賈培松,羅 影,賈文捷,努爾孜亞·亞力買買提,李婭婭,王振津,郝敬喆,魏 鵬
(1.新疆農業科學院植物保護研究所/農業部西北荒漠綠洲作物有害生物綜合治理重點實驗室,烏魯木齊 830091;2.溫泉縣農業技術推廣中心,新疆溫泉 836200)
【研究意義】阿魏蘑(Pleurotuseryngii)是新疆當地對生長在傘形花科阿魏屬植物根莖部的側耳屬野生菌的統稱[1-2],是一種食、藥用價值都很高的珍稀食用菌,其子實體肥大潔白、味道鮮美、營養豐富,深受廣大消費者青睞,素有“天山神菇”、“草原上的牛肝菌”之美稱[3-4]。在我國,野生阿魏蘑僅分布在新疆境內準噶爾盆地邊緣的戈壁阿魏灘上,分布量稀少[5-6]。目前,國內多年生產的栽培菌株均來自新疆野生子實體的分離[7-8],但新疆作為阿魏蘑野生資源的主產地,至今尚無可靠的優良品種,目前栽培品種主要引自內地,而近年國內栽培的阿魏蘑也存在菌株混亂、種性不穩定、菌種退化等問題[9]。因此,大量收集野生阿魏蘑資源,進行野生阿魏蘑菌株重要農藝性狀鑒定和評價研究,對阿魏蘑優良品種選育和推廣具有重要意義。【前人研究進展】1983年人工馴化栽培阿魏蘑成功,20世紀90年代開始規模化栽培,在此期間,曹玉清、牟川靜、陳忠純等最先在野生阿魏蘑菌株馴化方面做了大量研究工作,以新疆野生阿魏蘑菌株為材料先后馴化和培育了多個阿魏蘑品種在各地推廣[10-13]。近年,國內阿魏蘑品種多以前期馴化栽培品種為材料進行品種選育工作,品種農藝性狀比較試驗也多為市場上流通的品種間的比較。王波等[14]通過拮抗、菌絲體生長和出菇比較評價等方法對從國內收集的8個白靈側耳菌種進行分類,根據拮抗試驗將8個菌株劃分為4個類群,根據子實體形態特征可明顯地劃分為2類。王振河等[15]對外引進31個白靈菇栽培菌株進行拮抗試驗、菌絲生長速度測定、生長勢比較、平板出菇試驗和栽培試驗,將31個栽培菌株分成柱狀、馬蹄狀和手掌狀3大類。【本研究切入點】野生阿魏蘑資源是新疆特有食用菌資源,近年,項目組對環準噶爾盆地的阿魏灘進行了野生阿魏蘑資源的大量采集,保存了大量野生資源菌種。通過對阿魏蘑資源的遺傳多樣性研究,表明野生阿魏蘑資源具有豐富的遺傳多樣性,具有十分良好的馴化潛力[16-18]。近年來,國內栽培的阿魏蘑已存在菌種退化等問題,亟待選育新的優良品種。因此,研究以野生阿魏蘑菌株為材料,開展阿魏蘑菌株主要農藝性狀的評價研究,將對阿魏蘑優良品種選育和推廣具有重要意義。【擬解決的關鍵問題】通過阿魏蘑菌株的栽培出菇試驗,對野生阿魏蘑菌株進行主要農藝性狀鑒定和評價,明確試驗菌株的主要農藝特征,篩選出具有較好選育潛力的野生菌株,為阿魏蘑優良品種選育提供基礎材料和技術支持。
1.1 材 料
1.1.1 菌株
Pl.x0002株為阿魏蘑栽培菌株,作為對照菌株,經子實體組織分離純化獲得,為第四代母種;26株為野生菌株,經子實體組織分離純化獲得,均為第四代母種,保存于新疆農業科學院植物保護研究所。表1
表1 阿魏蘑供試菌株
Table 1 Tested strains of P. eryngii

