外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃實生苗抗氧化物酶和滲透調節物質的影響

高 帆，謝 玥，沈妍秋，雷 芝，王 秀，夏 惠，梁 東

（1．四川農業大學 園藝學院，四川 成都 611130；2．四川省自然資源科學研究院，四川 成都 610015；3．四川農業大學 果蔬研究所，四川 成都 611130）

土壤鹽漬化是一個全球性的熱點問題，是農業發展所面臨的主要危機之一［1］。目前，全世界約有20%的灌溉土地受到鹽脅迫影響，中國約有3 460萬 hm2鹽漬土地［2］。果樹鹽堿地栽培的研究也是國內外關注的重點［3］。鹽脅迫下，植物細胞內自由基的產生與清除的動態平衡被打破，造成氧化脅迫，加速膜脂過氧化，有害物質積累，引起代謝紊亂［4］。褪黑素（melatonin，MEL）又稱松果素，1958年被LERNER［7］從牛松果體中首次提取出來，其化學成分為N-乙酰基-5-甲氧基色胺。大量研究表明，褪黑素是一種吲哚類激素，具有植物生長調節物質的功能，同時還具有抵抗脅迫的生物刺激物質的功能，對高溫、低溫、紫外及電離輻射、重金屬和化學污染、生物氧化等生物和非生物脅迫都有一定的抵抗作用［8］。目前，有關獼猴桃Actinidia耐鹽性的研究已有一些報道［9-10］，但關于外源褪黑素對鹽脅迫下獼猴桃生長及抗逆生理特性的研究還比較少。獼猴桃為獼猴桃科Actinidiaceae獼猴桃屬多年生藤本植物。獼猴桃果實為典型的漿果，主要是以含維生素C高，適口和特異的風味見著。獼猴桃在全球都具有極好的經濟發展前景，是一種重要的果樹資源［5］。前人研究表明，獼猴桃一般既不耐離子脅迫也不耐滲透脅迫［6］。因此，提高獼猴桃對鹽堿地的耐性，保證獼猴桃在鹽脅迫下能夠維持正常的生理水平，對獲得理想的產量和品質有重要意義。本研究以野生美味獼猴桃Actinidia deliciosa實生苗為材料，研究了外源褪黑素對氯化鈉脅迫下其實生苗體內的活性氧代謝和滲透調節物質的影響，為合理利用褪黑素緩解美味獼猴桃栽培中的鹽害問題提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 植物材料培養與處理

于2016年1月將采于陜西秦嶺的美味獼猴桃種子4℃層積2個月，然后在培養箱中變溫處理2周，光暗周期為8 h/16 h，晝夜溫度為25℃/4℃。之后25℃恒溫培養至種子萌芽。將發芽的種子播種到育苗盤中，上面覆蓋2 mm的營養土，于人工氣候室中培養，光暗周期為12 h/12 h，晝夜溫度為25℃/20℃。當實生苗長到2～3片真葉時，選取長勢一致的實生苗移到裝有珍珠巖的花盆中，3株·盆-1。移苗后注意保濕遮陰，澆營養液。

當美味獼猴桃實生苗長至9～10片葉時，進行試驗處理。選擇整齊一致的壯苗分成5組，其中3組分別連續5 d根灌0.1 μmol·L-1褪黑素溶液，其余2組根灌相同體積的清水。在最后一次根灌褪黑素溶液的第2天開始進行鹽脅迫處理。任選1組根灌清水的獼猴桃實生苗作為空白對照（ck），即繼續根灌清水，其余2組獼猴桃實生苗均根灌100 mmol·L-1的氯化鈉溶液，連續根灌12 d，處理期間適當補充1/2Hoagland營養液。各處理分別表示為：①ck。清水處理。②S1。氯化鈉（100 mmol·L-1）。③S2。褪黑素（0.1 μmol·L-1）+氯化鈉（100 mmol·L-1）。10 盆·處理-1，重復 3 次。 氯化鈉脅迫處理濃度和試驗處理天數均根據預備試驗確定。在氯化鈉澆灌處理后的第0，3，6，9，12天分別采取根基向上第3～5片真葉，將葉片在液氮速凍后，置于-80℃超低溫冰箱中保存，用于測定生理指標。

