有8例,陽性率為22.2%,與IgM類抗LytA抗體檢測陽性率30.0%相比,兩者無顯著性差異(P>0.05)。對照組痰培養陽性有9例,陽性率為30.0%,檢測研究組患者rLytA類抗體特異度為100%,痰培養為70%,兩者具有顯著性差異(P<0.05)。陽性預測值為100%,IgM類抗LytA抗體的陽性結果具有確切診斷意義,該方法可以用于社區獲得性肺炎的早期檢測、診斷。
社區獲得性肺炎是一種臨床常見感染類疾病,具有病死率高的特點,肺炎鏈球菌是其主要病原體,而肺炎鏈球菌的青霉素耐藥率高,呈多藥耐藥性[4]。因而,早期快速診斷疾病可以進行更加針對性用藥,減少細菌耐藥率。本研究通過以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原,并檢測其抗體在健康人和社區獲得性肺炎患者外周血中水平,探究其在社區獲得性肺炎的血清學診斷中意義。
本次研究結果表明,測得血清學診斷的敏感度、特異度分別為30.0%和100.0%,痰培養的敏感度和特異度分別為22.2%和70.0%。血清學診斷的敏感度與痰培養相比差異無統計學意義(P>0.05),但特異度顯著高于常規痰培養結果(P<0.05)。陽性預測值為100%,IgM類抗LytA抗體的陽性結果具有確切診斷意義,該方法可以用于社區獲得性肺炎的早期檢測、診斷。此外,血清學檢測方法相比較常規痰培養方法,還具有快速、客觀以及不受使用抗生素影響等優點。
綜上所述,以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原,采用ELISA反應模式,檢測IgM類LytA抗體,為早期診斷、檢測鏈球菌感染性肺炎成為可能,值得臨床推廣。