乳腺癌分子生物學特征與磁共振成像特點分析

周劍萍 謝小紅? 顧錫冬 胡袁媛 周長玉

我國乳腺癌發病率位居城鄉女性首位，是危害居民生命健康的主要的惡性腫瘤之一，發病率在近十幾年呈現上述趨勢［1］。磁共振成像，在乳腺癌的診斷及評估中具有重要意義。近幾年乳腺癌的分子生物學特征與磁共振特點的相關性研究報道不一。本文探討磁共振成像特點與乳腺癌分子生物學特征的關系，為臨床提供無創預測乳腺癌生物學行為提供更多有價值的依據，以期能夠進行早期個體化治療。

1 臨床資料

1.1 一般資料 回顧性分析2015年6月至2017年6月浙江省中醫院131例行乳腺癌手術或活檢且有乳腺MRI資料的病例。所有病灶均經病理及免疫組織化學染色證實。均為女性，年齡 25～83歲，平均年齡51.2歲。

1.2 儀器與方法 （1）設備：3.0T超導型磁共振成像儀（Magnetom Verio，德國西門子），16通道乳腺專用相控陣線圈。（2）普通掃描：患者俯臥位，雙側乳腺自然下垂。先行雙側乳腺矢狀位T2加權成像（T2WI，加脂肪抑制）平掃，參數如下：TR/TE=4650/85ms，層厚4mm，層間距1.0 mm， 矩 陣 320×224，NEX：4，FOV=20cm×20cm。（3）多時相動態增強MRI檢查：3D FLASH序列（TR/TE=261ms/4.8 ms，反轉角70°），增強使用釓噴酸葡胺注射液（廣州康臣藥業有限公司），經肘靜脈留置針使用雙筒高壓注射器（OptistarTM LE，美國泰科）。通常用20ml對比劑，隨后注入20ml生理鹽水。動態增強9個時相，35s/時相，間隔20s，共采集8.02min，層厚4mm～2mm重疊掃描，掃描矩陣256×256。

1.3 圖像分析及數據采集 MR平掃結合增強影像特征，按形態學表現將病變的形狀分為類圓形、不規則形和分葉形；用隨機工作站軟件（Syngo）進行病灶動態增強數據分析，對病灶中強化最明顯的區域選取感興趣區，避開壞死、囊變及出血區，繪制時間信號強度曲線（TIC），將后者按照形態分成持續上升型（I型）、平臺型（ II型） 和流出型（III型）3型。同時獲得早期增強率（EPER）和達峰時間（TTP）等功能參數值。

1.4 （1）標本處理及染色：采用手術當天采集新鮮的乳腺癌組織標本，標本經10%中性福爾馬林液固定，組織脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，切片厚度4μm，采用HE染色和免疫組織化學染色。（2）染色結果判定：所有切片由病理醫師在光學顯微鏡下進行觀察，ER和PR判斷標準：陽性腫瘤細胞核＜1%為陰性，≥1%為陽性。Her-2判斷標準：（-）和（+）判定為Her-2陰性，（+++）為Her-2陽性，（++） 需進一步行免疫熒光原位雜交法（fluorescence in situ hybridization，FISH）檢測，基因擴增者定義為Her-2陽性，反之為陰性。Ki-67陽性表達位于癌細胞核，呈棕黃色顆粒，陽性表達率的判斷標準為：取任意10個高倍鏡視野，將其中陽性細胞所占比例的平均值定義為陽性細胞百分比，并結合2011 St .Gallen年國際乳腺癌會議關于乳腺癌分子分型共識［2］：ki-67表達≥14%為高增殖，＜14%為低增殖。

1.5 統計方法 采用 SPSS 22.0統計軟件。符合正態分布的計量資料以（x±s）表示，計量資料間比較用兩獨立樣本t檢驗；不符合正態分布的計量資料以M（Q25，Q75）表示，計量資料間比較用秩和檢驗；不符合正態分布的計量資料應用spearman等級相關進行分析；計數資料以率表示，用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER、PR、Her-2、ki-67與磁共振腫塊形態及時間信號強度曲線的關系 磁共振上乳腺癌腫塊形態分為3種：類圓形、不規則形、分葉形，與ER、PR、Her-2、ki-67表達差異無統計學意義（P＞0.05）。時間信號強度曲線分為上升型、平臺型、流出型，與ER、PR、Her-2、ki-67表達差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 ER、PR、Her-2、ki-67與腫塊形態以及時間信號曲線的關系

2.2 ER、PR、Her-2、ki-67與早期強化率的關系ER、PR以及ki-67表達與早期強化率經T檢驗與spearman相關性分析，差異無統計學意義（P＞0.05）。Her-2陽性、陰性乳腺癌的平均早期強化率分別為為1.602、1.428，her-2陽性乳腺癌的平均早期強化率高于her-2陰性，差異有統計學意義（t=-2.047，P=0.043）。見表 2、4。2.3 ER、PR、Her-2、ki-67與達峰時間的關系 PR、Her-2表達與達峰時間無統計學差異（P＞0.05）。ER陽性、ER陰性乳腺癌的達峰時間的中位數分別為178.00s、119.00s，ER陽性乳腺癌的達峰時間高于ER陰性，有統計學差異（Z=-1.983，P=0.047）。ER陽性表達與達峰時間呈正相關性，有統計學意義（rs=0.190，P=0.030）。ki-67高增殖、ki-67低增殖乳腺癌的達峰時間的中位數分別為174.00s、238.00s，ki-67高增殖乳腺癌的達峰時間低于ki-67低增殖，有統計學差異（Z=-2.556，P=0.011）。Ki-67陽性表達與達峰時間呈負相關性，有統計學意義（rs=-0.298，P=0.001）。見表 3、4。

