基于微小RNA調(diào)控探討中醫(yī)藥延緩腎纖維化機(jī)制?

尹佳琦，魏明剛

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，江蘇 蘇州 215006)

慢性腎衰竭是威脅人類(lèi)生命的主要疾病之一，且近年來(lái)發(fā)生率逐年上升。慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)則是導(dǎo)致慢性腎衰竭的主要病因。最新流行病學(xué)表明，我國(guó)CKD患病率約為10.8%[1]，據(jù)此可推算我國(guó)CKD患者超過(guò)1億人。由于慢性腎衰竭目前仍無(wú)有效的治療手段，依賴(lài)血液透析、腎移植等替代治療不僅增加患者病痛和家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而且加重社會(huì)醫(yī)療負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重阻礙國(guó)家經(jīng)濟(jì)發(fā)展。因此，CKD的防治是世界各國(guó)所面臨的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。CKD發(fā)展為慢性腎衰竭的必經(jīng)之路是腎纖維化。腎纖維化早期可表現(xiàn)為腎臟局部炎癥,隨著病情發(fā)展出現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(tubular epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)、細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM) 異常積聚,促使腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化，最終導(dǎo)致腎功能逐漸下降直至喪失而發(fā)展為慢性腎衰竭。因此，明確腎纖維化的病變機(jī)制、延緩CKD病變發(fā)展及保護(hù)腎臟功能是減少慢性腎衰竭發(fā)病率和患病率的關(guān)鍵。

微小RNA(microRNA,miRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)度約22個(gè)核糖核苷酸組成的單鏈、非編碼蛋白質(zhì)RNA，具有高度的保守性和單一的基因集簇性，在動(dòng)植物細(xì)胞分化、增殖、凋亡過(guò)程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，參與哺乳動(dòng)物約30%蛋白質(zhì)編碼基因表達(dá)。miRNA在腎纖維化進(jìn)程中起關(guān)鍵作用，中醫(yī)藥在延緩腎纖維化方面與TGF-β/Smads等信號(hào)通路關(guān)系密切。由此推斷，miRNA是中醫(yī)藥延緩腎纖維化直接或間接介質(zhì)，是治療CKD的重要靶點(diǎn)，值得深入探討。

1 miRNA對(duì)纖維化相關(guān)細(xì)胞因子的影響

miRNA可通過(guò)相關(guān)細(xì)胞因子的調(diào)控影響腎纖維化的進(jìn)程。在生理情況下，細(xì)胞因子等構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)處于平衡狀態(tài)，但在病理情況下這一平衡被打破。參與腎纖維化常見(jiàn)的細(xì)胞因子有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connectibe tissue growth factor, CTGF)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)和核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)等。

1.1 miRNA對(duì)TGF-β的調(diào)控作用

TGF-β是目前作用最明確的致腎纖維化因子，其雙刃劍作用表現(xiàn)在正常表達(dá)時(shí)能抑制炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增殖，而過(guò)度表達(dá)時(shí)則可引起器官纖維化等病理性改變。TGF-β促腎纖維化主要表現(xiàn)在刺激效應(yīng)細(xì)胞分泌大量ECM；通過(guò)抑制ECM降解酶的活性使ECM成分的降解減少；促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞增殖，使ECM成分的合成和分泌增加。

Kato、Chung等[2-3]研究發(fā)現(xiàn)，miR-192通過(guò)下調(diào)Smads相互作用蛋白1 (Smad interacting protein 1,SIP1/ZEB2)來(lái)增加TGF-β誘導(dǎo)的膠原蛋白(Collagen,Col)表達(dá)，介導(dǎo)腎纖維化的發(fā)生。Zhong等[4]在糖尿病小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，miR-21能通過(guò)抑制Smad7來(lái)提高TGF-β1和NF-κB信號(hào)通路的活性，還能增加Col1、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)、TNF-α的表達(dá)，促進(jìn)腎纖維化的發(fā)生。

