圖們江陸封型馬蘇大麻哈魚移殖培育及全人工繁殖

陳春山 ，魏凱 ，常寶全 ，馬龍 ，郭明磊

（1.北京市水生野生動植物救護中心，北京 102100；2.北京市懷柔區水產技術推廣站，北京 101400；3.北京市鱘魚鮭鱒魚創新團隊，北京 100021）

馬蘇大麻哈魚Oncorhynchus masou屬鮭科Salmonidas、大麻哈魚屬，是僅分布在北太平洋亞洲一側水域的溯河洄游性魚類，是大麻哈魚中分布緯度最低、洄游距離最短、性成熟最早的種類，在我國圖們江、綏芬河和臺灣的大甲溪及日本[1,2]等均有分布。馬蘇大麻哈魚幼魚在淡水中生活期間，分化成降海型和陸封型兩個生態群體，后者終生生活在淡水河流中，不降海洄游，但參與洄游群體的繁殖[3-5]。我國及日本學者對洄游型大麻哈魚生物學和生態學方面的研究較多[1-14]。日本20世紀60年代將陸封型種群開發成人工養殖品種稱作山女鱒，被譽為20多種鮭科魚類中，肉質最好、最受歡迎的淡水游釣魚類，1996年引進中國后進行了詳細研究[15-19]。近幾年我國已開展陸封型馬蘇大麻哈魚人工繁殖和養殖技術方面的研究[20-25]，尚未見有關全人工繁殖的報道。魚類的全人工繁殖可保證苗種來源不受野生種群的限制，是規?；a的前提。為探討國產陸封型馬蘇大麻哈魚人工養殖的可能性，開發國產鮭科魚類養殖新品種和馬蘇大麻哈魚資源保護策略，2012—2016年將圖們江陸封型馬蘇大麻哈魚引種到北京，開展人工養殖和繁殖技術研究，連續2年實現全人工繁殖成功。

1 材料與方法

1.1 苗種來源和培育條件

試驗用魚采自吉林圖們江野生魚類，經人工馴養繁殖獲得魚苗，將2萬尾5月齡、體長5～6cm、體質量4.5～5.0g的魚種引種到北京白河流域在玻璃鋼盆和不同規格的水泥池中培育。經18個月培育到2+齡，性成熟。

養殖水源為北京白河流域山區河水+地下水。地下水水溫穩定，為13～14℃，河水溫度隨季節變化。孵化和苗種培育期，以地下水為主，控制水溫穩定。當河水溫度變化幅度較大時，根據水溫需要調整河水和地下水的比例。適宜生長的4—10月，水溫10～20℃；繁殖孵化期 10—11 月，水溫 9～10℃；越冬期12—3月水溫6～8℃。水體清澈，溶解氧量＞7mg/L，pH6.5～7.3，NH3-N＜0.02mg/L，NO-2-N＜0.01mg/L。

1.2 幼魚培育及越冬

引進魚種在直徑2m的玻璃鋼盆中飼養，體長達8～10cm后移入水泥池。池寬200cm×長500cm，水深50cm，放養密度為200尾/m2。飼料采用北京漢業鮭鱒專用飼料，粗蛋白50%，粗脂肪12%。日投喂3～4次，投餌率3%～4%。根據水溫調整投喂量，隨著個體增大，減少投喂次數和放養密度。魚種培育水源以地下水為主，河水為輔，調整地下水與河水的比例，使水溫保持在10～15℃。夏季要加強飼養管理，及時分池，調整放養密度，做好疾病預防和降溫工作。飼養方法與虹鱒基本相同。冬季1+齡魚在室外越冬池越冬，每隔3天投喂1次，投餌率0.5%。

1.3 成魚飼養及親魚培育

2齡食用魚在室外水泥池流水培育，魚池寬300cm×長800cm，水深80cm，水源為山區河水+地下水，以河水為主，夏季控制水溫在20℃以下。北京地區夏季氣溫高，及時監測河水溫度，調整河水和地下水的比例，控制水溫變化，盡量延長適宜生長時間，使水溫逐漸降低達到采卵要求。投喂北京漢業鮭鱒魚類專用飼料，日投喂2次，投餌率2%～3%。分池時挑選體質健壯、規格較大、體色鮮艷的個體作為親魚重點培育。產前1個月適當加大水流量，注意觀察親魚體色變化和活動情況，監測水溫。采卵前一周停食檢查，根據性腺發育程度分池。

