醫學分子診斷技術臨床帶教方法探討

張戰鋒，龐志宇，謝在春，陳久凱

（廣州中醫藥大學第一附屬醫院，廣東 廣州 510405）

分子診斷技術是以聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）技術為核心的新一代檢測手段，目前廣泛用于感染性疾病中的微生物鑒定及藥物敏感性檢測[1]、白血病及實體腫瘤診斷和個體化用藥基因位點[2]、優生優育檢測[3]等多個方面[4]，是各大、中型醫院檢驗科不可或缺的亞學科之一。作為被廣泛使用的新技術，PCR因其檢測原理的特殊性使其具有臨床中其他檢測技術（如ELISA、化學發光以及電化學發光等）無法達到的高靈敏性和高特異性，但其高靈敏性和高特異性的特點使該技術的影響因素同樣較廣[5]，實驗過程中任何一個小的錯誤或不當操作都可能導致非真實的檢測結果，這就要求技術操作人員具有較高的專業素質和責任心。實習生進入檢驗科PCR室往往是他們第一次真正接觸PCR技術，因此，對學生實習期間系統、全面的帶教是保證其學習效果的前提。筆者一直從事分子診斷工作，針對PCR以及實習帶教總結了一些心得體會，希望能夠為同行帶教提供一些參考。

1 實驗室整體介紹及重要概念構建

學生進科的第一天往往對分子診斷實驗室沒有整體認識，帶教教師可先對實習生介紹實驗室整體情況以及需要注意的事項和概念，讓實習生從宏觀上認識分子診斷技術應用中如何達到其質量要求。如首先介紹分子診斷室建立的時間，目前該實驗室檢測的項目及內容，實驗室的構成，如總共有幾個區，分別是什么，這樣分區的原因，不同分區之間嚴格區分并且流向單一，不同分區物品不可隨意移至其他區等[6]。同時介紹實驗室最為重要的“無污染”“無核酸”概念，介紹核酸污染常見的原因、表現、危害及處理方法[7]，重點強調污染在“防”而不在“治”的理念。

針對實驗室開展項目，整體介紹項目內容及實驗流程。如介紹所有的實驗流程大致分為3個部分：核酸提取、擴增及產物分析。核酸提取部分根據所提核酸為DNA或RNA的不同又有不同的方法，DNA常用的提取方法有化學裂解法和熱裂解法，RNA常用的提取方法有柱提法和磁珠法。擴增有熒光定量PCR和普通PCR，熒光定量PCR一般可以直接進行結果分析，而普通PCR往往需要后續產物檢測的步驟，如基于核酸雜交原理的HPV分型檢測項目。產物分析所需注意的地方應視具體項目而定。通過實驗室總體介紹，幫助實習生建立初步的PCR實驗室整體概念。

2 因材施教

由于實習生來自不同醫學院校，所以對分子診斷技術課程的學習并非一致，有的院校甚至沒有開展分子診斷相關課程。這種情況要求我們在帶教過程中不能千篇一律，對于基礎較好的學生應該結合教材、相關參考書補充和強化分子生物學相關理論知識。在接觸檢驗項目之前，首先熟悉檢驗項目的SOP文件，尤其是熟悉各項目的原理、應用及其臨床意義。這樣不僅是將理論知識融入實踐的一個良好過渡，更能讓實習生在開展實際操作之前對即將從事的工作有初步的感性認識，使他們能較快適應工作。對于沒有分子診斷相關知識背景的學生首先應關注其基礎知識的學習，對本實驗室所開展項目中的核酸提取、擴增及產物分析等步驟所涉及的基礎知識進行詳細、系統地講解，使學生能夠進行SOP文件閱讀及后面的操作，否則很容易導致其操作中錯誤的發生，以及對試驗中遇到的問題無法進行分析和解決，無法保證檢測質量。

