中藥抗血小板聚集作用機制研究概況

*

1.長春中醫藥大學，吉林 長春 130117；2.吉林省中醫藥科學院，吉林 長春 130021

中醫理論中“血瘀”的范疇即為血栓形成、血小板聚集，血小板聚集是血栓性疾病發生的主要原因，抗血小板聚集藥物作為抗血栓性疾病的經典藥物之一，對其相關機制的深入研究日益迫切。本文從血小板聚集機制、抗血小板聚集中藥及有效成分等方面綜述如下。

1 抗血小板聚集作用機制

在正常血液循環過程中，血小板處于靜止狀態，受到生理或病理刺激因子作用時，血小板發生活化，在von-Willebrand因子(vWF)存在下粘附于受損血管處暴露的內皮下組織，啟動內皮下組織或局部形成的凝血酶，發生釋放反應和花生四烯酸代謝(AA代謝)，前者分泌釋放的二磷酸腺苷(ADP)和后者形成的血栓烷A2(TXA2)可以引起血小板聚集。血小板聚集是由血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲ a(GPⅡb/Ⅲ a)受體所調節，纖維蛋白原與活化的GPⅡb/Ⅲa受體結合，在相鄰的血小板之間形成橫橋，形成血栓和骨架，參與生理性止血和病理性血栓形成[1]。

2 抗血小板聚集藥物

中藥來源廣、不良反應小、治療作用平和，逐漸被人們認知，但其成分繁多且交互作用復雜，盡管很多活血化瘀中藥在抗血小板聚集的防治中取得了良好的效果，但其物質基礎和作用機制尚需深入研究。

2.1 中藥有效成分

2.1.1 黃酮類 黃酮類化合物可以通過抑制血小板的活化，信號轉導，抗氧自由基，阻斷TXA2受體，抑制5-HT和TXA2的釋放以及抑制血小板內CA2+濃度的升高等作用來達到預防心腦血管疾病的發生[2-4]。有學者研究化橘紅6種黃酮成分抑制血小板聚集的活性，并對其構效關系進行分析，結果顯示在抑制 ADP 誘導的大鼠血小板聚集中，川陳皮素抑制作用最強，隨后依次是桔紅素、橙皮素、柚皮素或橙皮苷、柚皮苷，得出抑制血小板聚集的活性與其結構密切相關，甲氧基和酚羥基數目以及A環C7羥基可能影響黃酮抑制血小板聚集的生物活性[5]。 游離態的黃酮苷元、與糖結合的黃酮糖苷及天然黃酮混合物都具有抗血小板聚集的明確功效，但其溶解性差、藥效緩慢、生物利用度不高，因此可通過研究黃酮類化合物的活性結構和作用機制，進行結構優化，提高藥物靶向性、藥效性及安全性，進行系統科學的臨床試驗研究，從而為研發更加安全、高效、低毒的抗血小板聚集藥物奠定堅實的基礎。

2.1.2 有機酸、酚類 劉岱琳等[6]考察了19種酚酸類、有機酸類化合物體外抗ADP誘導兔血小板聚集活性，發現沒食子酸、阿魏酸、琥珀酸、酒石酸、壬二酸、對羥基桂皮酸、丹皮酚等具有明顯抑制血小板聚集作用，并認為該類化合物抗血小板聚集活性與其結構存在構效關系。此外，有學者將將2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪與魏酸乙酯等含酚羥基的芳酸反應，再經水解，得到了川芎嗪芳酸醚類衍生物，體外藥效篩選結果顯示，部分川芎嗪芳酸衍生物對ADP誘導的血小板聚集具有較好的抑制活性，其中川芎嗪與阿魏酸的拼合物的抑制活性是奧扎格雷的5.7倍，是阿魏酸川芎嗪的192倍[7]。有機酸類成分具有結構多樣性，以其為先導物進行結構改造和修飾是我國進行創新藥物研究的可行途徑之一，因此，有機酸進行結構改造和修飾，有可能開發出活性更強、毒副作用更小的有機酸類衍生物藥物。