1.4 人工繁殖

1.4.1 親魚選擇

繁殖期前，親魚副性征分化不明顯，體側均有7～8塊邊緣清晰的黑色橫斑。隨著水溫降低和性腺發育，副性征逐漸明顯，進入繁殖期，雄魚吻部變成鷹嘴狀，上下頜成鉗形，體側出現暗紅色斑。后期腹部發黑，顏色越來越重，腹部狹窄，擠壓后腹部可流出乳白色精液。雌魚吻部平直不成鉗形，腹部白色、圓潤，后期體側也變黑但較雄性色淺，生殖孔紅腫外凸。少數當年不參加繁殖的個體，體側始終灰白色不變黑，黑色斑輪廓仍很清晰，雌魚生殖孔不紅腫，這種魚不能選作親魚。

1.4.2 采卵授精

產前副性征明顯的親魚不需要人工激素催產。雌魚采用擠卵或剖腹取卵，雄魚用擠壓法多次采精。干法授精，每盆一次采5尾雌魚的卵，擠入3尾雄魚的精液，用羽毛攪拌15～20s使精卵混合均勻，加入少量清水緩慢攪拌1min，再用清水沖洗2～3遍，洗去過多精液，加入清水，放置30～40min，待卵吸水膨脹后，剔除白卵，洗去卵皮、血塊，進入孵化階段。

1.4.3 孵化

受精卵在室內孵化桶孵化，方法同虹鱒。利用調溫池將水溫穩定在6～8℃。孵化期內水流量以保證溶解氧＞7mg/L，不將卵沖動為原則。受精卵發眼前禁止一切檢查操作，避免震動，待眼點非常明顯后挑出死卵。每周用30mg/L濃度甲醛流水處理1h，控治水霉菌。

仔魚孵化在玻璃鋼平列槽中進行。卵黃囊吸收完畢，1/2仔魚上浮時用丹麥ALLer鮭鱒魚類微粒子飼料作為開口飼料。該飼料含粗蛋白64%，粗脂肪12%，2周后改為粗蛋白56%和粗脂肪18%的北京漢業鮭鱒魚類飼料。日投喂8～10次，以“少量多次”為原則，根據上浮仔魚數量投飼率為5%～6%，每次投喂前吸除殘餌。4周后移入直徑2m的玻璃鋼魚盆中培育，放養密度為10000尾/m2，日投喂6～8次，投飼率3%～5%。孵化期水源為曝氣的地下水，進水量依養殖情況進行調節，根據魚苗規格調整放養密度。

1.5 數據采集與計算

1.5.1 體質量、繁殖力和成熟系數

按照張覺民等[26]、殷名稱[27]的方法測定相關指標。人工培育條件下，雄性成熟度好，不是影響人工繁殖的關鍵因素，因此，本試驗在性腺發育不同時期，只定期抽取15尾雌魚樣本測量體長、體質量、卵巢質量，分析成熟度。繁殖期各抽取45尾雌雄性成熟樣本，測定體質量，統計相關指標。卵巢發育到Ⅴ期，測量體質量（W）和體長（L），刨腹采卵測量卵巢質量（GW）。每尾魚取20粒卵（Y），測量其總質量（X），計算單粒卵質量（W1）。絕對繁殖力（F）、體質量相對繁殖力（Fw）和成熟系數（GSI）計算公式如下：

1.5.2 發眼率與孵化率

發眼期胚體出現明顯黑色眼點后，隨機取200～300粒卵，檢出并統計未發眼卵、白卵數，計算發眼率。發眼率=（發眼卵數/受精卵數）×100%。發眼期到出膜期，統計檢出死卵數，發眼卵數減去死卵數為出苗數。孵化率=（出苗數/發眼卵數）×100%。

1.5.3 數據處理

數據用平均值±標準差（Mean±SD）表示，用MicrosoftExcel2003處理，用spss17.0進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 生長發育特點

魚種引進北京時，體質較瘦弱，人工培育18個月后，達24月齡出池時體質量達330～802g，平均（573.62±110.39）g，增重 114 倍，平均日增重 1.05g。雌雄魚體質量分布（表1）有一定差異，體質量眾數雌魚為600～700g，雄魚為400～600g。其原因主要有兩個：一是種的遺傳特性。在自然環境下，主要是雄性參與洄游型群體的繁殖，雄性性腺發育較雌性早，因此個體規格小的性成熟雄魚較雌魚多；二是飼養方法。在人工養殖環境下，馬蘇大麻哈魚搶食兇猛，如果分池不及時，投餌不均勻，也會造成規格差異。

表1 2+齡馬蘇大麻哈魚體質量分布Tab.1 Profile of body weight of 2+year old masu salmon Oncorhynchus masou

