不同病理類型及分級膠質瘤細胞IDH1基因突變臨床探究

王 川，高 峰，董 軍，王繼超，楊小朋?

（1.石河子大學醫學院，新疆 石河子 832000；2.新疆維吾爾自治區人民醫院神經外科，新疆 烏魯木齊 830000）

膠質瘤是一種顱內常見惡性腫瘤，通常將源自神經上皮的腫瘤統稱為膠質瘤。膠質瘤大多呈廣泛浸潤性生長，邊界不明顯，難以對其進行徹底清除，具有較高的致死率和致殘率，且術后容易復發。隨著科學技術的不斷進步，對膠質瘤的認識也更加深入，有研究報道，膠質瘤的異檸檬酸脫氫酶1（IDH1）基因存在突變的情況，且IDH1基因突變與膠質瘤形成和進展均具有較大關系，通過對膠質瘤IDH1基因突變情況進行分析，有助于及早發現和診治膠質瘤，具有非常重要的臨床意義[1]。因此，本文對不同病理類型和分級的膠質瘤細胞IDH1基因突變情況進行如下分析：

1 資料與方法

1.1 一般資料

于2016年1月～2017年5月我院收治的膠質瘤患者中選取75例，將其作為本次研究對象，所有患者均符合膠質瘤診斷標準，且術前均未實施化療、放療等治療，排除合并其他部位腫瘤患者。其中男性患者43例，女性患者32例；年齡為21～68歲，平均年齡（41.5±6.3）歲。毛細胞型星形細胞瘤4例，WHO分級I級；彌漫型星形細胞瘤11例，WHO分級Ⅱ級；間變性星形細胞瘤13例，WHO分級Ⅲ級；原發性和繼發性多形性膠質母細胞瘤分別為10例和14例，WHO分級Ⅳ級；少突星形細胞瘤5例，少突膠質瘤2例，均為WHO Ⅱ級；間變性少突星形細胞瘤7例，WHO Ⅲ級；6例節細胞膠質瘤，WHO分級Ⅱ級；3例室管膜瘤，WHO Ⅱ級。

1.2 方法

膠質瘤IDH1基因突變應用免疫組化Elivision二步法進行檢測，用中性甲醛對膠質瘤標本進行固定，并用石蠟包埋，完成上述處理后進進行薄層切片。對切片實施常規脫蠟、檸檬酸液修復，并利用微波爐高溫高壓進行抗原修復，然后滴入過氧化物酶液進行阻斷。于室溫條件下，孵育5分鐘并漂洗，然后滴入鼠抗人mIDH1R32H型單克隆抗體，室溫孵育半小時后，實施PBS沖洗并加入辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠二抗，孵育半小時后再PBS沖洗，并將顯色試劑滴加到切片上，孵育5分鐘后用自來水進行沖洗使顯色中止，然后應用蘇木精復染，實施脫水、封片等處理后，用顯微鏡對標本進行觀察。用緩沖液替代一抗孵育作為陰性對照。

1.3 結果評價

有兩名病理醫生采用雙盲法對標本進行觀察，以細胞胞質中存在褐色或棕黃色顆粒作為陽性判斷標準，于光鏡下隨機觀察高倍視野8個，并記錄4個高倍視野的染色陽性百分率，如果陽性細胞達到10%以上，則判斷為IDH1突變陽性。

1.4 統計學處理

2 結 果

2.1 各類膠質瘤細胞的IDH1基因突變情況

經統計發現，75例膠質瘤患者中有33例檢出IDH1基因突變，總突變率為44.0%（33/75）。從WHO分級來看，IDH1基因突變以WHO Ⅱ級～Ⅲ級為主。見表1。

2.2 膠質瘤細胞IDH1基因突變與年齡關系

彌漫型星形細胞瘤、繼發性多形性膠質母細胞瘤、間變性星形細胞瘤、少突星形細胞瘤和間變性少突星形細胞瘤的突變型年齡與野生型比較，均顯著較低，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 膠質瘤細胞IDH1基因突變結果分析

