田戈
(濟南市章丘區畜牧獸醫局,濟南 250200)
臨床上該種疾病主要會導致鴨出現肝臟病變、肝臟腫大等癥狀,在肝臟表面還會出現針尖到粟粒大小的出血點,同時,患病鴨還會出現典型的神經癥狀。隨著日齡的下降,該種病毒造成的危害和死亡率逐漸升高,主要危害3~20日齡的雛鴨,傳播速度快。鴨病毒性肝炎發生時間無規律,各個季節都可能引發該病,其中由于冬春季節低溫以及其他因素的刺激,導致鴨群頻繁接觸,增加發病幾率,同時易導致病毒快速流行傳播。由于該種病毒造成的死亡率較高,高達62%~95%[1]。病毒主要經呼吸道和消化道傳播,健康鴨通過接觸被污染的環境或者直接與患病鴨接觸,導致病毒傳播。養殖場飼養條件較差,飼料營養價值不高,維生素、礦物質嚴重缺乏,密度過大,地面潮濕,有毒有害氣體積累,均可以促使該種疾病傳播流行。急性期的患病鴨在出現臨床癥狀后,十幾分鐘內出現死亡。新疫區常呈現爆發流行,腦溢血會導致鴨群反復感病,通常死亡率較低,成為疫病流行傳播的源頭。
該病主要由Ⅰ型、Ⅲ型鴨肝炎病毒引起,臨床上以Ⅰ型鴨肝炎病毒危害最為嚴重。在自然感染情況下,只有鴨能發生該病,且只有小于5周齡的雛鴨出現發病,尤其是小于3周齡的雛鴨最容易感染該病。成年鴨感染后通常沒有任何臨床癥狀。在人工感染的情況下,可使雛鵝、雛火雞、雛珍珠雞、雛雉等出現發病。該病主要經呼吸道和消化道傳染,且傳染性非常強,能使整個鴨群中的所有易感雛鴨迅速感染發病。治療痊愈后的病鴨能持續8星期帶毒,繼續作為傳染源,而野生鳥類能在短距離內作為機械帶毒者傳播病毒,同時鴨舍中生活的鼠類也能作為該病毒的貯存宿主,進而在一定程度上造成該病的擴散。該病在孵化雛鴨的階段比較容易發生,如果環境衛生條件和飼養管理水平差,易誘使該病的發生。
Ⅰ型DHV是部分環狀的小RNA病毒,歸類于嗜肝病毒科、腸道病毒屬,病毒呈球形或類球形,部分病毒可以在56 ℃的環境下存活1 h;62 ℃的環境下,需經30 min才能全部滅活。鴨肝炎病毒是一種抵抗能力很強的病毒,在自然環境中能長期生存。在鴨肝炎病毒污染的育雛室內可以存活70 d以上,潮濕的糞便環境內能存活37 d以上,4 ℃環境下能存活2年,-20 ℃環境能存活數年。鴨肝炎病毒侵害鴨后,通常具有一定的潛伏期,潛伏期長短與鴨日齡有密切關系,最長為4 d,最短在24 h內發病。由于該種病毒具有很強的傳染能力,鴨群中一旦出現該種疾病,常會在較短時間內波及整個鴨群,導致出現多種臨床癥狀。發病初期患病鴨精神萎靡不振,神情呆滯,采食下降,頭頸緊縮,雙翅下垂,羽毛雜亂,不能正常行走,臥地不起,雙眼緊閉。發病嚴重的患病鴨食欲停止,離群獨居,臥地不愿意行走,呈現昏迷狀態,在較短時間內死亡。有的患病鴨在出現上述癥狀的同時,還會表現出明顯的神經癥狀,全身肌肉痙攣,震顫抽搐,患病鴨側向臥地不起,不能正常行走,強迫患病鴨行走,左右搖擺,雙腳顫抖,倒地后,雙腳不斷空蹬,在地面旋轉,呼吸極度困難。臨死前,頭頸反弓。有些最急型的病例,常看不到臨床癥狀,突然倒地死亡。將病死鴨解剖后,發現臟器普遍病變,在肝臟組織表面可發現有粟粒大小到針尖大小的出血點,肝臟組織變脆。膽囊腫大明顯,膽汁呈現淡綠色,脾臟淤血腫大,外觀血管呈現紫色、樹枝狀[2]。