雌雄魚性腺發育有一定差異。2%左右雄魚12月齡性腺即發育成熟，體質量只有90～180g，24月齡全部發育成熟，此時副性征明顯。雌魚1+齡未發現性成熟個體，95%以上2+齡性腺發育成熟，此時雌魚腹部膨大柔軟，輪廓明顯，成熟系數可達17%～26%。個別生長速度較慢的雌魚3+及以后性腺發育成熟。本試驗中1尾3+雌魚，體質量720g，卵巢發育為Ⅱ期，成熟系數只有1.9%。雌魚生長發育見表2。

表2 馬蘇大麻哈魚（♀）生長發育統計表Tab.2 Growth index of 2+year old masu salmo Oncorhynchus masou（♀）

2.2 人工繁殖結果

45尾性成熟雌魚樣本的統計結果表明，卵巢質量 57～216g，平均（126.78±37.49）g；成熟系數17.27%～26.93%，平均（21.67±2.60）%；絕對繁殖力 740～2 815粒，平均（1 649.64±489.60）粒；體質量相對繁殖力 2.24～3.51 粒 /g，平均（2.82±0.34）粒 /g。

2次共采卵15.7萬粒，平均受精率82%，孵化率68%，出苗8.7萬尾，稚魚馴化成活率90%。積溫190～210℃·d時受精卵發育至發眼卵，350～390℃·d孵出。

3 討論

3.1 對人工環境的適應性

陸封型馬蘇大麻哈魚對人工環境有較強的適應性，主要表現在對人工配合飼料、溫度和抗病力方面。稚魚可直接用人工飼料開口。本實驗采用丹麥進口愛樂鮭鱒魚類飼料開口，投喂2周，過度為國產鮭鱒魚類飼料，稚魚馴化成活率達到90%以上。苗種培育采用玻璃鋼盆微流水和小型水泥池流水方式，飼養管理與虹鱒基本相同。有資料報道，馬蘇大麻哈魚適宜生長溫度為10～17℃[28]，對高溫的忍耐性超過其他鮭鱒魚類。本試驗養殖的陸封型馬蘇大麻哈魚20℃以下生長發育正常，23℃時表現出明顯異常，聚集在池底一角，有的身體側翻，呼吸頻率加快，個別死亡，水溫降低后很快恢復正常。整個飼養周期較少發生疾病，苗種培育期間，感染過細鱗鮭小瓜蟲病。在單胞菌感染試驗中，死亡率明顯低于同批試驗的細鱗鮭。馬蘇大麻哈魚適應了人工環境和人工配合飼料，生長速度較快，24月齡普遍達到500g以上，具有一定的養殖價值。

3.2 個體差異較大

馬蘇大麻哈魚搶食能力非常強，人工養殖過程中，同批魚個體規格差異較大，饑餓狀態下，有大魚殘食小魚現象。在苗種和幼魚培育階段，要根據個體差異及時分池。陸封型馬蘇大麻哈魚生命周期短，繁殖后親魚大部分死亡。副性征出現后商品魚品質降低，除了用于繁殖的親魚，商品魚養殖要在性成熟之前上市，否則會造成經濟損失。及時分池，為小規格個體營造生長空間，對提高商品魚養殖效果極為重要。

3.3 全人工繁殖特點

陸封型馬蘇大麻哈魚在野生環境下，雄性比例高于雌性[4]，人工養殖條件下雌雄比例依然保持這一特點。在個體規格上，性成熟的雄魚規格差異較大，體質量范圍 330～803g，眾數為400～500g和500～600g。雌魚規格較為集中，體質量眾數為600～700g，雄魚小規格的較多（表1）。絕對繁殖力與體質量呈正相關[24]，人工繁殖過程中應選用規格較大的雌魚做親魚；雄魚有性早熟現象，少部分1+齡就可以參與繁殖，最小體質量180g，這與野外調查結果相同[9,10]。雄魚盡管個體小，但精巢發育良好，精液質量好，因此在人工授精中，雌雄比例可5∶3，雄魚可多次采精。親魚選育過程中適當減少雄魚數量，降低人工繁殖生產成本。

隨著個體生長，馬蘇大麻哈魚降海型群體幼魚黑色斑塊逐漸消失，體色變成銀白色。陸封型群體終生保持幼魚的黑色斑塊，在繁殖季節體色發黑。少數達到性成熟年齡但當年不參加繁殖的陸封型個體，體側始終灰白色不變黑，黑色斑輪廓仍很清晰，根據體色的變化可以判斷親魚性腺發育程度。陸封型群體繁殖的后代中也會出現少量降海型個體，體色銀白，解剖檢查2+齡個體，性腺發育為Ⅱ期，隨著年齡增長性腺是否會發育成熟尚不得知。