2.1.3 生物堿類 透骨草中吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物堿，能抑制ADP、AA、collagen等誘導的兔血小板聚集，其中對ADP誘導的血小板聚集抑制作用最強，且劑量和作用呈現一定的正相關性[8]。巖烏頭根部的二萜生物堿類化合物sachaconitine和化合物14-acetylsachaconitine對PAF誘導的血小板聚集具有一定的抑制作用[9]。有學者采用ADP誘導體外血小板聚集模型，篩選生物堿單體的體外抗血小板聚集活性，結果表明藜蘆的主要成分甾體生物堿具有顯著的抗血栓活性[10]，之后對藜蘆總生物堿以及單一生物堿的抗血栓活性進行比較研究，結果顯示藜蘆生物堿中抗血小板聚集的主要活性成分可能是A2，同時初步的構效關系研究表明西藜蘆堿骨架是抗血栓活性所必備的，C3位酯基取代基的疏水性和空間位阻效應對生物堿抗血栓活性有很大影響，可提高化合物的抗血栓活性[11]。因此，研究生物堿類化合物的活性結構和作用，對于提高某一中藥活性優化具有重要意義，在以后的研究中，可通過掌握結構和功能之間的規律性，有針對性和目的性地進行結構優化和改造，進而提高藥物的靶向性及藥效性。

2.2 經典中藥

2.2.1 川芎 川芎為傘形科植物LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖，具有活血行氣、祛風止痛的功效，能夠改善血液流變性、降低血黏度、抗腦缺血、解熱鎮痛[12]。川芎的主要有效活性成分為川芎嗪、川芎內酯、阿魏酸鈉、揮發油、揮發性油狀生物堿及酚性物質等[13]。

川芎嗪抗血小板聚集作用機制有以下幾方面：抑制血小板合成TXA2，明顯增加血管內皮細胞合成和釋放PGI2，阻止局部血栓的形成；增加血小板c AMP含量，抑制血小板聚集和釋放反應；鈣拮抗劑作用：川芎嗪使血小板內CA2+濃度降低，阻斷CA2+對血小板激活和前列腺素的代謝，增強NOS的活性，刺激血小板中NO的生成[14]；川芎嗪還可顯著降低腦缺血后血漿TXA2，升高6酮前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)，調節TXA2/PGI2失衡狀態，起到抗血栓作用[15]。阿魏酸能夠明顯抑制血小板聚集，抑制5-HT、TXA2樣物質的釋放，選擇性抑制TXA2合成酶活性，使PGI2/TXA2比率升高[16]。有學者基于藥物設計的生物電子等排和拼合原理，設計、合成了川芎嗪/查耳酮類雜合物，得到活性較強的抗血小板聚集藥物。其中，目標化合物對ADP和AA誘導的血小板聚集均顯示不同程度的抑制，其中化合物8活性最強，對ADP誘導的血小板聚集的抑制作用(IC50=0.14 mmol/L)是川芎嗪的9.1倍，查耳酮的10.5倍；對AA誘導的血小板聚集的抑制作用( IC50=0.09 mmol / L) 是川芎嗪的8.8倍，查耳酮的10.0倍，且略優于阿司匹林(IC50=0.15 mmol/L)[17]。

川芎嗪常被認為是川芎抗血小板聚集的主要有效成分、是評價川芎質量的指標性成分，隨著川芎嗪類合成產物的出現，對川芎抗血小板聚集的研究將不僅僅限于川芎嗪和阿魏酸，應以此為基點逐步提高對川芎其他有效成分、有效成分群、有效部位、有效部位群之間的藥效學及作用機制研究，為闡明川芎抗血小板聚集作用機制提供科學依據。

2.2.2 丹參 丹參為唇形科植物SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根或根莖，為中醫活血化瘀的要藥，具有活血化瘀、通絡止痛、清心除煩的功效[18]。丹參的有效成分包括丹酚酸、丹酚酸B、迷迭香酸、乙酰丹酚酸A、丹酚酸A等。