Wang等[5-6]發(fā)現(xiàn)，在NRK-52E中miR-29家族能明顯降低TGF-β1誘導(dǎo)的Col I、III、IV，α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及波形蛋白(Vimentin)的表達(dá)。let-7b能減少Smad3活性并明顯降低Col I、IV和FN的表達(dá)，通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β受體(TGF-β receptor，TGFβR)抑制TGF-β1的信號(hào)通路延緩腎纖維化。Wang、Xiong等[7-8]證實(shí)，在NRK-52E中，miR-200家族能通過(guò)抑制E盒結(jié)合鋅指蛋白1 (zinc finger Eboxbinding homeobox1, ZEB1)和ZEB2的表達(dá)以減少TGF-β誘導(dǎo)EMT的發(fā)生，提高上皮細(xì)胞標(biāo)志蛋白上皮鈣黏素(epithelial cadherin, E-cadherin)的表達(dá)，并降低Vimentin、FN、α-SMA和ColI、IV的表達(dá)。

多種miRNAs參與TGF-β的調(diào)控，miR-192、miR-21等miRNA促使腎纖維化的發(fā)生，而miR-29、miR-200家族、let-7b等miRNA延緩腎纖維化的進(jìn)程。

1.2 miRNA對(duì)CTGF的調(diào)控作用

CTGF在人體多種組織器官中廣泛表達(dá)，尤其在腎臟中表達(dá)最豐富。病理狀態(tài)下，CTGF的表達(dá)與器官纖維化有密切聯(lián)系。CTGF在腎纖維化進(jìn)程中主要有以下幾種表現(xiàn)：一是CTGF具有促絲分裂原的作用，使腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為成纖維細(xì)胞或肌成纖維細(xì)胞；二是刺激ECM發(fā)生異常積聚；三是CTGF與TGF-β相互調(diào)節(jié)。CTGF作為T(mén)GF-β的下游介質(zhì)可以直接激活TGF-β信號(hào)通路，而TGF-β促使CTGF表達(dá)增加。CTGF具有保守且單一的生物學(xué)活性，因此通過(guò)直接拮抗CTGF來(lái)治療腎纖維化，可能是一種特異、有效的方法。Koga、Wang、Chen等[9-11]研究發(fā)現(xiàn)，miR-19 a、miR-19b、miR-26 a、miR-26b和miR-30c的靶基因是CTGF，這些miRNAs可以直接作用于CTGF的3’端UTR來(lái)抑制CTGF蛋白表達(dá)，并能使TGF-β/Smads信號(hào)通路減弱，從而抑制ECM成分(如Col、FN)異常積聚和α-SMA、Vimentin表達(dá)增加，進(jìn)一步延緩器官纖維化。

CTGF的表達(dá)與miRNA的調(diào)控存在密切聯(lián)系， miR-19、miR-26、miR-30等miRNA能降低CTGF水平，從而減慢腎纖維化進(jìn)程。

1.3 miRNA對(duì)TNF-α的調(diào)控作用

TNF是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞毒細(xì)胞因子。TNF-α在腎纖維化進(jìn)程中的主要作用是，促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)至腎間質(zhì)，并誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞中促纖維化的相關(guān)細(xì)胞因子釋放增加；聚集炎癥細(xì)胞；刺激成纖維細(xì)胞增殖，促進(jìn)ECM成分的合成和分泌；TNF-α與NF-κB的相互作用。McDaniel等[12]研究發(fā)現(xiàn)，miR-155能促使脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的TNF-α增多和器官纖維化發(fā)生。Zarjou等[13]發(fā)現(xiàn)，UUO小鼠模型中，經(jīng)TNF-α誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞中miR-21明顯上調(diào)，而增加miR-21的表達(dá)也能促使TNF-α和Col的表達(dá)上調(diào)，進(jìn)一步促使腎纖維化的發(fā)生。Zheng等[14]研究發(fā)現(xiàn)，增加miR-148 a的表達(dá)可以減少TNF-α和IL-1β的釋放。Tili等[15]研究發(fā)現(xiàn)，miR-125b能直接作用于TNF-α的3’端UTR以抑制TNF-α的表達(dá)。Lan等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在巨噬細(xì)胞中，miR-132的增加可以明顯抑制NF-κB、TNF-α和IL-6的表達(dá)。

TNF-α與器官纖維化的關(guān)系十分密切，而miRNA對(duì)TNF-α有重要的調(diào)控作用。miR-155、miR-21等miRNAs能通過(guò)誘導(dǎo)TNF-α加快器官纖維化，而miR-148 a、miR-125b、miR-132等可通過(guò)抑制TNF-α的表達(dá)來(lái)減緩纖維化的發(fā)生。

