淺析副結核病對奶牛場的影響及防控措施

文/李秀嶺 王 艷　王天梓

（北京市大興區動物疾病控制中心）

牛副結核病是一種由副結核分枝桿菌（Mycobacterium avium subspecies. Paratuberculosis，MAP）引起的慢性消耗性傳染病，1891年由Johne和Hothinghow首次發現該病，因而又稱約內氏病（Johne’s disease）[1]。該病呈世界性分布，感染牛會出現腹瀉，營養吸收不良，進行性消瘦等癥狀，進而導致奶牛產奶量下降[2，3]，肉牛屠宰價值降低，牛使用年限下降等[4]，給牛場帶來巨大經濟損失。本文從副結核病在當前奶牛場的流行現狀和臨床癥狀出發，分析副結核病對奶牛養殖場的影響，提出相關防控建議。

1　副結核病的特征

發病初期不表現任何癥狀，奶牛感染后直到2～5歲時才會出現臨床癥狀，感染途徑主要是通過消化系統，只有變態反應才能檢出。發病時臨床上表現為漸進性消瘦，周期性、頑固性下痢，下痢呈噴射狀、惡臭，糞便中常混有脫落的腸黏膜和血液。奶牛在亞臨床感染階段，排菌數較少，但出現臨床癥狀時，對排出的糞便進行細菌培養和鏡檢，糞便中含有大量可見的抗酸染色陽性的成團、成叢排列的小桿菌[1]。在發病的后期則極度消瘦，有時可見到下頜和腹下水腫，最后衰竭而死。

病死牛尸體極度消瘦，剖檢可見病理變化，如消化道和腸系膜淋巴結出現明顯病理變化，空腸、回腸和結腸前段，漿膜和腸系膜顯著水腫，腸黏膜增厚達3～20倍，并且形成明顯的皺褶。黏膜呈黃色或者灰黃色，皺褶凸起處常呈充血狀，并附有黏稠而渾濁的黏液，但通常無結節、壞死或者潰瘍病灶。

2　副結核病的流行概況

該病呈世界性分布，流行地區遍及五大洲：美國、英國、德國、加拿大、澳大利亞、意大利、丹麥、比利時、日本等養牛產業發達的國家，給這些國家帶來了很大的經濟損失[5]。1971年報道此病的國家有43個，1978年上升到168個。1996年美國國家動物健康監測系統（NAHMS）研究表明，超過10%的淘汰牛會表現出副結核臨床癥狀，隨機采集25～40頭奶牛中至少有2頭奶牛副結核檢測呈陽性。

1955年，我國最早在內蒙古自治區的呼盟謝爾塔拉牧場發現1例副結核疑似癥狀牛，后經北京農業大學確認為副結核病牛。此后遼寧、黑龍江、內蒙古、貴州、陜西等多地相繼發生本病。近年來由于奶牛、肉牛產業的迅速發展，生產規模逐漸擴大，集約化程度不斷提高，牛及其副產品的流動范圍越來越廣，副結核病的發病率也呈上升趨勢[1]。

3　副結核病給奶牛場帶來的經濟損失

由于副結核病引起患病牛消瘦、生產性能下降、飼料消耗增加及易感染其它疾病直至死亡，給奶牛養殖企業造成了巨大經濟損失。筆者對北京市多家奶牛場進行了調研，對副結核病對奶牛場造成的損失進行了淺析。

若簡單以純喂飼料成本計算：以單只牛的成本計算為例，1只犢牛從出生飼養到6月齡需要成本3600元，飼養到24月齡需要成本11550元。按照目前京津冀地區奶牛養殖業的行業平均水平，犢牛成本2500元/頭，成母牛成本15000元/頭。

從北京的奶牛場情況來看，副結核疾病在奶牛場的發病率普遍在10%～12%，而由于患病導致的生產性能下降占發病牛的8%左右。研究顯示，副結核病奶牛普遍會在產后0～60天被淘汰。目前，北京市場上的生鮮乳售價在3.5元/kg，綜合飼養成本，1頭被感染副結核的乳用牛被淘汰可造成的直接經濟損失為10000元以上（平均飼養成本800元/月）。規模在500頭左右的奶牛場，有8%存欄量的奶牛感染副結核病被淘汰，每年的經濟損失可高達30萬元，甚至更高。

直接經濟損失只是副結核為奶牛場帶來的危害之一，潛在威脅最嚴重的就是持續感染。母牛一旦感染，就會通過胎盤傳染給胎兒，引起持續性感染，如果犢牛正常產出，病菌能持續地進入成年期，臨床表現健康，但體內始終帶有病原菌，可以持續向牛群中釋放病原，是牛群中最危險的傳染源。

