三伏貼對(duì)支氣管哮喘慢性持續(xù)期患者T淋巴細(xì)胞和肺功能變化的影響※

劉 陽(yáng)朱國(guó)清劉錦紅郭永娟屈亞靜歐陽(yáng)曉慧

（1 唐山市中醫(yī)醫(yī)院肺功能科，河北 唐山 063000；2 唐山市古冶區(qū)醫(yī)院內(nèi)一科，河北 唐山 063000）

支氣管慢性持續(xù)期指哮喘急性發(fā)作得到控制，每周仍有哮喘癥狀發(fā)作，雖然不頻繁但對(duì)患者睡眠及日常活動(dòng)仍有影響的病情持續(xù)狀態(tài)[1]。支氣管哮喘慢性持續(xù)期患者仍有臨床癥狀，需要持續(xù)藥物治療，糖皮質(zhì)激素吸入治療是常用有效方法，但長(zhǎng)期治療對(duì)兒童生長(zhǎng)發(fā)育和成人骨質(zhì)、骨密度具有潛在影響，尋求中西醫(yī)結(jié)合的方式提高控制效果是目前臨床研究的熱點(diǎn)[2-3]。三伏貼融藥物治療、穴位刺激于一體，根據(jù)“春夏養(yǎng)陽(yáng)”的原則，于三伏天一年陽(yáng)氣最盛之時(shí)貼敷，使體內(nèi)陽(yáng)氣得天之助，利于貼敷藥物和經(jīng)絡(luò)共同作用增強(qiáng)治療效果，臨床用于防治哮喘取得良好效果，但目前較少見對(duì)三伏貼防治哮喘作用機(jī)制研究的報(bào)道[4]。研究顯示，支氣管哮喘的發(fā)病過(guò)程中輔助性T細(xì)胞（CD4+）與抑制性T細(xì)胞（CD8+）細(xì)胞的平衡紊亂是重要因素，糾正T淋巴細(xì)胞亞群平衡紊亂有助于治療支氣管哮喘[5]。本研究中筆者觀察了三伏貼對(duì)支氣管哮喘慢性持續(xù)期患者免疫功能的影響，旨在探討三伏貼治療支氣管哮喘的作用機(jī)制，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年—2016年每年7月就診的支氣管哮喘慢性持續(xù)期患者94例，采用數(shù)字表法將患者分為對(duì)照組和觀察組，每組各47例。對(duì)照組47例，男31例，女16例；年齡31～57 （43.21±8.37） 歲；病程1～21（9.14±5.39）年；病情分級(jí)：Ⅱ級(jí)24例，Ⅲ級(jí)23例。觀察組47例，男29例，女18例；年齡28～58 （43.74±9.12）歲；病程1～19（9.08±4.63） 年；病情分級(jí)：Ⅱ級(jí)22例，Ⅲ級(jí)25例。2組患者性別、年齡、病程、病情分級(jí)等一般資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、肺功能檢查比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組制訂的《支氣管哮喘防治指南》中支氣管哮喘慢性持續(xù)期的診斷標(biāo)準(zhǔn)且分級(jí)為Ⅱ～Ⅲ級(jí)[6]。

1.3 中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn) 參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中冷哮的辨證分型標(biāo)準(zhǔn)[7]：喉中哮鳴有聲，胸膈滿悶，咳痰稀白，面色晦滯，或有惡寒、發(fā)熱、身痛，舌質(zhì)淡，苔白滑，脈浮緊。

1.4 納入標(biāo)準(zhǔn) (1)同時(shí)符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)； (2)年齡18～60歲，性別不限； (3)入組前1周未應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、抗組胺藥、茶堿類藥物及白三烯藥物； (4)4周內(nèi)無(wú)呼吸道感染史； (5)對(duì)研究知情并簽署知情同意書。