溫度是影響馬蘇大麻哈魚性腺發育成熟的關鍵因素。魚種移植到北京后，經過1個冬季的低溫期，培育至第二年的秋季，隨著水溫降低，性腺快速發育到Ⅳ期。通過水流刺激，當水溫降低到12～13℃以下時，雌魚不需要人工激素催產即能夠自然成熟排卵，但不能產卵。用調整河水、地下水比例的方法調控水溫變化，可以控制采卵期，在北京的自然繁殖時間比原產地圖們江晚15d左右。

3.4 移殖培育對性腺發育的影響

個體繁殖力作為種群繁殖力的重要指標，主要是由種的遺傳性決定的，同時也受環境因子影響[29]。董崇智等[9]在綏芬河馬蘇大麻哈魚繁殖期調查結果顯示，雄性性腺發育接近Ⅴ期，雌性卵巢仍處于Ⅰ～Ⅱ期，成熟系數1.16%～10.8%，平均為5.59%。張玉玲[5]通過對圖們江馬蘇大麻哈魚陸封群體調查認為，雄魚2+齡全部性成熟，雌魚大多數（99.4%）終生不能繁殖，卵巢停滯于Ⅱ期，成熟系數只有0.5%。本試驗不僅2+齡雄魚100%及雌魚95%以上都可以發育成熟，而且雌魚成熟系數[（21.67±2.60）%]、絕對懷卵量[（1 649.64±489.60）粒/尾]遠高于綏芬河、圖們江的野生種群。移殖到北京人工培育的馬蘇大麻哈魚可以適應新的環境，改變了雌魚在自然環境卵巢發育不成熟的規律，繁殖力又明顯提高，可以規模化人工繁育。

3.5 全人工繁殖對我國鮭科魚類開發和自然資源保護的意義

鮭是世界三大養殖魚類之一，2010年人工養殖年產量達240萬t，其中歐洲占55.3%，我國年產量只有1.6萬t，占0.8%[30]。全世界養殖鮭科魚類單獨統計產量的有13種，產量的76%以上是品質高的大西洋鮭，我國人工養殖產量的91%來自虹鱒和金鱒[31]，良種選育和國產品種開發是影響我國冷水魚產業發展的主要問題[32]。日本成功將陸封型馬蘇大麻哈魚開發成養殖品種，獲得了極高的效益[17-19,33]。圖們江陸封型馬蘇大麻哈魚移殖及全人工繁殖成功，對開發我國鮭科魚類養殖新品種具有一定意義。

增殖放流是全球普遍采用的恢復大麻哈魚自然資源的重要手段[14-16,33,34]。日本增殖放流和海洋牧場計劃的實施使得日本的漁業收獲頗豐，其捕撈的鮭幾乎均來自增殖放流[33,34]。自然環境下，馬蘇大麻哈魚陸封型群體性成熟早于洄游型群體并參與洄游型群體的繁殖，對維持種群自然資源極為有利，是物種自我保護的一種適應。因此，陸封型種群的資源狀況關系到整個馬蘇大麻哈魚的資源總量。目前，我國圖們江大麻哈魚年產量只有10t多，不到1940年前后的1/10[35]，與沒有重視陸封種群的保護不無關系。人工培育的陸封型群體提高了繁殖效率，通過規?；a向自然水域放流人工繁殖的陸封型苗種，對保護馬蘇大麻哈魚的自然資源具有積極意義。

［1］ 李思忠.中國鮭科魚類地理分布的探討［J］.動物學雜志,1984（1）:34-37.

［2］ 鄭葆珊，黃浩明，張玉玲，等.圖們江魚類［M］.長春:吉林人民出版社,1980:20-25.

［3］ 董崇智,趙春剛.馬蘇大麻哈魚生物學及其增殖［J］.水產學雜志,1996,9（2）:47-53.

［4］ 董崇智,趙春剛.綏芬河馬蘇大麻哈魚陸封型種群生態學特征及資源保護［J］.水產學雜志,1997,10（1）:38-43.

［5］ 張玉玲.圖們江馬蘇大麻哈魚陸封型的生物學資料［J］.水產科學,1988,7（4）:1-5.

［6］ 韓英,王云山,范兆廷,等.黑龍江流域大麻哈魚（Oncorhynchus keta Walbaum）資源現狀研究［J］.水產學雜志,2002,15（1）:24-34.

［7］ 韓英,范兆廷,王云山,等.黑龍江中游與烏蘇里江大麻哈魚（Oncorhynchus keta Walbaum）生殖群體的比較［J］.東北農業大學學報,2004,35（1）:25-29.