3 教學相長

教學相長是一種普遍的教育教學經驗認識，也是現代教育教學改革的一種理念。古今中外都十分重視，并且積累了豐富的經驗。在我國教育教學體制改革浪潮下，教學相長越來越受到重視[8]。這里強調的是，教學相長這個詞往往用在教師方面，是帶教教師自我提升教學水平的方法。在實習帶教中我們發現師生之間積極互動、信息交換、角色轉換等多維互動模式都會收到好的教學效果。因此，“教學相長”這個方法可以作為實習生學習的一種途徑。對于一個教學醫院，實習生往往較多，帶教科室會根據情況將實習生分成多個小組同時在不同專業組進行學習，因此實習生來到各專業組的時間就有先后。先來的學生通過一段時間的學習已經基本掌握專業組內各個項目所要求學習的內容，對于后來的學生，帶教教師可以通過學生一對一帶教的方式讓學生教學生，而其則是對學生講解不清或錯誤的地方進行補充和更正。這樣不僅能使學生回顧所學內容，而且能由被動學習變為主動，及時發現自己掌握不牢內容并重點學習。對于后來的學生而言，學生與學生之間的交流和信息的傳遞會更容易接受。所以，在臨床帶教過程中“教學相長”教學模式同樣可以應用到實習生上。

4 理論和技能考核

完善的考核不僅是對學生學習過程的總結，也同樣是對臨床帶教效果的考驗。考核分為兩部分：理論和技能。理論考核主要針對實驗室項目所涉及的基本方法原理、注意事項等內容展開，這里值得一提的是，理論考核中同樣應包含典型案例分析、結果解釋等內容。技能考核則只是針對實際操作，對學生動手能力進行考查。但技能考核不僅僅是核酸提取及儀器使用，應該包含某個項目的所有流程[9]。比如試劑準備、樣本離心、加樣槍使用、核酸提取步驟、PCR儀開機、程序選擇、樣本編號、樣本錄入、結果分析及結果報告等方面。針對技能考核應編制合適的考核表格，表格中針對以上考核內容進行說明，在實習生整個操作過程中實時進行打分并記錄，在考核完畢后就考核中出現的錯誤及時與學生溝通。目前PCR項目多是手工操作，并且每個樣本的加樣量少且加樣孔密，在帶教過程中需著重培養學生操作過程中的專注力，否則極易發生樣品加錯孔或加樣量不準的現象，對結果造成較大影響。

5 新技術、新方法的學習和創新

PCR技術作為近些年發展最為迅速的檢驗亞學科之一，應用或基于該技術的產品層出不窮。實習生作為檢驗事業未來的主要實踐者，不僅要掌握基本的理論和技能，而且要意識到專業知識不斷學習和探索的重要性。目前很多基于PCR技術的新產品正逐步走向臨床，比如循環腫瘤細胞或DNA的檢測[10-11]、核酸提取的自動化儀器使用[12-13]等。在此值得一提的是，在學習的同時，對知識的總結和探索同樣是實習生需要重點培養的部分。這方面的培養最主要的方式就是論文寫作。目前大多數醫學院校對本科生均有寫論文要求，這也是醫學教育工作者逐漸認識到知識總結、創新對學生、對學科發展重要性的體現。當然，這些論文不是都要求有學術價值的，更看重的是對學習能力的培養，讓學生運用學到的知識、方法、理論來表述自己的看法和觀點。除此之外，結合我國國情，通過畢業論文還可以考查一個大學生最基本的學術素養和治學態度。所以，本科生的畢業論文更看重的是過程，從選題到資料收集，動手做或思考論證，再到后期的寫作修改，是一個最基礎的學術研究過程。

分子生物學技術鑒于其突出的檢測能力，經過短短十幾年的發展已廣泛用于多個行業。在醫學界中已經成為一種不可或缺的疾病輔助檢測手段[14-15]，是檢驗專業學生應該熟練掌握和運用的學科知識。實習生作為檢驗學未來發展的重要參與者，其實習過程不僅對自身具有重要作用，對學科的發展同樣具有重要意義。而帶教教師在很大程度上決定了學生在此過程中學習的好壞，因此，希望能夠通過本心得體會與檢驗帶教教師共同探討臨床帶教方法，以培養出優秀的檢驗后備人才。