表2 突變型和野生型膠質瘤患者年齡比較（±s）

表2 突變型和野生型膠質瘤患者年齡比較（±s）

病理類型 突變型 野生型 t P毛細胞型星形細胞瘤（0/4） — 21.9±4.1 — —彌漫型星形細胞瘤（6/5） 30.9±3.1 41.4±3.8 5.057 0.001*間變性星形細胞瘤（9/4） 31.4±3.5 52.3±5.4 8.469 0.000*原發性多形性膠質母細胞瘤（1/9） 54.2±4.7 55.8±4.9 0.309 0.765繼發性多形性膠質母細胞瘤（7/7） 32.6±5.1 49.8±6.2 5.668 0.000*少突星形細胞瘤（4/1） 28.7±2.9 46.2±4.1 5.397 0.013*少突膠質瘤（1/2） 31.1±3.8 31.5±3.9 0.084 0.947間變性少突星形細胞瘤（5/2） 32.5±3.6 45.9±4.7 4.165 0.009*節細胞膠質瘤（0/6） — 35.8±6.2 — —室管膜瘤（0/3） — 37.5±4.8 — —

3 討 論

膠質瘤在臨床具有較高發病率，占顱腦腫瘤的40%-50%，且近年來膠質瘤發病率具有逐年上升趨勢。大部分膠質瘤，尤其是高分級的膠質瘤，無明顯邊界，可成廣泛浸潤性生長，難以徹底治愈。人類IDH1是由IDH1基因編碼翻譯而成的蛋白酶，能夠催化異檸檬酸氧化脫羧轉變為α-酮戊二酸，在細胞能量代謝中發揮著重要作用。隨著研究的不斷深入，越來越多的研究證實，IDH1基因突變與膠質瘤的發生、發展有著重要關系[2]。

為了解不同病理類型和分級膠質瘤患者的IDH1基因突變情況，本文選取了75例患者進行研究，結果顯示有33例檢出IDH1基因突變，總突變率為44.0%，說明IDH1基因突變在膠質瘤患者中較為常見。其中少突星形細胞瘤的突變率達到了80.0%，間變性星形細胞瘤和間變性少突星形細胞瘤突變率也達到了69.2%和71.4%，彌漫型星形細胞瘤突變率為54.6%，與臨床真實數據基本一致[3]，說明IDH1基因突變在這些病理類型膠質瘤發生、發展過程中發揮了重要作用。本文研究結果顯示，IDH1基因突變主要為WHO Ⅱ級和Ⅲ級，基因突變型患者的年齡與野生型比較顯著較小，與相關研究成果一致[4]，說明分級為Ⅱ級和Ⅲ級的膠質瘤更容易出現IDH1基因突變，膠質瘤IDH1基因突變與年齡有相關性，年齡越小發生IDH1基因突變的風險越大。

總而言之，膠質瘤患者中IDH1基因突變較為常見，尤其是WHO分級為Ⅱ級～Ⅲ級、年齡較小的患者，IDH1基因突變在其病情發生發展中均具有重要作用。

[1] 王繼超.膠質瘤IDH1基因突變與膠質瘤干細胞相關基因表達的相關性研究[J].中華神經醫學雜志,2012,11(4):372-375.

[2] 王國良.不同病理類型和級別膠質瘤細胞IDH1基因突變情況分析[J].中國微侵襲神經外科雜志,2014,19(8):364-367.

[3] 楊燕武.IDH1基因突變對膠質瘤診斷及預后意義[J].中國現代神經疾病雜志,2012,12(6):712-718.

[4] 湯俊佳.人腦幕上WHOⅡ級膠質瘤IDH1基因突變與臨床病理特征的關系[J].四川大學學報(醫學版),2013,44(1):60-63.