［8］ 王會芳,田軍,李征遠,等.大洋河大麻哈魚和馬蘇大麻哈魚溯河群體結構的初步探討［J］.水產學雜志,2001,14（1）:27-32.

［9］ 董崇智,趙春剛,齊樹海,等.綏芬河駝背大麻哈魚移殖放流及回歸效果的初步研究［J］.水產學報,1992,16（4）:307-315.

［10］ 高木健治.北太平洋の沖合水域にひるカテフトマの分布び起源［R］.北太平洋漁業國際委員會研究報告,1982,40:1-177.

［11］ 熊谷明,縄田暁.サケ科魚類における細菌性冷水病菌の卵內感染機序［J］.魚病研究,2010,45（1）:31-36.

［12］ 山家秀信.サケ科魚類における性フェロモンに関する研究［J］.日本水産學會誌,2009,75（4）:648-651.

［13］ 伊藤富子,中島美由紀.Abundance of salmon carcasses at the upper reach of an adult salmon trap:ten years of observation at a tributary of the Chitose River,Hokkaido,northern Japan［J］.Scientific Reports ofthe Hokkaido Fish Hatchery,2009（63）:1-7.

［14］ 橧克裕.本州北部太平洋岸の河川を母川どするサクラマスの生活史の研究［J］.中央水產研究所研報,1994（7）:1-173.

［15］ 王昭明,王新軍,陳惠,等.山女鱒人工受精孵化技術初步研究［J］.水產學雜志,2000,13（2）:1-5.

［16］ 白慶利,楊萍,賈鐘賀,等.山女鱒的生物學特性及繁殖力［J］.水產學雜志,2004,17（2）:65-68.

［17］ 王昭明,王炳謙,陳惠.山女鱒早期發育及低溫耐性觀察［J］.水產學雜志,2005,18（2）:6-10.

［18］ 王昭明,王炳謙,王新軍,等.山女鱒低溫養殖生產性能觀測試驗［J］.水產學雜志,2006,19（1）:36-39.

［19］ 王昭明,沈希順.山女鱒適溫養殖生產性能觀測試驗［J］.水產學雜志,2006,19（1）:40-42.

［20］ 崔成日,鄭偉.流水池塘養殖馬蘇大麻哈技術［J］.黑龍江水產,2012（3）:9-10.

［21］ 鄭偉,郭貴良,于林海,等.微流水土池養殖馬蘇大馬哈魚技術試驗［J］.中國水產,2015（3）:73,78.

［22］ 郭貴良,于林海,孫麗.陸封型馬蘇大馬哈魚山間微流水土池養殖技術［J］.科學種養,2016（5）:44.

［23］ 陳春山,申慧卿,常保全,等.陸封型馬蘇大麻哈魚人工繁殖關鍵技術［J］.中國水產,2016（11）:113-114.

［24］ 陳春山,鄭偉,胡慶杰,等.圖們江馬蘇大麻哈魚陸封種群在不同地區的繁殖力比較［J］.水產學雜志,2016,29（5）:17-21.

［25］ 陳春山,鄭偉,申慧卿,等.不同地區陸封型馬蘇大麻哈魚人工養殖效果比較［J］.水產科技情報,2017,44（2）:96-98，102.

［26］ 張覺民,何志輝.內陸水域魚類自然資源調查手冊［M］.北京:中國農業出版社,1991.

［27］ 殷名稱.魚類生態學［M］.北京:中國農業出版社,1995.

［28］ 范兆廷,姜作發,韓英.冷水魚類養殖學［M］.北京:中國農業出版社,2008.

［29］ 溫海深,林浩然.環境因子對硬骨魚類性腺發育成熟及其排卵和產卵的調控［J］.應用生態學報,2001,12（1）:151-155.

［30］ 牟振波.二十一世紀前十年全球鮭科魚類養殖狀況［J］.水產學雜志,2013,26（2）:59-62.

［31］ 孫大江,王炳謙.鮭科魚類及其養殖狀況［J］.水產學雜志,2010,23（2）:56-63.

［32］ 紀峰,王炳謙,孫大江,等.我國冷水性魚類產業現狀及發展趨勢探討［J］.水產學雜志,2012,25（3）:63-68.

［33］ 李陸嬪.我國水生生物資源增殖放流的初步研究：基于效果評價體系的管理［D］.上海:上海海洋大學,2011.

［34］ 王昭明,王新軍,陳惠,等.山女鱒生物學及其養殖［J］.黑龍江水產,2000（4）:4-6.

［35］ 唐學會,萬繼武.圖們江大麻哈魚資源衰退的原因及恢復措施［J］.現代農業科技,2016（22）:243-245.