4　副結核病的診斷研究現狀

目前牛副結核主要以臨床診斷來判定疑似病例，再運用實驗室診斷進行確診。具體方法包括：直腸黏膜糞便檢菌法、細菌分離培養、變態反應、瓊脂免疫擴散試驗（AGID）、補體結合試驗（GFT）、酶聯免疫吸附法試驗（ELISA）、膠體金技術、細胞免疫測定法、核酸探針、PCR方法等。其中，直腸黏膜糞便檢菌法被公認是診斷牛副結核病最準確的方法[6]，尤其對排菌牛只的揭發率高，此法操作簡單、取病料方便直接，適用于現場診斷，深受牧場主的歡迎。細菌分離同樣被認為是世界上被推薦的活體定性最準確和可靠的方法，但由于檢出率低、糞便培養試驗操作復雜，費用昂貴，導致該方法在實際應用中受到很多限制[6]。補體結合試驗（CFT）是最早應用于本病的診斷方法，也是國際上診斷牛副結核病的常用血清學方法，但此方法結果存在假陽性的可能，而且操作復雜不利于大規模的檢疫。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）作為近年來應用比較多的方法，其敏感性和特異性均優于補體結合試驗，并且同時采用兩種方法檢測，ELISA的檢出率更高并且具有操作簡單適用于大規模檢疫的優點[7]。

5　防控對策

副結核病自1891年首次報道以來，如何進行有效的防控一直是研究人員和生產者探索的問題，因為病牛往往在感染后期才出現臨床癥狀，藥物治療僅暫時緩解癥狀，不能停止排菌，一旦停藥排菌量會恢復到用藥前，導致副結核病藥物治療常無效。并且對于傳染病的普遍防治措施——疫苗接種，在牛副結核病的防控中也存在困難，因為副結核病在1月齡前最易感，并且存在較高的垂直感染，因此僅靠主動免疫預防感染較困難。雖然由于上述原因，對于副結核病的防控問題沒能很好地解決，但發病較早的國家經多年的實踐，根據本國的實際情況，總結出一套較為實用的防控方法。

在日本，采用對疑似污染牛群進行ELISA檢測和糞便培養定期檢查，檢出陽性牛進行撲殺處理，國家給與80%的補償金。曾對某肉牛場的186頭妊娠母牛做了ELISA檢查，把其中的7頭陽性牛立刻隔離，同時對所有的牛進行糞便培養，3個月后證明7頭抗體陽性牛中有6頭排菌陽性，用這種方法防止了剩余的179頭新生犢牛的舍內水平感染。

歐美副結核病嚴重的國家由于流行面廣，感染率高，承受不了檢出撲殺的巨大經濟損失。經過長期試驗，他們認為對新生犢牛進行免疫注射，配合必要的獸醫衛生措施是防控該病最有效的辦法，如果嚴格執行這一防控措施，經過5～10年可以消除副結核病。目前他們使用的疫苗有兩種：一是弱毒活疫苗；二是滅活疫苗。英國及一些東歐國家采用弱毒活疫苗，而美國、挪威等國家使用滅活疫苗。兩種疫苗均使用效果很好，可降低90%的臨床發病率和使50%獲得抗感染能力[8]。

我國目前奶牛場普遍采取如下措施：對有副結核感染的牛群中的新生犢牛在7日內進行副結核滅活疫苗接種，同時將出生犢牛立即與母牛分開，不吸食初乳，而是對犢牛飼喂經80℃加熱滅菌20min[5]的消毒乳。犢牛要專人飼養，舍內清掃干凈，經常用來蘇兒等消毒。對成年牛每年定期進行3次皮內變態反應、補體結合試驗檢疫或ELISA試劑盒檢驗，檢出陽性牛后隔離飼養，一但發現臨床開放牛和隱性感染牛立刻撲殺，并對其可能污染的用具、場所進行徹底消毒。經過多年凈化，牛場的副結核病檢出率明顯下降。

[1] OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals[M]. Paris：OIE Press，2011.

[2] Benedictus G，Dijkehuizen A A，Stelwagen J. Economic losses due to paratuberculosis in dairy cattle[J]. Veterinary Record，1987，121（7）：142-146.

[3] Kudahl A B，Nielsen S S，Sorensen J T. Relationship between antibodies against Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis in milk and shape of curves[J]. Preventive Veterinary Medicine，2004，62（2）：119-134.

[4] Kudahl A B，Ostergarard S，Sorensen J T，et al. A Stochastic model simulating paratuberculosis in a dai ry herd[J] .Preventive VeterinaryMedicine，2007，78（2）：97-117.

[5] 谷立波，劉云志，朱恒義. 牛副結核病及其防制對策[J]. 吉林畜牧獸醫，2004（9）：13-15.

[6] 韓猛，張亮，王基隆，等. 山東省規模化奶牛場結核病與副結核病流行病學調查研究[J].中國農學通報，2014，30（14）：10-13.

[7] 何昭陽，韓有庫，顧萬鈞，等. 牛副結核ELISA診斷方法研究[J]. 畜牧獸醫學報，1991，22（1）：57-60.

[8] 林濤. 規模化奶牛場副結核快速診斷方法的比較：[碩士論文][D]. 蘭州：甘肅農業大學，2012.

本研究是奶牛產業技術體系北京市創新團隊階段成果。奶牛產業技術體系北京市創新團隊大興綜合試驗站針對副結核病對奶牛場的影響等問題展開調研，參與調研的成員有李秀嶺、王艷、王天梓，本文執筆人李秀嶺。