2017年河北省致病性大腸桿菌的耐藥性檢測與分析

馮書風 ，馬 晨 ，杜靜靜 ，張 誠 ，崔 歡 ，高文媛

（1.河北農業大學動物醫學院，河北保定071001；2.河北農業大學生命科學學院，河北保定071001；3.保定市疾病預防控制中心，河北保定071000）

致病性大腸桿菌病是由廣泛存在于自然界的致病性大腸桿菌引起的一種細菌性疾病，主要引起豬的腹瀉，表現腸毒血癥等癥狀[1]；引起禽大腸桿菌敗血癥、肉芽腫、氣囊炎等[4]。大腸桿菌病一直是獸醫臨床上的多發病，被我國的獸醫以及養殖戶高度重視，并且隨著我國養殖業集約化的迅速發展，該病愈加多發。又因為該病往往和其他病混合感染，增加了發病率和死亡率，對養殖業造成嚴重的經濟損失[2]。目前大腸桿菌的防治主要是依靠抗菌藥物，但是由于對抗生素的盲目且大量的使用，大腸桿菌對臨床上常用的抗菌藥物產生了不同程度的耐藥性[3]。為了了解和檢測大腸桿菌耐藥性的不同程度和發展趨勢，我們整理了2017年河北省200例中分離出來的致病性大腸桿菌用紙片擴散法進行的9種抗菌藥物的情況，希望為預防以及調控該疾病的流行和指導臨床合理用藥提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗菌株

來源于河北省地區內各雞場和豬場發病之后分離到的致病性大腸桿菌。

1.2 培養基

麥康凱瓊脂培養基 （購自北京奧博星生物技術有限責任公司）按常規方法制備。

1.3 試驗藥物

阿莫西林 （AMX）、 桿菌肽 （B）、 紅霉素 （E）、 多西環素（DOX）、氟苯尼考（FFC）、環丙沙星（CIP）、新霉素（N）、壯觀霉素（SH）、頭孢噻肟（CTX）。

1.4 藥敏片

直接購于溫州市康泰生物科技有限公司，干燥、密封、4℃保存備用。

1.5 抗菌藥物敏感性測定法

1.5.1 藥敏試驗方法

在無菌條件下分別自肺臟、脾臟、淋巴結等病料中取樣，劃線接種于麥康凱瓊脂平板，37℃ 培養 20～24h。觀察細菌的菌落形態，多次劃線純化培養，保存。從同一病檢動物不同部位樣品分離的細菌計為同一個菌株。勾取純化培養的菌之后均勻細密的涂布在麥康凱瓊脂培養基上，在培養基上放置這9種藥敏片，做好標記，在37℃倒置培養18～24h。利用儀器自動菌落分析儀（杭州迅數科技有限公司）測定數據，記錄結果。

1.5.2 結果判定

判定敏感性的標準為抑菌圈直徑的大小：20mm以上判為極敏；15.1～20.0mm 判為高敏；10.1～15.0mm 判為低敏；10mm 以下判為耐藥。

2 結果與分析

這200例致病性大腸桿菌對9種抗菌藥物的耐藥性表現出差異。大腸桿菌耐藥性從低到高依次是頭孢噻肟、壯觀霉素、新霉素、環丙沙星、氟苯尼考、多西環素、阿莫西林、桿菌肽、紅霉素。其中壯觀霉素、新霉素、環丙沙星、氟苯尼考、多西環素、阿莫西林、桿菌肽、紅霉素等8種耐藥率大于50%，僅頭孢噻肟小于20%。具體數據見下表1、表2、表3。

表1 致病性大腸桿菌對9種抗菌藥物的耐藥率

表2 致病性大腸桿菌多重耐藥的百分比

表3 9種藥物耐藥譜的具體分布百分比

本次的藥敏實驗結果顯示∶在這200例中，分離出的致病性大腸桿菌對頭孢噻肟和壯觀霉素這兩種藥物比較敏感，有可能是因為這兩種藥使用的較少，但同時也顯示出這兩種藥治療大腸桿菌的良好潛力[5]；但是對于阿莫西林、桿菌肽、紅霉素來說，耐藥率達到了100%，所以無論是預防還是治療，不建議使用這三種藥物 ；由于地區的不同，使得新霉素、環丙沙星、氟苯尼考、多西環素這四種藥物具有不同程度的治療效果，可根據具體情況、具體病理動物的藥敏實驗結果進行臨床合理用藥。

從上述的試驗結果數據可以看出，抗菌藥物的耐藥率很高，并且7重、8重、9重的耐藥率百分比達到了72.5%，已經顯示出了盲目使用抗生素的嚴重后果。

接下來，對于養殖戶來說，可以從以下方面減少畜禽患病的機率，同時也減少抗生素藥物的使用∶

（1）加強平時的飼養管理，同時嚴格控制外來人員以及外來車輛的進出。

（2）對于規模化的養殖場來說，要完善消毒制度，要定期定量的進行消毒，消毒藥可交叉使用，減少耐藥性的產生。

（3）制定合理的免疫程序，直接從源頭上遏制畜禽患病。

（4）保證畜舍、禽舍的衛生情況，定時清理糞便，保證通風、干燥的環境。

（5）對于養殖戶來說，在進行免疫接種和注射治療藥物時，嚴禁針頭重復利用，避免交叉感染。