1.4 miRNA對(duì)NF-κB的調(diào)控作用

NF-κB是細(xì)胞中廣泛存在的重要核轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，具有接受外部信號(hào)后快速由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移的顯著特點(diǎn)，能夠參與細(xì)胞分化、凋亡及炎癥反應(yīng)等。NF-κB能直接或間接地影響腎纖維化發(fā)生，主要表現(xiàn)在 TGF-β1與NF-κB相互影響，并促使ECM異常積聚，增加TNF-α的表達(dá)，也能被TNF-α誘導(dǎo)，加快EMT進(jìn)程并促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖。Feng等[17]發(fā)現(xiàn)，miR-126通過(guò)NF-κB通路明顯降低IκBα的表達(dá)并增加NF-κB的表達(dá)。Murphy等[18]研究發(fā)現(xiàn)，let-7 a以直接破壞NF-κB抑制劑的穩(wěn)定性來(lái)激活NF-κB信號(hào)通路，使TNF-α表達(dá)增加。而miR-125b則增強(qiáng)NF-κB抑制劑的穩(wěn)定性，從而抑制NF-κB信號(hào)通路及TNF-α的表達(dá)。Wei等[19]證實(shí)，miR-26 a能抑制NF-κB活性，減少ColI、CTGF表達(dá)。Bhaumik等[20]發(fā)現(xiàn)，miR-146通過(guò)NF-κB信號(hào)通路上游TNF受體相關(guān)因子和IL-1受體相關(guān)激酶來(lái)降低NF-κB活性。

NF-κB與器官纖維化關(guān)系密切，miRNA對(duì)NF-κB的調(diào)節(jié)作用能影響腎纖維化的進(jìn)程。如miR-126、let-7 a等miRNA能促進(jìn)NF-κB激活，而miR-26 a、miR-125b、miR-146等能抑制NF-κB激活。

miRNA在腎纖維化的發(fā)展過(guò)程中起關(guān)鍵作用，miRNA能通過(guò)對(duì)TGF-β、 CTGF、TNF、NF-κB等腎纖維化相關(guān)細(xì)胞因子及其信號(hào)通路的調(diào)控作用來(lái)影響EMT進(jìn)程和ECM成分異常積聚，從而進(jìn)一步延緩或加速腎纖維化的發(fā)展。

2 中醫(yī)藥對(duì)miRNA的調(diào)控機(jī)制及通過(guò)調(diào)控miRNA對(duì)腎纖維化的作用

2.1 中醫(yī)藥可通過(guò)Dicer酶發(fā)揮對(duì)miRNA的調(diào)控作用

miRNA在細(xì)胞核內(nèi)由RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄成初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(pri-miRNA)，繼而在Drosha酶的作用下生成約70個(gè)核苷酸長(zhǎng)度組成莖環(huán)結(jié)構(gòu)的前體miRNA(pre-miRNA)，通過(guò)Dicer酶進(jìn)一步切割為成熟的約22個(gè)核苷酸組成的單鏈、非編碼miRNA。Dicer酶是原始miRNA轉(zhuǎn)化為成熟miRNA的關(guān)鍵酶。有研究證實(shí)，小鼠卵母細(xì)胞Dicer酶的特異性缺失會(huì)造成母體miRNA遺傳的缺失[21]。Dicer酶不僅是生成成熟miRNA的關(guān)鍵酶，許多研究證實(shí)Dicer酶還具有調(diào)控miRNA表達(dá)的作用。Rupaimoole等[22]研究發(fā)現(xiàn)，在缺氧狀態(tài)下Dicer酶的表達(dá)下調(diào)，對(duì)miRNAs產(chǎn)生的調(diào)控作用導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移增加。Yao等[23]發(fā)現(xiàn)，在慢性缺氧條件下Dicer酶能調(diào)控miR-143和miR-155的表達(dá)，以促進(jìn)細(xì)胞葡萄糖代謝的影響。Hartmann等[24]證實(shí)，Dicer酶通過(guò)調(diào)控miR-103抑制Kruppel樣因子4，從而促進(jìn)部分內(nèi)皮細(xì)胞適應(yīng)不良和動(dòng)脈粥樣硬化。Kuehbacher等[25]研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染Dicer酶的小干擾RNA(Small interfering RNA，siRNA)，能抑制miRNA的生物合成，Dicer酶的siRNA可以降低let-7f和miR-27b表達(dá)，從而對(duì)血管生成產(chǎn)生影響。這些研究證實(shí)，Dicer酶對(duì)miRNAs的調(diào)控機(jī)制能對(duì)多種細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等)產(chǎn)生影響。

