咽拭子肺炎支原體-DNA檢測用于診斷兒童肺炎支原體肺炎的應(yīng)用價(jià)值

楊芬蓮 羅家怡 溫海鵬 陳惠敏

（1高明區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 佛山 528500）

（2高明區(qū)人民醫(yī)院輸血科 廣東 佛山 528500）

肺炎支原體是導(dǎo)致小兒出現(xiàn)急性呼吸道感染的主要病原體，對患兒的身體健康造成較大威脅。支原體肺炎的早期表現(xiàn)多不典型，臨床診斷難度較大，往往需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，其中咽拭子肺炎支原體-DNA檢測是近年來較為常用的方法[1]。本研究以本院2015年1月-2017年2月收治的120例兒童肺炎支原體肺炎患兒為研究對象，探析咽拭子肺炎支原體-DNA檢測用于診斷兒童肺炎支原體肺炎的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果作如下報(bào)道。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將本院2015年1月-2017年2月間收治的120例兒童肺炎支原體肺炎患兒作為研究對象，120例患兒均實(shí)施咽拭子肺炎支原體-DNA檢測以及肺炎支原體-IgM檢測，男66例，女54例，年齡6個(gè)月～14歲（5.7±1.2）歲；33例年齡＜1歲，29例1～2歲，30例3～5歲，28例6-14歲。

1.2 方法

咽拭子肺炎支原體-DNA檢測方法：于清晨患兒尚未進(jìn)行口腔清潔、未進(jìn)食、未飲水前（對于哺乳期的嬰兒要停止納奶2h以上）進(jìn)行檢驗(yàn)，使用無菌拭子對患兒咽部的分泌物進(jìn)行采集并送檢。試劑盒均由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供，具體檢驗(yàn)操作方法均要依據(jù)相關(guān)說明書嚴(yán)格進(jìn)行：向采集分泌物中加入4倍體積的滅菌生理鹽水，震蕩2～3次，混勻后吸取1.5ml置入離心管中進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速控制為12000r/min，處理時(shí)間為5min，離心完成后將上清液去除，并向沉淀中加入50μL的DNA提取液混勻后進(jìn)行100℃恒溫處理，時(shí)間控制在10min左右，進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速與時(shí)間同之前相同，取2μl進(jìn)行RCR擴(kuò)增。

肺炎支原體-IgM檢測方法：取患兒靜脈血2～3ml，以37℃保存1h，進(jìn)行低速離心處理，離心時(shí)間為10min，將血清分離后進(jìn)行檢驗(yàn)。使用低效價(jià)顆粒凝集實(shí)驗(yàn)試劑盒，依據(jù)說明書進(jìn)行操作，均設(shè)陰性、陽性對照，以滴度≥1∶80判定為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料（%）行χ2檢驗(yàn)，顯著性水平為P＜0.05。

2.結(jié)果

2.1 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測組檢出陽性率87.5%（105/120）明顯高于肺炎支原體-IgM檢測組71.7%（86/120），（P＜0.05）。

2.2 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測不同年齡組中3～5歲組患兒的陽性檢出率最高，見表1。

表1 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測不同年齡組支原體肺炎檢出陽性率的比較

3.討論

支原體肺炎患兒的臨床表現(xiàn)多不具有典型性，臨床診斷多需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，目前臨床應(yīng)用較多的檢驗(yàn)方法有支原體分離培養(yǎng)、特異性抗體檢驗(yàn)等等，其中支原體分離培養(yǎng)的時(shí)間較長，在常規(guī)檢驗(yàn)中應(yīng)用并不十分廣泛；冷凝集檢驗(yàn)方法雖較為簡便，但敏感性以及特異性相對較差，其陽性檢驗(yàn)結(jié)果也可能是由流行性感冒、傳染性單核細(xì)胞增多癥等引發(fā)[2-3]。近年來隨著臨床醫(yī)療水平的不斷提高，咽拭子肺炎支原體-DNA檢測得以在臨床推廣應(yīng)用，該種檢驗(yàn)方法利用熒光定量PCR技術(shù)，不僅有效減少可擴(kuò)增產(chǎn)物污染風(fēng)險(xiǎn)，提高檢驗(yàn)特異性，而且也不會受到患兒年齡、病程以及用藥情況的影響，臨床具有較高的診斷準(zhǔn)確性[3]。

本研究中，對120例兒童肺炎支原體肺炎患兒實(shí)施了咽拭子肺炎支原體-DNA檢測以及肺炎支原體-IgM檢測，結(jié)果顯示前者的檢驗(yàn)陽性率顯著高于后者，另外對不同年齡段患兒咽拭子肺炎支原體-DNA檢測，結(jié)果可發(fā)現(xiàn)3～5歲組患兒的陽性檢出率最高，其次為6～14歲組。究其原因，可能與學(xué)齡前兒童在學(xué)校集體生活以及其自身免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全等因素有關(guān)，6～14歲組患兒陽性率低于3～5歲組，可能是因?yàn)樵撃挲g組患兒年齡增長，免疫力有所提高。

綜上所述，應(yīng)用咽拭子肺炎支原體-DNA檢測診斷兒童肺炎支原體肺炎，準(zhǔn)確率較高，具有較好的應(yīng)用價(jià)值，可作為早期診斷小兒肺炎支原體肺炎的方法。

【參考資料】

[1]楊麗娟,許美善. 咽拭子肺炎支原體-DNA檢測診斷兒童肺炎支原體肺炎的價(jià)值[J]. 中國婦幼保健,2017,32(8):1671-1673.

[2]劉香花,穆義英,趙玥,等.肺炎支原體DNA檢測對兒童肺炎的診斷價(jià)值[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2016,26(22):3248-3249.

[3]楊文青,呂曉麗,李銳成,等.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肺炎支原體DNA在小兒肺炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014,35(4):416-418.