丹酚酸可顯著抑制ADP、膠原(collagen)、AA誘導的大鼠血小板聚集；丹酚酸B能夠抑制正常大鼠血漿血小板粘附性，降低血漿TXB2水平，此外能夠抑制α2β1抗體與血小板的結合及可溶性α2β1與膠原的結合；迷迭香酸能夠抑制大鼠靜脈血栓形成和collagen誘導的血小板聚集，促進纖維蛋白溶解活性；丹酚酸A能夠抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液的高凝狀態及顯著升高血小板中cAMP含量；乙酰丹酚酸A能夠抑制ADP、collagen、AA、凝血酶等引起的大鼠和兔血小板聚集[19]。此外脂溶性的隱丹參酮抗血小板聚集活性也有報道[20]，但對其抗血小板聚集作用機制和研究尚不深入，其抗血小板高活性功能的發現，為進一步開發抗血小板聚集的新藥的前體化合物提供可能，因此，尚需從分子生物學水平，并結合藥效學研究和藥動學研究對隱丹參酮進行更深層次的探索。

2.2.3 葛根 葛根為豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.) ohwi.的干燥根和根莖，具有解肌退熱、生津 止渴、透疹、升陽止瀉等功效，可解熱、改善心肌缺血、抗氧化等，用于治療頭暈頭痛、高血壓病、心絞痛等疾患[21]。葛根的主要活性成分為異黃酮類化合物，以葛根素、大豆苷元、大豆苷、葛根素-7-木糖苷[22]等。葛根總黃酮在臨床應用中，500～1000 μg/kg，連續口服7d，能顯著降低大鼠血黏度、血小板粘附率，抑制血栓形成及ADP誘導的血小板聚集[23]。葛根素在臨床應用中，具有擴張血管、調節TXA2/PGI2比值，抑制血小板聚集、降低血漿兒茶酚胺水平以及恢復受損內皮細胞功能的作用，從而抑制HIRI時的血小板聚集[24]；此外，葛根素對心腦血管系統的藥理作用顯著，可使外周循環得到改善，減少血小板的聚集，有β受體的阻斷作用，以及降血糖、血壓的效果[25]。相關藥理實驗表明，葛根素低、中、高劑量可顯著延長出、凝血時間，對ADP誘導的血小板聚集也有較強的抑制作用且呈劑量依賴關系[26]。此外，葛根素可使血小板最大聚集率(Ptmax)、最大聚集時間(Pt T)均明顯下降，PtT顯著延長，且與缺血再灌注組比較差異有顯著性，表明葛根素能有效地抑制血小板的聚集功能[27]。野葛根莖中的主要成分葛根素和大豆黃苷及其代謝物大豆黃酮對ADP和collagen誘導的體外血小板聚集有抑制作用[28]。

抗血小板聚集過程為多個媒介相互結合，多種物質相互作用，因此，單一作用的抗血小板制劑往往難以取得令人滿意的療效，而中藥制劑成分復雜，具有多靶點作用，其機制不能以拮抗單一致病因素的理論來解釋，因此葛根黃酮及葛根素等單一藥物、多種機制的藥物正是研究方向，因此可拓寬思路，研究中藥各類成分結構與相應功能之間是否存有規律性、中藥抗血小板作用是否和其他作用有協同性，以篩選出高效、全面的中藥抗血小板制劑。

3 小結

綜上所述，中藥抗血小板聚集作用機制可以分為抑制ADP、collagen、AA、凝血酶等方面。具有抗血小板聚集活性中藥是良好的天然產物，在心腦血管血栓性疾病的防治中取得了良好的效果，同時這些藥物分子的多樣性和豐富性是合理選擇、使用藥物，評價、設計新藥的基礎，隨著現代天然產物化學和藥理學研究的不斷發展，各類中藥的物質基礎和有效成分的作用機制將會逐步得以闡明。