研究表明，中藥對(duì)Dicer酶具有調(diào)控作用。Yang等[26]發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)陽(yáng)還五湯通過(guò)干擾Dicer酶來(lái)調(diào)節(jié)miR-126、miR-221、miR-222表達(dá)，從而上調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，以提高對(duì)局灶性腦缺血后間充質(zhì)干細(xì)胞血管生成的影響。Sun等[27]研究證實(shí)，雷至膠囊能夠減少Dicer酶的表達(dá)，調(diào)控miR-23 a、 miR-300-3p、miR-24和miR-30c表達(dá)，并對(duì)腎組織足細(xì)胞裂隙膜關(guān)鍵結(jié)構(gòu)分子腎單位、足細(xì)胞和骨架蛋白有明顯的保護(hù)作用，修復(fù)嘌呤霉素氨基核苷腎病模型對(duì)足細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能方面造成的損傷，減少尿蛋白。

因此可以認(rèn)為，中藥方劑通過(guò)中藥復(fù)合物及其活性成分對(duì)機(jī)體內(nèi)Dicer酶表達(dá)的調(diào)控作用，進(jìn)而發(fā)揮其對(duì)miRNA的調(diào)節(jié)作用，從而影響miRNA的表達(dá)水平，進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞的分化、增殖、凋亡等發(fā)揮著重要作用。其作用機(jī)制可能是中藥通過(guò)調(diào)控miRNA表達(dá)，調(diào)整機(jī)體機(jī)能及治療疾病的重要機(jī)制和作用靶點(diǎn)。

2.2 腎纖維化與中醫(yī)藥的聯(lián)系

腎纖維化的防治與中醫(yī)藥有著密切聯(lián)系，腎纖維化的形成貫穿于各種CKD發(fā)展為終末期腎衰竭的始終。CKD屬于中醫(yī)水腫、腰痛、尿血、關(guān)格、虛勞等疾病范疇，其病因病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，但該病病機(jī)錯(cuò)綜復(fù)雜，病位涉及腎、肝、脾、肺、心諸臟，發(fā)病主要與肺、脾、腎三臟關(guān)系密切。根據(jù)現(xiàn)代解剖學(xué)可知，腎臟滿(mǎn)布血管網(wǎng)，故腎纖維化受到血流動(dòng)力學(xué)的影響。這些細(xì)小且量多的血管網(wǎng)屬于中醫(yī)孫絡(luò)范疇，孫絡(luò)是絡(luò)脈中最細(xì)小的分支，主要作用是輸布?xì)庋藻︷B(yǎng)全身組織，病理狀態(tài)下血液運(yùn)行不利易造成瘀阻，故血瘀是CKD最容易出現(xiàn)的病因，為邪實(shí)之首。CKD中所出現(xiàn)的腎臟病理學(xué)改變，如血管袢、細(xì)胞增殖、Col沉積、血栓形成等都在血瘀的致病結(jié)果中。《素問(wèn)》素有“邪之所湊，其氣必虛”的發(fā)病觀(guān)，氣虛則推動(dòng)血液不利易造成血瘀，故從中醫(yī)發(fā)病病機(jī)的角度來(lái)說(shuō)，CKD常見(jiàn)于氣虛血瘀。

近年來(lái)課題組通過(guò)一系列的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，黃芪、當(dāng)歸、川芎、牛膝等中藥可以治療氣虛血瘀且具有多靶點(diǎn)和精準(zhǔn)治療的特色，這些中藥可以減少Col和FN等ECM成分異常積聚，抑制TGF-β1信號(hào)通路，減少腎小管上皮細(xì)胞凋亡等，對(duì)腎臟具有保護(hù)作用，從而有效延緩腎纖維化進(jìn)程。

