慢病毒介導(dǎo)環(huán)狀RNA mmu-circ-0001033過(guò)表達(dá)抑制低氧性小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究

王堅(jiān) 胡明冬 唐曉丹 葛海燕 彭正羽 宋元林 夏世金

低氧性肺動(dòng)脈高壓(hypoxic pulmonary hypertension, HPH)是極高致死率和極高致殘率的病理生理綜合征，被冠以“假惡性”腫瘤之稱[1]，嚴(yán)重危害人們的健康，尚沒(méi)有根治的方法。低氧性肺血管結(jié)構(gòu)重建(hypoxic pulmonary vascular structural remodeling, HPVSR)是HPH形成的基本病理生理特征之一[2-3]。平滑肌細(xì)胞是組成肺血管壁最重要的細(xì)胞，低氧所致的肺平滑肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能異常是HPH形成的一種主要病理生理機(jī)制。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterial smooth muscular cells, PASMC)是組成肺動(dòng)脈結(jié)構(gòu)的主要細(xì)胞之一，在HPH形成中的作用至關(guān)重要。低氧能導(dǎo)致PASMC異常增殖，促進(jìn)HPVSR，加速HPH發(fā)生與發(fā)展[2，4-6]。基于PASMC結(jié)構(gòu)異常在HPH發(fā)生和發(fā)展中的關(guān)鍵作用，抑制PASMC異常增殖已成為HPH靶向治療的研究熱點(diǎn)。

近年來(lái)備受關(guān)注的環(huán)狀RNA(circular RNA, circRNA)有可能為闡明HPH的機(jī)制提供新方法。circRNA通過(guò)與疾病關(guān)聯(lián)的miRNA相互作用在疾病中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，為闡明疾病發(fā)生機(jī)制、干預(yù)靶點(diǎn)和新型診斷標(biāo)志物提供了新手段和新策略[7-9]。

我們前期的研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)HPH模型小鼠肺組織進(jìn)行circRNA芯片篩選和qRT-PCR驗(yàn)證，結(jié)果表明HPH模型組(與常氧組比較)小鼠肺組織中環(huán)狀RNA mmu-circ-0001033表達(dá)顯著下調(diào)[10]，由此推測(cè)環(huán)狀RNA mmu-circ-0001033可能參與HPH發(fā)生機(jī)制。為了闡明 mmu-circ-0001033在HPH形成中的作用，我們進(jìn)行環(huán)狀RNA mmu-circ-0001033過(guò)表達(dá)對(duì)低氧性PASMC增殖的影響實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)慢病毒介導(dǎo)mmu-circ-0001033轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的小鼠PASMC，觀察增強(qiáng)mmu-circ-0001033表達(dá)對(duì)低氧性PASMC增殖的影響，為進(jìn)一步研究mmu-circ-0001033在調(diào)節(jié)HPH中的作用與機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

材料與方法

一、材料及主要試劑

10只健康雄性C57BL/6小鼠(購(gòu)自上海杰思捷動(dòng)物有限公司)。……