Betatrophin在妊娠期糖尿病血清中的表達及臨床意義

杜珂珂，徐峰，李喜梅

妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期間最常見的并發癥，是導致不良妊娠結局的主要原因之一，同時被認為是2型糖尿病、高血壓和動脈粥樣硬化的先驅表現[1]。謝幸等[2]指出，隨著人們膳食結構的變化及 GDM 診斷標準的重新設定，GDM的診斷率呈上升趨勢。目前GDM的發病機制不明，近年來發現脂肪、肌肉因子和肝細胞分泌因子在GDM的發生發展中起著關鍵作用，促代謝因子（Betatrophin）作為新近發現的在人體肝臟組織表達的因子，已有多項臨床研究表明其與代謝綜合征密切相關[3-5]，并有學者認為Betatrophin參與了GDM的發生發展[6-7]。本研究擬選擇前瞻性病例對照研究的方法，觀察孕早期妊娠期糖尿病婦女、非糖尿病妊娠婦女及健康未孕育齡期婦女的血清Betatrophin水平，對Betatrophin與代謝指標的相關性進行研究，并探討其對GDM的預測價值。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年 1月至2016年12月在浙江省溫州市中心醫院產科門診進行定期的產前檢查并在本院進行分娩的孕婦作為研究對象，于孕7～13周行早期唐氏綜合征血清學篩查，同時預留空腹血標本。根據妊娠24～28周糖耐量試驗（OGTT）的結果，孕婦的空腹，口服葡萄糖后1、2 h血糖結果中有一項超過上限值（上限值依次為5.1、10.0、8.5 mmol/L），則診斷為 GDM。采用電腦隨機數字法從診斷為GDM的孕婦的總數中選取43例作為GDM組，同時隨機選取同期匹配的糖耐量正常孕婦46例為糖耐量正常組（NGT），另外選取同期在本院體檢中心體檢的健康未孕育齡婦女37例為正常對照組（NC）組。多胎妊娠、妊娠期高血壓、糖尿病合并妊娠、患有心肝腎疾病，短期內使用影響血糖、血脂藥物者均不納入本研究。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有參與試驗的孕婦于孕7～13周清晨進行采血，要求試驗對象需空腹8～12 h，抽取肘靜脈外周血3 ml，在室溫下靜置后3 000 r/min離心20 min后，將血清置于EP管內，保存于－80℃冰箱待檢。NC組婦女空腹8h以上體檢時抽取空腹血，血液樣本3 000 r/min離心20 min后，將血清置于EP管內,保存于－80℃冰箱備檢。

1.2.2 一般臨床資料的采集 對所有受試者首次入檢時詢問病史，記錄年齡，脫去鞋襪、身體直立測定身高、體質量，身高精確至1 cm，體質量精確至0.1 kg，計算體質量指數（BMI）；GDM組與NGT組需記錄采樣孕周，孕晚期住院分娩前再次測量體質量，計算孕期體質量增加量，新生兒出生后記錄體質量，精確至0.001 kg。

1.2.3 檢測方法 血清Betatrophin水平測定使用的ELISA法，試劑盒購于武漢EIAab生物科技有限公司（該試劑盒批內和批間變異系數分別是 4.8%和7.2%）。血漿總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、空腹血糖（FBG）采用德國西門子公司ADVIA 1650自動生化分析儀測定；空腹胰島素(FINS)采用美國雅培公司（ARCHITECT i2000SR）自動免疫分析儀測定；計算穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）=FBG（mmol/L）×FINS（mU/L）/22.5。

1.3 統計方法 應用SPSS18.0軟件進行統計學分析。計量資料以均數±標準差表示，多組比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-比較；兩組比較采用 檢驗。Betatrophin與糖脂代謝指標的相關性采用Pearson相關分析。采用Logistic回歸分析方法對影響血清Betatrophin水平的相關因素進行分析測算，血清Betatrophin對GDM的發病預測分析采用曲線分析。＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組臨床資料比較 GDM組和NGT組年齡、BMI與NC組差異均無統計學意義（均＞0.05）；GDM組與NGT組年齡、采樣孕周、BMI差異無統計學意義（均＞0.05）；GDM組孕期增加體質量、新生兒出生體質量高于NGT組，差異均有統計學意義（均＜ 0.05）。見表 1。

2.2 3組糖脂代謝指標及血清 Betatrophin水平水平比較 GDM組及NGT組TG、TC、HDL-C及LDL-C水平均高于NC組（均＜0.05）；GDM組TG高于NGT組（＜ 0.05）；但兩組TC、HDL、LDL水平差異均無統計學意義（均＞0.05）。GDM 組FINS、HOMA-IR高于NGT組及NC組，3組比較差異均有統計學意義（均＜0.05），3組FBG水平差異無統計學意義（＞ 0.05）。GDM組及NGT組血清Betatrophin水平均明顯高于NC組（均＜ 0.01）；GDM組血清Betatrophin水平顯著高于NGT組（＜0.01）。見表2。