該病毒傳播速度比較快,可在幾小時內波及全群,給養殖戶帶來較大損失。發病初期,雛鴨表現的癥狀各不相同,主要表現:精神沉郁、萎靡,縮頭縮腦,兩翅下垂,食欲降低、甚至廢絕,行動緩慢、呆滯,個別雛鴨表現為離群獨處,不能隨群走動,甚至出現昏迷,最終死亡;有些病鴨則出現抽搐、抖動,行動不穩,甚至呼吸困難、倒地旋轉、頭頸背向,直至死亡,因此也被稱為“背脖病”。有些病例發病很急,不出現任何癥狀倒地死亡。剖解后,肝臟表面有米粒和針尖大的出血點,質地柔軟易碎;膽囊腫大,膽汁呈淡綠色;有的脾腎腫大淤血;血管呈暗紫色樹枝狀。根據發病癥狀和病理學變化,可以對病情做出初步診斷,但要確診,還需進一步進行病毒學檢測。目前鴨肝炎病毒檢測中,應用較為靈敏的檢測方法,主要包括瓊脂免疫擴散、血液凝集、熒光免疫、膠體金免疫、酶聯免疫吸附等試驗。
鴨病毒性肝炎的實驗室診斷方法較多,但較常用的是血清學診斷。血清學診斷前需進行病毒分離。無菌采集剛死或瀕臨死亡鴨的肝臟,按病毒性疾病的病料采集和處理的常規方法操作,制作無菌病料濾液,凍存備用。按常規處理接種10~12日齡的鴨胚,收集死亡鴨胚的尿囊液,作為病毒的分離液。①中和試驗。采集上述收集的尿囊液,其中含有待檢病毒與已知鴨病毒性肝炎各型的陽性血清進行中和試驗,根據結果可確診待檢的病毒及其血清型。我國對鴨病毒性肝炎的確診及鴨病毒性肝炎病毒血清型的判定大多采用此法。②血清保護試驗。10~17日齡易感健康的雛鴨40只,分成4組,1~3組為試驗組,4組為對照組。1~3組的雛鴨分別注射已知抗鴨病毒性肝炎Ⅰ型、D型、EI型3個血清型的高免血清,皮下注射,1~2 mL/只,4組注射同量的生理鹽水。12~24 h后,全部雛鴨注射1∶10稀釋的尿囊液,0.5 mL/只,飼養觀察7 d。如果對照組(4組)的雛鴨80%~100%死亡,而試驗組雛鴨80%~100%存活,可判定分離毒株為鴨肝炎病毒;如果只是某1個或2個試驗組雛鴨80%~100%存活,則分離毒株為對應血清型的鴨肝炎病毒。鴨病毒性肝炎的血清學診斷還有酶聯免疫吸附試驗、酶標Dot-ELISA法、瓊脂擴散試驗、凝集試驗、膠體金免疫電鏡技術等[3]。
近2年,山東省鴨業得到迅速普及和長足發展,沂南縣肉鴨存欄達4 800萬只,出欄2 500萬只;加工肉鴨2 600萬只,鴨肉產量達2.2萬t。其養殖規模位居全省第3位,但經常出現雛鴨死亡的現象,即使幸存的雛鴨,也會受到影響,如生長發育緩慢等,因此鴨肝炎病毒給養鴨產業造成的損失巨大。通過鴨肝炎病毒鑒別試驗,從疑似鴨病毒性肝炎的病料中分離病毒,并且通過病毒中和試驗證明是否為鴨Ⅰ型肝炎病毒,為今后疫苗研制和卵黃抗體的制備奠定基礎。