1.5 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)合并惡性腫瘤、支氣管擴(kuò)張、肺纖維化、肺結(jié)杭、肺心病、慢性阻塞性肺疾病、嚴(yán)重肝腎功能和凝血功能障礙； (2)妊娠期或哺乳期婦女；(3)有長(zhǎng)期吸煙史者； (4)合并惡性腫瘤者； (5)精神疾病或認(rèn)知障礙患者； (6)擬納入其他臨床研究者。

1.6 剔除標(biāo)準(zhǔn) (1)不符合納入標(biāo)準(zhǔn)或有排除標(biāo)準(zhǔn)者；(2)依從性差未能完成整個(gè)療程者； (3)研究期間出現(xiàn)合并疾病，治療影響療效觀察者； (4)患者強(qiáng)烈要求退出研究者。

1.7 治療方法 對(duì)照組給予布地奈德氣霧劑（魯南貝特制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20030987，規(guī)格：0.1 mg/撳） 吸入，200 μg/次，3次/d，連續(xù)治療4周。觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予三伏貼治療，取生白芥子40 g，延胡索20 g，細(xì)辛20 g，生甘遂10 g，法半夏10 g，肉桂5 g，沉香5 g，樟腦1 g，冰片1 g共9味中藥研成粉末，用生姜汁調(diào)成膏狀即成。具體方法為每穴取藥約3 g，外用膏藥固定，敷貼時(shí)間為3～8 h。貼敷選穴：選取天突穴、膻中穴、腎俞穴、膈俞穴、肺俞穴、心俞穴、印堂穴，在初伏到末伏的40 d進(jìn)行治療。每隔10 d治療1次，共治療4次，去除三伏貼后禁服生冷、辛辣食物，末次貼敷后10 d觀察治療效果。

1.8 觀察指標(biāo)

1.8.1 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 治療前后抽取患者空腹靜脈血，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)血清T淋巴細(xì)胞亞群水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白介素-35（IL-35）、白介素-4 （IL-4）、干擾素-γ （INF-γ） 水平。

1.8.2 肺功能檢測(cè) 治療前后采用肺功能檢測(cè)儀檢測(cè)1秒鐘用力呼氣容積 (FEV1)、1秒用力呼氣量占用力肺活量比值（FEV1/FVC)和呼氣峰值流速 (PEF)。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 2組治療前CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。2組治療后CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+T細(xì)胞比值與治療前相比較均降低（P＜0.05），且觀察組與同期對(duì)照組比較均降低（P＜0.05）；2組治療后CD8+T細(xì)胞與治療前比較均升高（P＜0.05），且觀察組與同期對(duì)照組比較升高（P＜0.05）。見表1。

表1 2組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群比較 （x±s）

2.2 2 組治療前后IL-17、IL-35、IL-4、INF-γ和IgE水平比較 2組治療前IL-17、IL-35、IL-4、INF-γ和IgE比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性；2組治療后IL-17、IL-4、IgE水平與治療前比較均降低（P＜0.05），且觀察組與同期對(duì)照組比較均降低（P＜0.05）；2組治療后IL-35、INF-γ水平與治療前比較均升高（P＜0.05），且觀察組與同期對(duì)照組比較均升高（P＜0.05）。見表2。

表2 2組治療前后IL-17、IL-4、INF-γ和IgE水平比較 （x±s）

2.3 2組治療前后肺功能比較 2組治療前FEV1、FEV1/FVC、PEF比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；2組治療后FEV1、FEV1/PVC、PEF與治療前比較均升高（P＜0.05），且觀察組與同期對(duì)照組比較均升高（P＜0.05）。見表3。