2.3 血清Betatrophin水平與血糖、血脂、胰島素相關性分析 Betatrophin與孕期體質量增加、TG、新生兒出生體質量呈正相關（ =0.673、0.658、0.532，均＜0.05）；Betatrophin與 TC、HDL-C、LDL-C、FBG、FINS及HOMA-IR無明顯相關性（均＞ 0.05）。

2.4 Logistic回歸分析 以GDM為因變量，血清Betatrophin為自變量，GDM孕早期Betatrophin顯著高于非GDM孕婦，Logistic回歸分析校正孕期體質量增加、TG、HOMA-IR、FINS的影響因素后，顯示血清Betatrophin水平是GDM獨立危險因素（：1.014；95%：1.002～1.026＜0.05）。見表3。

3 討論

表1 3組臨床資料比較

表2 3組糖脂代謝指標及血清Betatrophin水平比較

表3 Logistic回歸分析各變量與GDM之間的相關性

圖 1 妊娠早期血清 Betatrophin水平對GDM發病預測的曲線

國內外多項研究表明血清中 Betatrophin水平的升高與心血管疾病、糖尿病、肥胖、多囊卵巢綜合征等疾病的發病風險增加有關[8-9]。有學者指出，與健康孕婦相比，GDM的Betatrophin水平明顯升高，產后Betatrophin濃度顯著下降，多變量統計分析GDM的狀態是Betatrophin的獨立正相關預測因素[7]。

以往關于孕期Betatrophin的研究，多選擇妊娠24～28周行糖耐量試驗同時抽取血標本進行檢測，多項研究結果表明GDM患者外周血Betatrophin水平較糖耐量正常妊娠婦女明顯升高[7,10-12]。本研究采用前瞻性病例對照研究的方法，發現妊娠早期Betatrophin明顯高于非妊娠狀態，妊娠期糖尿病孕婦血清Betatrophin水平在孕7～13周已明顯高于糖耐量正常的孕婦，這表明GDM患者在妊娠早期階段血清 Betatrophin水平已顯著高于正常妊娠婦女，結合妊娠早期與妊娠中期研究結果，提示Betatrophin是GDM的重要血清標記物。

本研究表明血清Betatrophin水平與TG呈正相關，但與其他脂代謝指標TC、HDL、LDL無相關性。這與Trebotic等[10]及Wawrusiewicz-Kurylonek等[12]的研究結果一致，但與 Ebert等[7]及 Erol等[11]研究結論存在差異，可能與研究對象的種族、樣本的體質量指數、樣本量大小及測定方法差異相關。本研究認為Betatrophin水平上升與血脂變化關系密切，表明Betatrophin在脂代謝中存在一定的作用，推測 Betatrophin參與了脂代謝紊亂。Erol等[11]研究結果表明Betatrophin水平與FINS、HOMA-IR相關，但本研究未發現Betatrophin與FINS、HOMA-IR等指標存在相關性。鑒于 FINS與HOMAIR僅能評價空腹狀態下的胰島素水平和胰島素抵抗水平，故兩者無法全面地反映胰島素抵抗程度。所以需進一步采用多種及更優指標來評定胰島素抵抗，及其與Betatrophin的相關性，從而探討Betatrophin是否參與了胰島素抵抗。

臨床與研究資料表明即使在孕婦血糖控制良好的情況下，仍然有較高的機會分娩出大于胎齡兒及巨大兒，這說明在GDM孕婦中，除了血糖以外，胎兒的生長發育還可能與其他因素相關[13]。筆者發現GDM組血清Betatrophin水平明顯高于NGT組，且Betatrophin水平與新生兒出生體質量呈正相關，提示Betatrophin與GDM發生以及子代的生長發育密切聯系，Betatrophin水平能夠間接反映胎兒生長發育狀況。

本文 Logistic回歸分析顯示血清Betatrophin水平是 GDM 獨立危險因素。本研究提示以妊娠早期血清 Betatrophin＞246.08 pg/ml作為GDM早期診斷的界點，具有一定的準確性，且其靈敏度和特異度較高，陽性和陰性預測值較大，表明妊娠早期血清Betatrophin水平測定作為診斷試驗真實性較好。妊娠期婦女在臨床上診斷妊娠期糖尿病前其血清中Betatrophin水平已有變化，故通過對血清Betatrophin在孕早期的監測，能夠對GDM發病的預測及預防提供有效的實驗室依據。但本文提出的參考值與陰性預測值僅通過一次的斷面研究得出，觀察對象樣本量較少，今后尚需要擴大樣本量，并進行動態觀察加以驗證。

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