淺析高效液相色譜在食品添加劑檢測中的應用

□ 馬滕霞 臨沂市食品藥品檢驗檢測中心

食品中的添加劑主要有甜味劑、防腐劑及色素等，這些添加劑如果過量攝入則會給人體造成很大的傷害。高效液相色譜技術可以對食品中添加劑進行全面分析。

1 食品中甜味劑的檢驗

食品檢測中，對于檢測食物中的甜味劑的含量采用高效液相色譜法，經常選用的色譜柱是C18柱和NH2柱等。如果在檢測甜味劑時，選擇的檢測方法用XDB-C18色譜柱，將乙酸胺緩沖液作為流動相，將酒水里存在的安賽蜜的含量檢驗出來，它的加樣回收率基本≧95.0%，相對偏差＜5.0%。根據顯示的結果來看，體現的安賽蜜最低檢出限是1.7～1.8 mg/kg[1]。當選擇次氯酸鈉在酸性條件下把食品中的甜蜜素變為氯基環乙烷，正乙烷萃取，流動相選擇乙腈-水和ODS-C18柱，在波長為314 nm處紫外進行測量，選擇測定方法為外標法，定量進行測量。這樣可以阻止對被測對象中復雜基質的干擾，更重要可以降低檢出限。其中固體的檢測對象，最低檢出限為2.0 mg/kg，針對干擾少的液體檢測對象，完全可以降低檢出限，大約在0.5 mg/L，達到回收率為70%～110%。當用HPLC-FLD法檢驗出食品里存在的糖精鈉，最低檢出限為0.005～0.200 mg/mL，它和高效液相色譜-紫外檢測法進行比較，重現性更佳的為高效液相色譜-熒光法，它的準確度高，能快速分析較復雜的食品，完全可以作為檢驗糖精鈉的測定方法[2]。

2 食品中防腐劑的檢驗

食品中防腐劑的檢驗，人們過去通常采用分光光度法或氣相色譜法進行，但要經過繁雜的預處理操作。目前，采用高效液相色譜法只需經過簡單的處理，就可以直接進行測定。

例如：用高效相色譜法快速測定飲品中的防腐劑方法，將飲品過濾后直接注入液相色譜系統。10～20 min可同時測定多種防腐劑的含量。該法的色譜條件是：以uBandapakC18柱為分析柱，含有0.02 mol/L乙酸胺的甲醇-水（35∶65）溶液為流動相，洗脫速率1 mL/min，在254 μm的紫外檢測器下進行檢測，該方法的回收率和標準差分別為97%和0.29%。

選取Diamon-sil ODS色譜柱，將它的方式技術選擇的適用性與主色譜柱體的檢測合理性進行保留，對于四氫呋喃和乙腈-水，讓它們發生流動相梯度洗脫，得到可以超出265 nm波長的紫外光測量依據，加樣回收率大約可以達到93%，可以使更多種防腐劑較好地分離。

3 食品中色素的檢驗

在食用色素中超出標準的食用色素越來越多，高效液相色譜法檢測色素，不僅操作簡單，而且效率很高。

當前，更多的食品檢驗員選擇C18柱分離梯度洗脫系統，此法檢出率非常高。如以水果蔬菜飲品里的番茄紅素作為檢測樣品，依據C18色譜柱外校標準曲線將果蔬飲品檢驗，檢測結束后體現番茄紅素在1.0×10-2～3.9×10-5g/L范圍內產生很好的線性關系，檢出限最后值是6.3×10-8g/L。

選用HPLC法檢測，采用保健類包衣片里的食用合成色素為樣品，選擇粉碎提取法、漂洗法兩種方法進行檢測，聚酰胺吸附純化Lichrospher C18柱，甲醇-乙酸胺流動相梯度洗脫，單波長或多波長檢測誘惑紅和檸檬黃以及靛藍這三樣色素；它們線性在寬（0～100 g/mL）之間，回收率達到（91.3%～103.1%），體現的重現性很好（RSD=2.11%～5.63%)，體現檢出限最低為2～11 ng。其中，檢測方法采用多波長和梯度洗脫以及粉碎提取法所得的效果更為理想。

選擇HPLC法和凝膠色譜凈化測定法對食品中蘇丹紅的檢測，應選取乙酸乙酯，也可用正乙烷∶環乙烷（1∶1）將蘇丹紅進行提取，用凝膠色譜（GPC）將被測對象包含的分子量較大的油脂天然色素干擾物去除，然后采取HPLC進行測量。

4 食品中抗氧化劑的檢驗

抗氧化劑在食品中的作用是阻止氧氣和食品中接觸之后，食品將出現氧化變質。如超出用量，就會對人體產生后果。所以，一定要將抗氧化劑控制在規定的范圍之內。

用油炸食品作為檢測對象時，檢測食品中的抗氧化劑含量，選擇RPHPLC法進行檢測。其中，沒食子酸內酯、叔丁基對苯二酯采取50%甲醇作為流動相，羥基茴香醚、4-己基間苯二酚、2246和BHT用80%甲醇作流動相，檢驗的波長是280 nm，相關系數是0.998 3～0.999 6，最低檢出限是1.0～2.0 μg/g，產生回收率平均在85%之上。選取基質固相分散萃取植物油里的抗氧化劑BHT、羥基茴香醚、叔丁基對苯二酯和食子酸內酯,采用高效相色譜法進行分離；產生的結果顯示，運用基質固相分散技術，大大減少了有機溶劑的用量，并將分析時間縮短，同時將分析效率提高，回收率在85.8%～94.3%，最低檢出限是2 ng。

5 結語

高效液相色譜法具有定量精度高、靈敏度高等優勢，目前在食品添加劑檢測工作中被廣泛運用。