金白楊6個無性系的抗寒性分析

李丕全

(山西省桑干河楊樹豐產(chǎn)林實驗局，山西 大同 037006)

近年來，隨著人工雜交楊樹良種豐產(chǎn)栽培技術(shù)的廣泛應用，中國已成為世界上楊樹人工林面積最大的國家。在中國北方地區(qū)，受干旱、寒冷氣候的影響，楊樹良種的抗寒性是推廣應用中首要考慮的因素。金白楊(P.×alba L.‘jinbaiyang’)是2013年審定的山西省推廣良種，具有較強的適應性、速生性和材質(zhì)優(yōu)良性，是制漿造紙和生產(chǎn)三板的優(yōu)質(zhì)原料。其多圃配套繁育技術(shù)成熟，嫁接成活率80%以上。筆者在2016年冬季對金白楊6個無性系進行了抗寒性測試，利用半致死溫度、丙二醛、可溶性蛋白、脯氨酸和超氧化物歧化酶含量的測定結(jié)果進行分析評價，以期為金白楊的推廣應用提供參考。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗地自然概況

試驗地位于山西省桑干河楊樹豐產(chǎn)林實驗局落陣營林場小鹽坊分區(qū)，地勢廣闊平坦，海拔996 m，是典型的溫帶大陸性季風氣候區(qū)。年平均氣溫7.0 ℃，極端最低溫-27 ℃.無霜期122 d，年降水量330 mm～400 mm，干燥度1.5，年平均風速2.4 m/s～4.2 m/s.土壤栗鈣土，質(zhì)地中壤，pH值8.9，有機質(zhì)含量0.6%.

1.2 試驗材料

金白楊6個無性系分別為C51，A20，C38，C4，K7，C15，是采用楊樹伐樁嫁接更新改造技術(shù)建立的金白楊品種比較林，林齡10 a.

1.3 試驗方法

分別于2017年10月、11月、12月和2018年1月、2月、3月，每個無性系選擇3株，每株采集金白楊健壯葉芽2 g(鮮重).半致死溫度計算來源于相對電導率，丙二醛采用巴比妥酸法測定，可溶性蛋白采用考馬斯亮藍法測定，脯氨酸采用酸性茚三酮染色法，超氧化物歧化酶(SOD)采用氮藍四唑法測定，各無性系重復3次。數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0進行處理。

2 試驗結(jié)果與分析

2.1 低溫處理下各無性系的半致死溫度(LT50)

采用不同溫度設置下的相對電導率和Logistic方程相結(jié)合的方法求得各無性系的半致死溫度，見表1.

表1 低溫處理下各無性系的Logistic方程及其半致死溫度

從表1擬合度R2來看，金白楊都能較好地用Logistic曲線方程進行擬合。經(jīng)方程擬合后求出的拐點溫度即組織半致死溫度，C4半致死溫度最低，達-45.1 ℃，抗寒性最強；A20次之；C15抗寒性最差，半致死溫度為-23.8 ℃.金白楊半致死溫度由高到低的順序為：C4>A20>K7>C38>C52>C15.

2.2 丙二醛(MDA)含量測試

丙二醛是生物體內(nèi)自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化作用而形成的最終產(chǎn)物。有研究表明，丙二醛在植物遭受逆境傷害時，會降低膜中不飽和脂肪酸的含量，從而使膜的流動性降低，質(zhì)膜透性增大。丙二醛含量越大，說明植物受凍害的程度越高，抗寒能力越低；相反，則抗寒能力越強。越冬期間6個無性系丙二醛含量的變化見圖1，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

圖1 越冬期間 6 個無性系丙二醛含量變化

由圖1可以看出，隨著溫度的變化，金白楊MDA含量呈現(xiàn)先升后降的趨勢。2016年12月至2017年2月MDA含量保持較高水平，最大值出現(xiàn)在2017年1月。越冬期間，C4 MDA含量一直保持較低，C15和C52的MDA含量較高，A20，K7在不同月份相差不大。因MDA含量與抗寒性呈負相關，所以抗寒性排序為：C4>A20>K7>C38>C52>C15.對越冬期間金白楊的丙二醛含量進行方差分析，見表2.