2.3 中醫(yī)藥通過(guò)調(diào)控miRNA對(duì)腎纖維化作用

近年來(lái)，關(guān)于中藥對(duì)腎纖維化的影響已有報(bào)道。黃芪甲苷(astragaloside-IV，AS-IV)是黃芪的主要活性成分之一，對(duì)延緩腎纖維化起到了關(guān)鍵作用；Zhu等[28]發(fā)現(xiàn)，AS-IV可以降低大鼠血肌酐、尿素氮并減少TGF-β、CTGF、FN的表達(dá)來(lái)延緩腎纖維化；Che等[29]證實(shí)，AS-IV能通過(guò)抑制絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路的活性和TGF-β1誘導(dǎo)NF-kB信號(hào)通路激活以減少α-SMA和ECM成分，如ColIV、FN的表達(dá)延緩腎纖維化；Wang等[30]研究發(fā)現(xiàn)，AS-IV通過(guò)調(diào)控TGF-β/Smads信號(hào)通路來(lái)下調(diào)TGF-β1、α-SMA表達(dá)及減少Smad2/3的磷酸化延緩腎纖維化；Chen等[31]發(fā)現(xiàn)，AS-IV能明顯上調(diào)miR-21轉(zhuǎn)錄水平，促進(jìn)成纖維細(xì)胞增生使模型大鼠傷口愈合；Zhang等[32]研究表明，AS-IV能增加miR-122的表達(dá)并減少miR-221的表達(dá)以治療肝細(xì)胞癌。

阿魏酸(ferulic acid，F(xiàn)A)是當(dāng)歸的主要活性成分之一，有抗炎、抗氧化、抗癌等生物活性。在實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)A可以直接或間接地抑制腎纖維化發(fā)展；Wei等[33]研究發(fā)現(xiàn)，在NRK-52E中，F(xiàn)A通過(guò)調(diào)控Smad2/3、ILK及Snail信號(hào)通路以明顯抑制TGF-β1，使TGF-β1誘導(dǎo)E-cadherin的表達(dá)增加而α-SMA表達(dá)減少，從而進(jìn)一步抑制EMT進(jìn)程；Xu等[34]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)A能通過(guò)抑制TGF-β1的分泌減少細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1和2的磷酸化作用及Smad的轉(zhuǎn)錄活性，明顯減少ColI和FN表達(dá)，進(jìn)一步抑制肝星狀細(xì)胞活性。

川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)是川芎的主要活性成分之一。研究發(fā)現(xiàn)，TMP能有效防治腎小管間質(zhì)纖維化，延緩腎衰竭的發(fā)生發(fā)展；Wu等[35]研究發(fā)現(xiàn)，TMP能阻斷上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化，使α-SMA表達(dá)明顯減少，E-cadherin表達(dá)明顯增加，從而抑制EMT進(jìn)程，進(jìn)一步延緩腎纖維化；Lu和Yuan等[36-37]發(fā)現(xiàn),在大鼠UUO模型中，TMP延緩腎纖維化的作用機(jī)制表現(xiàn)在兩方面：一是抑制TGF-β1、CTGF、α-SMA表達(dá)和Col沉積，二是增加Smad7、SnoN蛋白表達(dá)，表明川芎嗪能有效防治腎小管損傷,延緩腎間質(zhì)纖維化；Cheng等[38]研究發(fā)現(xiàn)，在NRK-52E中，TMP能抑制阿霉素誘導(dǎo)的NF-κB激活，減少細(xì)胞凋亡，從而延緩腎小管間質(zhì)纖維化；Li等[39]發(fā)現(xiàn)，TMP能增加miR-9表達(dá)，且TMP與miR-9聯(lián)合治療能明顯降低α-SMA和ColI的表達(dá)，抑制肝纖維化。