表3 2組治療前后肺功能比較 （x±s）

3 討論

目前的研究顯示，支氣管哮喘與免疫功能紊亂密切相關(guān)，T淋巴細(xì)胞亞群失調(diào)尤其是CD4+T細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞比例失衡在支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[8]。體內(nèi)成熟T細(xì)胞可分化為CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞在不同細(xì)胞因子的作用下可分化為Th1、Th2、Th17三個(gè)亞群的效應(yīng)T細(xì)胞和Treg，Th1可分泌IL-2、INF-γ等細(xì)胞因子，可促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答，對(duì)哮喘具有抑制作用；Th2細(xì)胞可分泌IL-4、5、6、13等細(xì)胞因子，可促進(jìn)IgE合成、肥大細(xì)胞生長(zhǎng)，直接參與哮喘的發(fā)病和氣道炎癥形成，Th1/Th2失衡是支氣管哮喘發(fā)病的重要因素[9-10]。近年來(lái)的研究顯示，除Th1/Th2失衡外，Th17/Treg失衡也是支氣管哮喘發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制之一，Th17可分泌IL-17細(xì)胞因子，IL-17可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎性蛋白2，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞聚集，參與非嗜酸性粒細(xì)胞哮喘的發(fā)病過(guò)程；Treg細(xì)胞可分泌IL-35等細(xì)胞因子，在免疫抑制過(guò)程中發(fā)揮重要作用，支氣管哮喘患者體內(nèi)存在Th17功能增強(qiáng)和Treg細(xì)胞功能減弱[11]。CD8+T細(xì)胞又稱殺傷性T細(xì)胞，對(duì)Th1/Th2平衡具有調(diào)節(jié)作用，研究顯示，CD8+T細(xì)胞水平降低可使Th2細(xì)胞克隆增加，大量產(chǎn)生IL-4、IL5，并增加IL-4的增殖反應(yīng)，支氣管哮喘患者存在CD4+/CD8+T細(xì)胞失衡，急性發(fā)作期CD8+T細(xì)胞水平下降，CD4+/CD8+T細(xì)胞比值升高，緩解期上述指標(biāo)改善[12]。

三伏貼是天灸的一種，屬于穴位貼敷療法，中醫(yī)認(rèn)為三伏天為庚日，庚日屬金，與肺相配，是溫煦陽(yáng)氣驅(qū)散內(nèi)伏寒邪最好節(jié)氣，冷哮為陰邪所發(fā)，故于一年中陽(yáng)氣最盛而陰氣相對(duì)蟄伏之時(shí)治療為最佳時(shí)間[13]。本研究所用藥物中白芥子性溫，味辛，可溫肺豁痰利氣；玄胡味辛、苦，性溫，可活血散瘀，行氣止痛，氣行則水行；生甘遂瀉水逐腫，消腫散結(jié)等；總之，諸藥配伍精當(dāng)，以鮮姜汁為引，引導(dǎo)諸藥滲入經(jīng)絡(luò)發(fā)揮治療作用，共奏通經(jīng)活絡(luò)、調(diào)整陰陽(yáng)、溫肺祛痰、止咳平喘之功效。肺俞為足太陽(yáng)膀胱經(jīng)背俞穴，與肺相應(yīng)，又為肺的背俞穴，按照氣街理論，手太陰肺經(jīng)通于胸，其氣輸注匯聚于胸前及背俞，所以慢性咳嗽、咯痰、氣喘等疾病均可取與其氣街相對(duì)應(yīng)肺俞穴。定喘穴為經(jīng)外奇穴，臨床廣泛用于治療哮喘，有學(xué)者認(rèn)為定喘穴來(lái)源于哮喘患者在上背部的敏感區(qū)，后因治療效果顯著被醫(yī)家正式納入經(jīng)外奇穴，在現(xiàn)代醫(yī)家治療哮喘的取穴中僅次于肺俞居第二位，刺激定喘穴可增強(qiáng)交感神經(jīng)尤其是β2受體功能，改善氣道高反應(yīng)性，降低氣道阻力[14]。

本研究結(jié)果顯示，治療后觀察組CD4+/CD8+T細(xì)胞比值、IL-4、IL-17與對(duì)照組相比降低，IL-35、INF-γ、FEV1、FEV1/FVC、PEF與對(duì)照組相比升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果提示三伏貼治療支氣管哮喘慢性持續(xù)期可改善患者Th1/Th2、Th17/treg平衡，降低CD4+/CD8+T細(xì)胞比值，改善肺功能，療效優(yōu)于單純西藥治療，有利于支氣管哮喘控制，值得臨床推廣應(yīng)用。

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