表2 越冬期間MDA含量方差分析

由表2可以看出，溫度間和品種間差異均達到極顯著水平。

2.3 可溶性蛋白(SP)含量測試

可溶性蛋白具有滲透調(diào)節(jié)、保水及降低冰點的作用。大量研究表明，細胞內(nèi)可溶性蛋白含量往往與植物的抗寒性成正比，低溫處理期間抑制植物蛋白質(zhì)合成會降低植物的抗寒性。越冬期間6個無性系可溶性蛋白含量的變化見圖2，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

圖2 越冬期間6個無性系可溶性蛋白含量變化

由圖2可以看出，隨著溫度的變化，金白楊的可溶性蛋白含量呈現(xiàn)出先降低再升高再降低的趨勢。2016年10月至11月，除C4外，其余5個無性系的SP值明顯降低，而后穩(wěn)定升高，并在1月份達到最大值。越冬過程中，C4和A20一直保持較高的可溶性蛋白含量，C15的可溶性蛋白含量一直較低，C38，K7可溶性蛋白含量相差不大。因SP值與抗寒性呈正相關，所以抗寒性排序為：C4>A20>K7>C38>C52>C15.對越冬期間金白楊的可溶性蛋白含量進行方差分析，見表3.

表3 越冬期間可溶蛋白含量方差分析

由表3可以看出，溫度間和品種間差異均達到極顯著水平。

2.4 脯氨酸(Pro)含量測試

脯氨酸是廣泛存在于植物體內(nèi)的一種有機溶劑，逆境條件下，介導植物體內(nèi)很多細胞和亞細胞的反應。許多植物在低溫脅迫下，植物體內(nèi)脯氨酸含量會急劇增加。越冬期間金白楊6個無性系脯氨酸含量的變化見圖3，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

圖3 越冬期間6個無性系脯氨酸含量變化

由圖3可以看出，隨著溫度的變化，金白楊脯氨酸含量呈現(xiàn)出先升后降的趨勢。2016年10月至2017年1月，脯氨酸含量穩(wěn)定升高。而后隨溫度升高，脯氨酸含量下降。越冬期間，C4的脯氨酸含量一直保持較高，C15，C52，C38的脯氨酸含量較低。對越冬期間金白楊的脯氨酸含量進行方差分析，見表4.

表4 越冬期間脯氨酸含量方差分析

由表4可以看出，溫度間和品種間差異均達到極顯著水平。

2.5 超氧化物歧化酶(SOD)含量測試

超氧化物歧化酶是生物體內(nèi)普遍存在的參與氧的一種含金屬酶，它的主要功能是清除機體中有害自由基，是植物體內(nèi)的主要保護酶，在提高植物抗逆性、保護生物機體、防止機體衰老等方面起著重要作用。越冬期間6個無性系SOD酶活性變化見圖4，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

圖4 越冬期間6個無性系SOD酶活性變化

從圖4可以看出，金白楊隨著溫度的變化，SOD酶活性的變化呈現(xiàn)出相同的趨勢。2016年10月到11月，隨著氣溫下降，SOD酶活性呈現(xiàn)顯著上升趨勢。2016年11月到翌年1月，SOD酶活性隨溫度的變化呈現(xiàn)出緩慢上升的趨勢。翌年1月到3月，SOD酶活性呈現(xiàn)降低趨勢。在整個越冬期間，C4，A20的SOD酶活性一直保持較高，而C15，C52的SOD酶活性一直保持較低。對越冬期間金白楊SOD酶活性進行方差分析，見表5.

表5 越冬期間SOD酶活性方差分析

由表5可以看出，溫度間和品種間差異均達到極顯著水平。

3 結(jié)論與討論

筆者選擇半致死溫度、丙二醛、可溶性蛋白、脯氨酸和超氧化物歧化酶含量5項指標對6個金白楊無性系進行分析評價，可以較全面地反映其抗寒性能。綜合5項抗寒性指標測定結(jié)果，金白楊不同無性系的抗寒性，同一無性系在不同越冬時間段的抗寒性表現(xiàn)差異極大。5項抗寒性指標的分析結(jié)果一致，各無性系抗寒性由大到小排序是：C4>A20>K7>C38>C52>C15.金白楊6個無性系在山西省北部地區(qū)的育苗和栽培生產(chǎn)中均未受到越冬傷害，本次測定結(jié)果可為金白楊在其它地區(qū)的推廣提供參考。