齊墩果酸(oleanolic acid，OA)是牛膝的主要活性成分之一。研究表明，OA能抗氧化應(yīng)激，減少細(xì)胞凋亡和ECM表達(dá)等，對(duì)腎臟有保護(hù)作用，并能延緩腎纖維化；Hong等[40]在環(huán)孢素A誘導(dǎo)的小鼠腎損傷實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，OA能明顯抑制α-SMA表達(dá)增加，還能促使抗氧化關(guān)鍵因子核因子相關(guān)因子2的表達(dá),從而增加細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激能力，減少細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)的發(fā)生，從而延緩腎纖維化；Lee等[41]證實(shí)，OA抑制并改善高糖誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生，還可抑制TGF-β、Smad2/3信號(hào)通路及α-SMA表達(dá)并減少細(xì)胞凋亡，從而減緩腎纖維化和蛋白尿的產(chǎn)生。Zhang等[42]表明，OA可以降低CTGF、TGF-β及TNF-α水平，明顯降低ColⅠ和ColⅢ表達(dá)，從而抑制腎纖維化；Zhao等[43]研究發(fā)現(xiàn)，在肺癌細(xì)胞中OA可以通過(guò)調(diào)節(jié)miR-122的表達(dá)起到抗癌細(xì)胞增殖的作用；Yi等[44]研究發(fā)現(xiàn)，OA能誘導(dǎo)miR-132表達(dá)增加以發(fā)揮營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)的作用。OA通過(guò)抑制TGF-β、smad2/3、α-SMA的表達(dá)及ECM異常積聚，調(diào)控miRNAs以發(fā)揮抗氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡、降脂等多種作用，在延緩腎纖維化的機(jī)制方面值得探究。

綜上我們可推測(cè)，miRNA可以作為中藥方劑及其組分直接或間接介質(zhì)并成為治療CKD的重要靶點(diǎn)，從而產(chǎn)生對(duì)腎臟的保護(hù)作用以延緩腎纖維化的進(jìn)程。

3 結(jié)語(yǔ)

慢性腎衰竭嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的生命健康，而CKD是導(dǎo)致慢性腎衰竭的主要原因。腎纖維化是各種CKD發(fā)展為慢性腎衰竭的必經(jīng)之路。CKD在我國(guó)乃至世界的發(fā)病率都較高，且至今沒(méi)有有效的治療手段，漫長(zhǎng)的病程加重患者家庭和社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此對(duì)腎纖維化病變機(jī)制的研究就顯得尤為重要。腎纖維化的機(jī)制是延緩腎纖維化病變發(fā)展、保護(hù)腎臟功能和減少慢性腎衰竭發(fā)病率與患病率的關(guān)鍵。

腎纖維化的發(fā)病機(jī)制主要體現(xiàn)在纖維化相關(guān)細(xì)胞因子所促進(jìn)EMT進(jìn)程及ECM異常積聚等方面，各細(xì)胞因子相互影響、相互作用，僅僅調(diào)控單一環(huán)節(jié)很難有理想的治療效果。結(jié)合CKD的研究現(xiàn)狀可發(fā)現(xiàn)，miRNA與腎纖維化的發(fā)生機(jī)制有密切聯(lián)系。miRNA通過(guò)調(diào)控以TGF-β/Smads為代表的信號(hào)通路影響腎纖維化進(jìn)程，中藥方劑及其組分在延緩腎纖維化方面的作用與TGF-β/Smads等信號(hào)通路關(guān)系密切，因此miRNA和中藥活性成分的關(guān)系值得探討與研究。課題組研究表明，芪歸益腎方能通過(guò)抑制TGF-β/Smad/ILK信號(hào)傳導(dǎo)通路來(lái)明顯增加功能蛋白nephfin的表達(dá)，并減少Vimentin表達(dá)，保護(hù)足細(xì)胞的完整性，減輕腎小管-間質(zhì)損傷以保護(hù)腎功能，從而抑制腎纖維化的發(fā)展[45-46]。此外，芪歸益腎方通過(guò)對(duì)TGF-β1 /Smads信號(hào)通路及其下游信號(hào)通路磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K)的抑制，以減少ECM成分的異常聚集，從而延緩腎纖維化進(jìn)程[47]。

綜上，可以把miRNA視為中藥方劑及其組分延緩腎纖維化的直接或間接介質(zhì)，通過(guò)對(duì)單味中藥及其有效提純物、中藥復(fù)方的應(yīng)用及多途徑、多層次、多靶點(diǎn)的精準(zhǔn)治療，發(fā)揮中醫(yī)藥延緩腎纖維化的重要作用，把中醫(yī)藥運(yùn)用到治療腎臟疾病的過(guò)程中。而在現(xiàn)有的研究中，miRNA與中醫(yī)藥相關(guān)延緩腎纖維化的研究較少，是目前探索研究的重點(diǎn)。

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