編號No.生態型Ecotype來源Origin編號No.生態型Ecotype來源OriginPl.x0002栽培菌株青河縣Pl.x0033野生菌株裕民縣Pl.x0017野生菌株青河縣Pl.x0073野生菌株裕民縣Pl.x0018野生菌株青河縣Pl.x0075野生菌株裕民縣Pl.x0019野生菌株青河縣Pl.x0083野生菌株裕民縣Pl.x0020野生菌株青河縣Pl.x0061野生菌株石河子市Pl.x0008野生菌株托里縣Pl.x0064野生菌株石河子市Pl.x0009野生菌株托里縣Pl.x0067野生菌株石河子市Pl.x0051野生菌株托里縣Pl.x0068野生菌株石河子市Pl.x0052野生菌株托里縣Pl.x0069野生菌株石河子市Pl.x0071野生菌株托里縣Pl.x0070野生菌株石河子市Pl.x0024野生菌株裕民縣Pl.x0042野生菌株富蘊縣Pl.x0025野生菌株裕民縣Pl.x0044野生菌株富蘊縣Pl.x0026野生菌株裕民縣Pl.x0047野生菌株富蘊縣Pl.x0028野生菌株裕民縣
1.1.2 供試培養基
(1)PDA(Potato Dextrose Agar)培養基:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂粉20 g,補水至1 000 mL,pH自然(約為7.0);115 ℃高壓蒸汽滅菌30 min。
(2)棉籽殼培養基:棉籽殼 77.4%,麩皮 20%,白砂糖 1%,石膏粉 1%,過磷酸鈣 0.3%,尿素 0.3%,pH值調至6~7。
1.2 方 法
1.2.1 菌絲培養特征
取出保藏的阿魏蘑菌種接種至PDA培養基平板上活化7~10 d,使用打孔器沿菌落邊緣取相同菌齡直徑為5 mm的菌餅接種至PDA平板中央,于25℃暗培養。每天觀察菌絲生長情況,定期統計菌絲培養特征,包括:菌絲長速、菌絲濃密度、氣生菌絲濃度和菌絲長勢等指標。采用“十字”交叉法測量菌落直徑,計算菌絲生長速度,每種菌株設3個重復。
1.2.2 棉籽殼培養基上菌絲培養
依據培養料配方,按量稱取新鮮無霉變的棉籽殼,預濕,然后按量拌入其他輔料,含水量調至60%,pH值調至6~7,充分拌勻后裝袋(菌袋規格為13 cm×30 cm×0.04 cm的聚丙烯塑料袋,每袋培養料干重約0.15 kg)。裝好的菌袋于121℃高壓蒸汽滅菌2.5 h,冷卻至30℃以下搶熱接種,采用固體種接種方式。接種好的菌袋于溫度25℃,濕度60%的培養室進行培養。待菌絲長滿后,再培養5~7 d,進行出菇管理。
1.2.3 阿魏蘑栽培出菇
將已長滿菌絲體的菌袋置于零下15℃冰箱中進行低溫刺激20 d,然后將其轉入出菇房中進行出菇試驗,出菇房溫度控制在9~14℃,濕度控制在85%~95%。定期觀察出菇情況,對阿魏蘑菌株出菇情況進行統計,采集正常出菇的菌株的子實體,立即進行形態指標測定,主要測定指標包括:子實體重量、形狀、菌蓋大小、菌肉厚度、菌柄長度及菌褶形態等。每個菌株設3個重復,每個重復10袋。
1.3 數據處理
應用Excel 2010,SPSS 19.0軟件對數據進行數據處理、單因素方差分析(AVNOA)與相關性分析。
2.1 阿魏蘑菌株菌絲培養特征對比
研究表明,各菌株菌絲顏色基本均為白色,無明顯差異。在PDA平板上,各菌株菌絲長速差異顯著,對照菌株Pl.x0002的菌絲長速為5.24 mm/d,有3個菌株菌絲長速明顯高于對照菌株,占總數的11.11%,分別是Pl.x0025、Pl.x0042和Pl.x0071,菌絲長速分別為6.62、6.16和6.54 mm/d;有14個菌株的菌絲長速與對照菌株差異不顯著,菌絲長速為4.84~5.63 mm/d,占總數的51.85%;有9個菌株菌絲長速明顯低于對照菌株,菌絲長速為1.62~4.40 mm/d。各菌株在菌絲濃密、氣生菌絲和菌絲長勢方面差異顯著,但與菌絲長速的相關性分析顯示,無明顯相關性。以上結果表明,新疆野生阿魏蘑菌株具有較豐富的遺傳多樣性,具有較好的選育潛力。表1,表2,圖1

圖1 阿魏蘑菌株菌絲生長速度
Fig.1 The growth rate of P. eryngii mycelium
表2 阿魏蘑菌株菌絲培養特征描述
Table 2 The description of culture characteristics of P. eryngii

