微柱凝膠免疫實驗檢測患者血清中抗腫瘤藥物類抗體的臨床應(yīng)用探究

何召新 李瑞娟

（五蓮縣中醫(yī)醫(yī)院，山東 日照 262300）

因藥物吸收而引發(fā)的免疫性溶血性貧血就是指，當患者服用某種藥物之后，其機體內(nèi)部產(chǎn)生了對應(yīng)的藥物類抗體，進而致使機體內(nèi)出現(xiàn)呼吸困難、血尿、疼痛、昏迷以及血壓降低等不良癥狀。在世界經(jīng)濟迅速發(fā)展的背景影響下，因藥物吸收而引發(fā)的免疫性溶血性貧血病癥逐漸受到了國際醫(yī)學(xué)研究的重視，近年來，針對中成藥制劑以及抗腫瘤藥物等引發(fā)的免疫性溶血性貧血病例也逐漸增多。根據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)研究資料顯示，自1953年首次報道免疫性溶血性貧血病例至今，已發(fā)現(xiàn)超過100種藥物在服用后很有可能引發(fā)免疫性溶血性貧血[1]。由此，持續(xù)跟進對該病癥的研究分析顯得至關(guān)重要。本次研究機抽取本院臨床中長期服用抗腫瘤藥物進行治療的100例患者血清標本進行研究分析，現(xiàn)將詳細結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 分析資料：隨機抽取本院臨床中長期服用抗腫瘤藥物進行治療的100例患者血清標本進行研究。100例患者中，男性患者人數(shù)為48例，女性患者人數(shù)為52例；患者年齡最小為27歲，最大為76歲，平均年齡為（49.58±11.37）歲。其中，經(jīng)檢測后發(fā)現(xiàn)，100例患者中包括49例服用曲妥珠單抗抗體的患者，以及51例服用卡培他濱抗體的患者，現(xiàn)將其樣本進行血細胞分析后，提取血清展開進一步的檢測試驗。

1.2 方法

1.2.1 所用藥物：曲妥珠單抗（國藥準字J20110020，生產(chǎn)廠家：上海羅氏制藥有限公司）、卡培他濱（國藥準字H20073024，生產(chǎn)廠家：上海羅氏制藥有限公司）。

1.2.2 所用試劑：O型不規(guī)則抗體篩檢紅細胞、微柱凝膠抗人球蛋白。

1.2.3 檢測儀器：專用孵育器、血庫專用離心機。

1.2.4 檢測方法：①使用臨床專用的溶媒將曲妥珠單抗進行溶解，后根據(jù)實際的配液量對其進行換算，以1.112 mg/mL為標準展開試驗；取300 mg卡培他濱并將其溶解在7.5 mL的pH 7.2 PBS緩沖液當中，后放置于溫室內(nèi)24 h。在溶解過程中需重點注意，卡培他濱在PBS緩沖液中無法實現(xiàn)完全溶解，因此，應(yīng)將其放置于水溫為37 ℃的容器中30 min，并在放置期間進行大力攪拌。待其完全溶解后，取其清液展開后續(xù)試驗。②使用生理鹽水對O型紅細胞進行3次洗滌，并留出部分紅細胞，用于后續(xù)的正常質(zhì)控，待藥物溶液準備完畢后，將紅細胞加入其中。將混合試劑放置與室溫孵育中，儲存60 min，并在規(guī)定時間內(nèi)將其混勻，同時使用PBS對其進行3～4次洗滌。使用PBS緩沖液將紅細胞稀釋到濃度為1%，并放置于溫度為4 ℃的室內(nèi)進行保存。③設(shè)置O型洗滌紅細胞用 LISS 液重懸標本、O型洗滌紅細胞用 PBS緩沖液重懸標本以及藥物致敏紅細胞未加入患者血清標本作為陰性對照。而自身檢測為陽性的患者標本作為陽性對照。④微柱凝膠檢測方法：將50 μL的紅細胞加入抗人球蛋白檢測卡中，并加入25 μL的患者血清，放置于溫度為37 ℃的專用孵育器內(nèi)15 min，當離心后取出觀察詳細檢測結(jié)果。⑤同樣使用微柱凝膠檢測方法進行不規(guī)則抗體篩查，將50 μL標準抗篩細胞加入抗人球蛋白檢測卡中，同時加入25 μL的患者血清，放置于溫度為37 ℃的專用孵育器內(nèi)15 min，當離心后取出觀察詳細檢測結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1 本研究抽取的100例長期服用抗腫瘤藥物進行治療的100例患者血清標本中，存在6例服用卡培他濱的患者，9例服用曲妥珠單抗的患者。經(jīng)過檢測100例患者血清標本發(fā)現(xiàn)，共7例患者血清中存在抗腫瘤藥物類抗體，檢出率為7.00%。經(jīng)過檢測49例服用曲妥珠單抗患者的血清樣本結(jié)果顯示，存在2例陽性標本，檢出率為4.08%；經(jīng)過檢測51例服用卡培他濱患者的血清樣本結(jié)果顯示，存在5例陽性標本，檢出率為9.8%。檢測結(jié)果顯示，曲妥珠單抗產(chǎn)生抗腫瘤藥物類抗體的檢出率低于卡培他濱。

2.2 為了進一步排除血清標本中存在不規(guī)則抗體的可能性，本次研究對7例陽性標本進行了不規(guī)則抗體篩查，實驗結(jié)果顯示，7例抗腫瘤藥物類抗體陽性標本均為陰性，證實標本中不存在不規(guī)則抗體。

3 討 論

根據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)研究報道顯示[2]，對免疫性溶血性貧血患者給予常規(guī)化療方案會產(chǎn)生一系列的嚴重不良反應(yīng)，且整體治療效果并不理想，無法為患者的生命健康安全提供可靠保障。隨著世界醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，當代有關(guān)藥物而引發(fā)的溶血反應(yīng)案例越來越多，有關(guān)醫(yī)學(xué)研究專家發(fā)現(xiàn)，使用聯(lián)合用藥的化療法可以在獲得良好治療效果的同時，降低相關(guān)不良反應(yīng)的發(fā)生率，對提高臨床治療效率有著重大現(xiàn)實意義。曲妥珠單抗屬于人源化單克隆抗體的一種，被臨床廣泛用于治療腫瘤患者的過程中。該藥物會引發(fā)的不良反應(yīng)包括：四肢乏力、呼吸道感染、骨髓抑制以及心悸等。而卡培他濱是氟尿嘧啶類藥物的一種，通過口服用藥的方式進入人體后，能夠被機體胃腸道快速吸收，在近年來常被聯(lián)合應(yīng)用到治療腫瘤患者的過程[3]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)過檢測100例患者血清標本發(fā)現(xiàn)，共7例患者血清中存在抗腫瘤藥物類抗體，檢出率為7.00%。其中存在2例曲妥珠單抗，檢出率為4.08%；存在5例卡培他濱，檢出率為9.8%。檢測結(jié)果顯示，曲妥珠單抗產(chǎn)生抗腫瘤藥物類抗體的檢出率低于卡培他濱。

綜上所述，當患者長期服用抗腫瘤類藥物之后，機體內(nèi)部產(chǎn)生了曲妥珠單抗以及卡培他濱藥物類抗體。該藥物類抗體很可能導(dǎo)致患者出現(xiàn)藥物治療無效或是免疫性溶血等諸多免疫性臨床不良反應(yīng)。由此，為了進一步提高臨床整體的治療效果，就必須加強對免疫性溶血反應(yīng)的深入研究，而展開抗腫瘤藥物類抗體的研究檢測，對提高臨床治療效率有著至關(guān)重要的作用。