表2 ER、PR、Her-2、ki-67與早期強化率的關系（x±s）

表3 ER、PR、Her-2、ki-67與達峰時間關系［M（Q25，Q75）］

表4 ER、PR、ki-67與早期強化率、達峰時間的相關性

3 討論

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，全球腫瘤流行病統計數據認為乳腺癌是中國女性發病率最高的癌癥［3］。乳腺癌早期發現、早期診斷、早期治療對臨床醫生和患者至關重要，是降低患者病死率及提高遠期生存率的關鍵。

乳腺癌的早期診斷主要依靠體格檢查及影像學檢查，常見的影像學檢查包括鉬靶、超聲、磁共振。近年來，隨著磁共振技術的發展，臨床效能已從以單一解剖、形態學改變為基礎的影像檢查而逐漸發展為能體現病變微環境，包括血流灌注、組織成分及代謝變化為主導的多元化檢查手段。MR功能成像包括動態增強MR成像、彌散加權成像、灌注加權成像、MR波譜成像等，在乳腺癌的診斷及評估中的應用日益廣泛［4］。有研究指出，對鉬靶與超聲檢查或者兩者聯合檢查陰性的中青年女性行乳腺MRI檢查，可明顯提高早期乳腺癌的檢出率［5］。

腫塊是乳腺癌的重要征象，由于乳腺癌的惡性侵襲行為導致腫塊形態的差異。對于腫塊形態與生物分子的關系，目前報道不一。有研究發現腫塊形體與Her-2的表達有關，更多的表現為不規則形態，其認為Her-2表達陽性，表明腫瘤侵襲性性高、易淋巴結轉移，易浸潤周圍組織，故使腫瘤向周圍生長，故表現為形態不規則；Her-2表達陰性，說明腫瘤浸潤性差，使腫瘤形態相對比較規則，故表現為卵圓形或分葉狀［6］。而有些研究認為腫塊形態與ER表達有關，不規則的腫塊能夠預測ER表達［7］。而本資料顯示腫塊形態與ER、PR、Her-2，ki-67無關，分析原因，可能與磁共振上腫塊形態判斷以及樣本量有關。

TIC類型能直觀的反映腫塊動態增強的血流動力學特點，對于鑒別乳腺良惡性具有重要價值。上升型通常為良性病變的強化特征；平臺型在良惡性病變中均可出現，但提示惡性可能性大；流出型通常為惡性病變的強化特征。有報道在乳腺良惡性病變診斷中，TIC的敏感性、特異性、準確性分別可達70%、94.4%、77.5%［8］。關于TIC與分子生物學特征的報道結果不一，部分研究報道稱TIC類型與ER、PR、Her-2、ki-67等均無相關性［6-7］，而王盈盈認為浸潤性乳腺癌的流出型和Ki67表達有關［9］。本資料結果顯示，TIC類型與ER、PR、Her-2、ki-67無相關性。理論上，乳腺癌表現為流出型表明腫瘤細胞分化低，新生血管多，血供豐富，腫瘤細胞更易出現Her-2高表達。本資料在TIC三種類型中，流出型的Her-2陽性表達率比上升型及平臺型高，但差異無統計學意義（P=0.166），可能擴大樣本量可得出陽性結論。

早期強化率反映病變早期強化階段的血液灌注情況，是腫瘤血管的通透性及組織的血流灌注的反映。腫瘤血供越豐富，則早期強化率越高。有研究認為早期強化率與ER、PR、ki-67無關［10］。本資料與上述報道符合。有研究者認為Her-2表達與早期強化率無相關性［11］，而有些學者認為早期強化率與Her-2陽性表達程度呈正相關，即早期強化率越高，Her-2陽性表達越強［10-12］。本資料中HER-2+的早期強化率高于Her-2-，差異有統計學意義（t=-2.047，P=0.043），提示早期強化率高，Her-2可能更多的表現為陽性，腫瘤血供豐富，惡性程度較高，預后不良，與上述報道大致符合。而Her-2+的治療則需要分子靶向藥物，聯合輔助化療可以改善患者預后。因此根據乳腺癌早期增強率情況可以間接評估患者預后，為臨床治療方案的選擇提供參考。

達峰時間即自動態增強掃描開始至腫瘤強化最明顯時所經歷的時間，反映血管阻力，與血容量和血流量有關。腫瘤惡性程度越高，通常達峰時間越短。有研究認為達峰時間與ER、PR、Her-2表達無相關性，與ki-67呈負相關［6］。而有的學者認為達峰時間與ER、PR陽性表達呈正相關，與Ki-67呈負相關［13］。在本資料中，ER陽性的達峰時間高于ER陰性者，有統計學差異（Z=-1.983，P=0.047）。ER陽性表達與達峰時間呈正相關性，有統計學意義（rs=0.190，P=0.030），表明達峰時間越高，ER陽性的可能性越大，預后越好。達峰時間與PR、her-2陽性表達差異無統計學意義。ki-67與達峰時間呈負相關，有統計學意義（rs=-0.298，P=0.001），即達峰時間越低，ki-67表達越高，提示預后不佳。

總之，磁共振是一種無創性檢查技術，磁共振特點與分子生物學存在一定關系，可以根據磁共振表現初步推測這些生物因子的表達狀況，間接預測乳腺癌的生物學行為和預后，在指導制定臨床治療方案具有一定價值。

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