編號No.菌絲長速Growthrate(mm/d)菌絲濃密度Mycelialdensity氣生菌絲Aerialhyphae菌絲長勢GrowthvigorPl.x0002524e++++++Pl.x0017505fe+++++++++Pl.x0018492dfe+++++++Pl.x0019524e+++++++++Pl.x0020532e++++++++Pl.x0008375c+++++Pl.x0009279b+++Pl.x0051488dfe+++++++++++Pl.x0052440cdf++++++Pl.x0071654g++++++Pl.x0024484dfe+++++++++Pl.x0025662g+++++++++Pl.x0026485dfe+++++++++Pl.x0028294b+++++++++Pl.x0033162a++++++++Pl.x0073400c++++++++++Pl.x0075563ef+++++++++Pl.x0083530e++++++++++Pl.x0061510fe++++++Pl.x0064440cdf++++++++Pl.x0067506fe+++++++++Pl.x0068513fe+++++++Pl.x0069421cd+++++++Pl.x0070535e+++++++++Pl.x0042616fg++++++++++++Pl.x0044548ef+++++++++Pl.x0047386c+++++++
注:*菌絲長速后面的小寫字母代表顯著性差異(P=0.05)
Note:*The lower case letters behind the hypha growth rate represent significant differences(P=0.05)
2.2 阿魏蘑菌株子實體形態特征對比
研究表明,正常出菇的菌株有16株,占試驗總數的59.26%,出畸形菇的菌株有3株,占試驗總數的11.11%,不能出菇的菌株有8株,占試驗總數的29.63%。正常出菇的子實體中,菇型以掌形為主,共有13株阿魏蘑子實體菇型為掌形,占總數的81.25%,有3株為馬蹄形。各阿魏蘑菌株在子實體菌蓋長、寬、厚度特征方面差異十分顯著。各阿魏蘑菌株在子實體菌柄長、直徑特征方面差異較顯著。表3,表4,圖2
表3 阿魏蘑菌株出菇統計
Table 3 The statistics of cultivation test for P. eryngii strains

出菇情況Mushroom統計數量Number(strain)比例Rate(%)出菇正常Normal165926畸形Malformation31111未出菇Fail82963
表4 阿魏蘑菌株子實體特征
Table 4 The description of fruit body characteristics for P. eryngii

編號No.菇型Type菌蓋 Pileus菌柄 Stipe長Length(mm)寬Width(mm)厚度Thickness(mm)著生方式Position柄長Length(mm)柄直徑Diameter(mm)Pl.x0002掌形66.5856.5620.35側生17.1515.98Pl.x0017馬蹄形57.0040.0018.67中生27.0020.33Pl.x0008掌形84.3760.1724.51側生36.0234.72Pl.x0009掌形80.2484.5222.47側生41.6739.88Pl.x0052掌形72.6075.0523.30側生40.3337.67Pl.x0071掌形75.6457.0520.67側生40.4725.83Pl.x0024掌形49.7445.2221.04側生19.0524.35Pl.x0028馬蹄形72.0070.0031.33中生35.0034.00Pl.x0073掌形59.4750.4520.37側生17.6216.54Pl.x0075掌形80.0055.0023.11側生35.3331.67Pl.x0083掌形82.0854.0622.30側生22.3120.13Pl.x0061掌形99.0056.0025.67側生36.7030.33Pl.x0064掌形78.5061.9419.58側生10.8510.00Pl.x0068馬蹄形66.3850.8919.19中生15.6035.18Pl.x0069掌形75.9262.1621.31側生23.5021.70Pl.x0047掌形89.0461.4629.62側生12.5036.81

圖2 阿魏蘑菌株子實體特征
Fig.2 The fruit body characteristics for P. eryngii
2.3 阿魏蘑菌株產量對比
研究表明,野生阿魏蘑菌株的生物學效率差異很大,在11.50%~55.99%不等,平均生物學效率為31.49%。對照菌株Pl.c0002菌株的生物學效率為38.83%,只有Pl.x0047菌株的生物學效率明顯高于對照菌株,呈現極顯著差異,其生物學效率為55.99%;有5個菌株生物學效率與對照菌株相當,差異不顯著,分別為Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083,生物學效率分別為39.43%、38.13%、39.54%、35.48%和37.49%;有9個菌株的生物學效率明顯低于對照菌株,并呈現極顯著差異。以上結果表明,菌株Pl.x0052具有很好的豐產性,具有很好的馴化潛力,菌株Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0047、Pl.x0061和Pl.x0083豐產性與對照相當,可以作為進一步人工篩選的材料。表5
表5 阿魏蘑菌株的生物學效率
Table 5 The biological efficiency of P. eryngii strains

