咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯合檢測對鼻咽癌篩查價值

劉春霞，林煒，周小娟，葉桂林，周茂華，吳偉，劉聯斌

（贛州市腫瘤醫院檢驗科，江西 贛州 341000）

鼻咽癌是指發生于鼻咽腔頂部和側壁的惡性腫瘤，發病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首。鼻咽癌主要發生于我國南方五省，即廣東、廣西、湖南、福建和江西，占當地頭頸部惡性腫瘤的首位[1]。東南亞國家也是高發區。EB病毒是Epstein和Barr于1964年首次成功地將Burkitt非洲兒童淋巴瘤細胞通過體外懸浮培養而建株，并在建株細胞涂片中用電鏡觀察到皰疹病毒顆粒，認為該病毒是多種惡性腫瘤（如鼻咽癌）的病因之一，它主要感染人類口咽部的上皮細胞和B淋巴細胞[2]。人體感染EBV后能誘生抗EBNA抗體，抗EA抗體，抗VCA抗體及抗NA抗體[3]。因此，我們對鼻咽癌和健康體檢者采取咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗體（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）的聯合檢測，通過對兩組數據進行的靈敏度和特異性的分析和統計。本研究旨在探討咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗體聯合檢測對鼻咽癌篩查價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2015年6月～2017年2月間在贛州市腫瘤醫院獲得病理明確診斷的鼻咽癌患者85例為觀察組；同期健康體檢者60例為對照組。觀察組中，包括有男48例，女37例，年齡20～83歲，平均（45.8±11.3）歲。對照組中，包括男34例，女26例，年齡21～80歲，平均（44.7±12.1）歲。兩組受試者年齡、性別等各項指標比較，差異無統計學意義。觀察組中，鼻咽癌患者按照TNM分期，Ⅰ期、Ⅱ期視為早期，Ⅲ期、Ⅳ期視為晚期。所有患者均符合臨床診斷標準[4]，自愿接受臨床檢查，并簽署了知情同意書。

1.2 研究方法 對觀察組、對照組分別展開咽拭子EBVDNA和EB病毒抗體（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）聯合檢測。抗體檢測：采集鼻咽癌患者治療前靜脈血5 ml，經化學發光法對VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA抗體進行檢測，所有檢測均嚴格按照試劑盒說明書進行，陽性標準：VCA-IgA＞4 AU/nl、EAIgA＞3 U/nl、NA-IgGrA＞2 AU/nl；咽拭子EBV-DNA檢測：經咽拭子刷采集受試者咽扁桃體上的分泌物，約3～5圈，而后送檢，經熒光定量PCR法進行檢測。陽性標準：EBV-DNA＞100 IU/ml記為陽性，低于檢測下限記為陰性。

2 結果

2.1 EBV四項指標聯合檢測診斷陽性率 EBV-DNA、VCAIgA、NA-IgG、EA-IgA單獨檢測的診斷陽性率分別為80.00%、96.47%、98.82%、57.65%，四項指標聯合檢測對鼻咽癌的診斷率為98.82%（P＜0.05），見表1。

1.3 統計學方法 本研究數據均用SPSS 22.0統計軟件處理，計量資料采用“”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

表1 EBV四項指標聯合檢測診斷結果統計

2.2 不同臨床分期鼻咽癌患者EBV檢測指標陽性率比較不同臨床分期患者的EBV檢測指標陽性率不同，Ⅰ期者聯合檢測陽性率為75%，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者聯合檢測陽性率均為100%，可見晚期患者陽性率高于早期患者（P＜0.05），并且四項指標聯合檢測對晚期患者的診斷陽性率達到100%，見表2。

表2 85例不同臨床分期鼻咽癌患者EBV檢測指標陽性率比較

3 討論

研究顯示，EBV感染與鼻咽癌發生之間，存在明顯的相關性[5]。EBV相關抗體在鼻咽癌診斷中，可產生一定的輔助作用，為目前臨床常用的鼻咽癌血清學診斷指標。除此外，在鼻咽癌患者血漿中，存在EBV-DNA高表達情況，并且有研究指出，EBV-DNA表達水平與腫瘤的發生、發展、分期、治療效果、預后、復發、轉移等存在明顯聯系[6]。

在患者由于一些鼻咽癌相關癥狀、表現第一次就診時，對其展開EB病毒血清學檢測，多可對鼻咽癌確診檢查的進行與否進行指導。EB病毒抗體血清學檢測，對于指導臨床后續工作具有重要意義[7-9]。因鼻咽癌的臨床癥狀具有非特異性，僅小部分患者在發病后需要進行進一步確診。因此，血清學檢查的主要目的對鼻咽癌的可能予以排除。因此，對檢查結果的靈敏度、準確度提出較高要求。研究證實，EBV DNA能夠對腫瘤消長情況進行靈敏反映，在鼻咽癌的診斷、治療、效果評價以及預后中，均具有指導意義[10]。曾有學者指出，EBV DNA檢測，對于EBV原發性感染早期診斷的臨床價值十分顯著[11]。目前，國內眾多學者已經開始對EBV-DNA血清學檢測引起重視，但是關于咽拭子EBV-DNA檢測的研究還不是十分深入。

曾有研究顯示，EBV感染的臨床表現與年齡存在明顯相關性，在獲得確診的EBV感染患者中，EBV-DNA陽性患兒年齡集中在2～5歲之間，EBV-VCA-IgM陽性者年齡多集中咋5～12歲之間，由此證實，EBV感染在整個兒童時期均會發生，5歲以上兒童會表現出典型傳染性單核細胞增多癥，年幼患兒以非典型EBV感染的表現為主。國外有學者指出，8個月以下患兒，因受到母體抗體的保護，因此8個月內EBV感染的幾率較小，并且對8個月以后的感染存在一定的抑制效果。

近幾年EBV-DNA檢測收到醫學界的推崇，PCR法的應用越來越廣泛。本研究針對咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯合檢測對鼻咽癌篩查價值進行評價，探討其對鼻咽癌的篩查價值。研究發現，四項指標聯合檢測對鼻咽癌的診斷陽性率為98.82%，顯著高于各指標單獨檢測的診斷率。不同臨床分期患者的EBV檢測指標陽性率不同，晚期患者陽性率高于早期患者。這一結果與相關文獻[12-14]報道結果相似，由此證實，咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗體聯合檢測對鼻咽癌篩查價值顯著高于各項指標單獨檢測，可顯著提高鼻咽癌診斷靈敏度，具有較高的篩查價值，值得推廣應用。

[1] 方盛華,陳艷貞,王碧榮，等.鼻咽癌骨轉移患者的生存危險分層分析研究[J].現代醫院,2015,15(3):29.

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[6] 蔡永林,鄭裕明,王偉,等.EB病毒抗體聯合檢測在鼻咽癌血清學診斷中的價值[J].南方醫科大學學報,2010,30(12):2746-2748.

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