九個樣品黃芩苷測定的探討

孫榮飛 趙曉星 張金璽 陳睿彥 趙澤娟 賽金旭

（昭通市食品藥品檢驗所 云南 昭通 657000）

銀黃顆粒等九種制劑，為常用藥，收載于中國藥典及國家藥品標準中[1-2]，肺力咳合劑、清開靈注射液為處方藥外，其余均為非處方藥。黃芩苷為方中的主要成分之一，有抗癌、抗菌、抗病毒、解熱、降壓、鎮靜等多種藥效[3]，各標準項下，均用高效液相測定其含量，作為質量指標之一，其中一些品種，在進行含量測定時，出現供試品溶液放置一定時間后，所測得含量有不同程度的升高或降低，通過查找資料，暫未有報道，本文便從樣品制備、方法學驗證、數據分析方面作考察。

1.儀器、試藥

1.1 儀器

LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津），MS105DU電子天平（梅特勒-托利多，上海公司），UC-7100S超聲波清洗器（美瑞泰克科技（天津）有限公司）。

1.2 試藥

黃芩苷對照品（批號：110715-201619）購于中國藥品生物制品檢定所，甲醇為色譜純，乙酸乙酯、磷酸、鹽酸均為分析純，水為純化水。九種制劑購自本地藥店，編號分別為1～9，便于書寫及表述，以下均以數字編號標示，詳細信息見表1。

2.方法與結果

2.1 色譜條件

2.1.1 1號樣品色譜條件：色譜柱為島津vp-ODS柱（4.6mm×250mm，5μm），DAD檢測器，流動相為甲醇-水-磷酸（50:50:0.2），檢測波長274nm，柱溫30℃，流速1.0mL/min。

2.1.2 2號樣品色譜條件：流動相為甲醇-水-冰醋酸（50:50:1），其他條件同2.1.1。

2.1.3 3號樣品色譜條件：流動相為甲醇-0.1%磷酸（40:60），檢測波長280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.4 4號樣品色譜條件：流動相為甲醇-0.2mol/L磷酸二氫鈉（40:60），檢測波長275nm，其他條件同2.1.1。

2.1.5 5號樣品色譜條件：流動相為甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），檢測波長315nm，其他條件同2.1.1。

2.1.6 6、7號樣品色譜條件：流動相為甲醇-磷酸鹽緩沖液（45:55），檢測波長280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.7 8號樣品色譜條件：流動相為甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），檢測波長280nm，其他條件同2.1.1。

2.1.8 9號樣品色譜條件：流動相為甲醇-水-冰醋酸（45:55:1），其他條件同2.1.1。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對照品溶液的配制 取黃芩苷對照品，用甲醇制成每 1mL 分別含 50μg、0.1mg、25μg、50μg、60μg、0.1mg、70μg、0.1mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的配制

2.2.2.1 1號供試品溶液的制備 取1號樣品，研細，分別精密稱取1.5g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補足重量，過濾，即得。

2.2.2.2 2號供試品溶液的制備 取2號樣品，研細，分別精密稱取1g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）20分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補足重量，過濾，即得。

2.2.2.3 3號供試品溶液的制備 取3號樣品，去除包衣，研細，分別精密稱取0.1g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）10分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補足重量，過濾，即得。

2.2.2.4 4號供試品溶液的制備 取4號樣品，研細，分別精密稱取0.75g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）10分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補足重量，過濾，即得。

2.2.2.5 5號供試品溶液的制備 取5號樣品，研細，分別精密稱取3g（n=6），置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50mL，超聲（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，依次放置0、1、2、4、8、24h，補足重量，過濾，即得。

3.討論

3.1 9 個樣品中黃芩苷的測定，7個為固體制劑，5個出現不同程度的溶出增加，1個無影響，1個含量在降低；2個液體制劑無影響。從提取溶劑、提取方式上看，有甲醇、70%甲醇、50%甲醇、水，均出現顯著變化。而2個液體制劑及1個含乳糖的固體制劑無顯著變化，其他固體制劑中均有蔗糖或糊精，所測定的9個樣品，黃芩苷在含蔗糖或糊精的固體制劑中的溶出與放置時間有明顯關聯。鑒于2、5號在24h內的結果變化在3%之內，屬于可接受范圍，在制法中加入過乙醇，與1、3、4號不同，是否還與制法有關，還需進一步研究。

3.2 甲醇及不同濃度甲醇從固體制劑中提取黃芩苷，出現溶出滯后，需放置一定時間，以及含蔗糖固體制劑水溶乙酸乙酯萃取，出現黃芩苷隨時間延長而下降的現象，以上是否具有普遍性，還有待進一步驗證，這種現象應引起檢驗檢測的重視，特別是監督檢驗。