編號No.單菇重Weight(g)生物學效率Biologicalefficiency(%)顯著性差異 SignificantdifferenceP=0.05P=0.01Pl.x000258.2438.83fgFPl.x001717.2511.50aAPl.x000848.3232.21deDEPl.x000959.1539.43gFPl.x005259.3139.54gFPl.x007145.8030.53cdDPl.x002435.5223.68bBCPl.x002857.2038.13fgFPl.x007330.4820.32bBPl.x007543.4228.95cdDPl.x008356.2437.49fgFPl.x006153.2235.48efEFPl.x006419.8113.21aAPl.x006846.8431.22dDEPl.x006940.9227.28cCDPl.x004783.9855.99hG
注:* 小寫字母和大寫字母分別代表P=0.05和P=0.01水平上的顯著性差異
Note: * The lowercase and uppercase letters were represented significant differences atP=0.05 andP=0.01 levels respectively
2.4阿魏蘑菌株單菇重量與子實體特征相關性
鑒于阿魏蘑菌株的產量僅取一潮菇數據,而一潮菇就一個子實體,因此,對阿魏蘑菌株的單菇種(產量)與其子實體特征進行了相關性分析,研究表明,根據相關性系數R值平方,阿魏蘑單菇重與子實體特征的相關性大小依次為,菌蓋厚度>菌柄直徑>菌柄長度>菌蓋長度>菌蓋寬度,因此,阿魏蘑菌株的單菇重與子實體菌蓋厚度和菌柄直徑的相關性較強,這與阿魏蘑優良品種常規選育的目標十分相符。圖3~7

圖3 單菇重量與菌蓋長度相關性
Fig.3 The correlation of weight andpileuslength

圖4 單菇重量與菌蓋寬度相關性
Fig.4 The correlation of weight and pileus width

圖5 單菇重量與菌蓋厚度相關性
Fig.5 The correlation of weight andpileustheckness

圖6 單菇重量與菌柄長度相關性
Fig.6 The correlation of weight and stipe length

圖7 單菇重量與菌柄直徑相關性
Fig.7 The correlation of weight and stipe diameter
27個阿魏蘑菌株菌絲培養特征試驗結果顯示,各試驗菌株菌絲長速差異顯著,有3個菌株菌絲長速明顯高于對照菌株,僅占總數的11.11%,有14個菌株的菌絲長速與對照菌株相當,差異不顯著,占總數的51.85%。各菌株在菌絲濃密度、氣生菌絲和菌絲長勢方面差異顯著,但與菌絲長速的相關性分析顯示,無明顯相關性。阿魏蘑菌株栽培出菇試驗結果表明,正常出菇的菌株有16株,占試驗總數的59.26%。正常出菇的子實體中,菇型以掌形為主,共有13株,占總數的81.25%。阿魏蘑菌株在子實體菌蓋長、寬、厚度,菌柄長、直徑等特征方面差異十分顯著。阿魏蘑菌株產量對比分析結果表明,野生阿魏蘑菌株的生物學效率差異十分顯著,在11.50%~55.99%不等,平均生物學效率為31.49%。對照菌株Pl.x0002的生物學效率為38.83%,只有Pl.x0047菌株的生物學效率(55.99%)顯著高于對照菌株,產量增幅54.59%,具有很好的選育潛力。Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083等5個菌株生物學效率與對照菌株相當,差異不顯著。鑒于阿魏蘑菌株的產量僅取一潮菇數據,而一潮菇就一個子實體,因此,對阿魏蘑菌株的單菇種(產量)與其子實體特征進行了相關性分析,結果顯示相關性大小依次為,菌蓋厚度>菌柄直徑>菌柄長度>菌蓋長度>菌蓋寬度。以上結果表明,菌株Pl.x0047具有很好的農藝性狀特征,具有很好的馴化潛力,菌株Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083豐產性與對照相當,可以作為進一步人工選育的基礎材料。由于試驗菌株均為阿魏蘑野生菌株,其品質特性尚不穩定,因此,非常有必要對其豐產性、特異性和穩定性進行進一步檢測和試驗。
阿魏蘑主栽品種Pl.x0002在菌絲培養特征、子實體特性、豐產性等方面仍表現出較好的品種特性,仍適宜在實際生產中繼續栽培。通過阿魏蘑菌株主要農藝性狀對比試驗,野生阿魏蘑菌株Pl.x0047在豐產性和子實體特性方面均優于對照菌株Pl.x0002,豐產性上與對照菌株呈現極顯著差異,產量增幅達54.59%,因此,具有很好的馴化潛力。Pl.x0009、Pl.x0028、Pl.x0052、Pl.x0061和Pl.x0083菌株在豐產性上與對照菌株Pl.x0002相當,差異不顯著,但在子實體其他特征方面具有一定差異性,可作為進一步人工選育的基礎材料。
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