1.2 測定項目及方法

脯氨酸采用酸性茚三酮法測定［11］。丙二醛（malondialdehyde，MDA）參照硫代巴比妥酸法［12］。過氧化氫參照郝建軍等［13］的方法。可溶性糖、可溶性蛋白質參照李合生等［11］的方法。超氧化物歧化酶（SOD）的活性采用GIANNOPOLITIS等［14］的方法。過氧化氫酶（CAT）活性采用改良后的KATO等［15］的方法。過氧化物酶（POD）活性采用 SCEBBA 等［16］的方法。 抗壞血酸（AsA）參考 KAMPFENKEL 等［17］的鐵離子（Fe3+）還原法。

1.3 數據處理

所有數據輸入Excel表格，計算平均數和標準差，并利用SPSS 22.0對所有數據進行顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃葉片膜脂過氧化程度的影響

逆境條件下，植物體內丙二醛質量摩爾濃度的高低能夠反映出細胞膜的損傷程度，是膜脂過氧化的主要產物。圖1顯示：在未經氯化鈉處理前，各個處理間的丙二醛沒有顯著的差異。氯化鈉脅迫至6 d時，S1處理和S2處理的丙二醛質量摩爾濃度達最高值，較對照植株上升490.32%和262.81%。氯化鈉脅迫6 d后，丙二醛開始下降，但仍高于ck。此外，隨著氯化鈉脅迫時間的增加，S1處理和S2處理的過氧化氫質量摩爾濃度逐漸上升，在12 d時達最大值。脅迫12 d，S1處理較ck處理增加了83.90%，而S2處理僅增加了27.40%。由此推測，外源褪黑素可顯著緩解鹽堿逆境條件下丙二醛和過氧化氫的積累，保護細胞膜的完整性，降低膜脂過氧化程度，從而提高美味獼猴桃的耐性，減輕鹽脅迫對植物的傷害程度。

圖1 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃丙二醛和過氧化氫的影響Figure 1 Effects of exogenous melatonin on MDA content and H2O2content in kiwifruit under NaCl stress

2.2 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃葉片滲透調節物質的影響

由圖2可知：S1處理和S2處理的脯氨酸的質量分數在0～3 d顯著上升，上升幅度為53.74%和58.87%，3～12 d則開始逐漸下降，但仍維持較高水平，且S2處理顯著高于S1處理。美味獼猴桃葉片的可溶性糖質量分數隨氯化鈉脅迫時間的延長逐漸升高，脅迫12 d時達最高值，且S2處理的可溶性糖均高于S1處理。由此可推測：外源褪黑素的施加有利于促進植物體內游離脯氨酸和可溶性糖的增加，增強細胞內滲透勢能力，以達到提高植物抵抗逆境的能力。美味獼猴桃葉片中可溶性蛋白質質量分數變化差異不明顯。氯化鈉脅迫后，ck處理的質量分數變化不明顯，而S1和S2的可溶性蛋白質呈先降低后升高的趨勢，0～3 d時降低，分別降低了8.08%和2.10%，隨后開始逐漸上升。氯化鈉脅迫12 d時，S1處理和S2處理可溶性蛋白質高于對照，分別為6.22 mg·g-1和6.39 mg·g-1。可見，外源褪黑素處理可以緩解鹽脅迫下美味獼猴桃蛋白質的降解。

圖2 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃游離脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質的影響Figure 2 Effects of exogenous melatonin on proline,soluble sugar and soluble protein in kiwifruit under NaCl stress

2.3 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃葉片的抗氧化酶活性的影響

超氧化物歧化酶（SOD），過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）活性的大小代表了清除細胞內活性氧能力的高低，是植物逆境條件下保護細胞的重要酶類。由圖3可知：SOD和POD活性的變化模式相似，均呈先升高再降低的趨勢。氯化鈉脅迫0～6 d，S1處理和S2處理的SOD和POD活性逐漸上升，S1處理SOD活性上升6.26%，S2上升6.88%；POD活性則顯著增加，分別增加156.61%和180.66%。6～12 d時活性逐漸降低，12 d時SOD活性低于ck，POD活性仍保持較高水平，且S2的SOD和POD活性均高于S1。所以，可認為外源褪黑素激活了氯化鈉脅迫下美味獼猴桃體內的SOD和POD活性，增強了植物體內活性氧的清除能力，有效穩定了膜質透性，增強了美味獼猴桃的抗鹽性。

CAT具有清除植物體內過氧化氫的作用，也是植物酶促防御系統的重要組分。在開始氯化鈉澆灌處理的當天（0 d），ck，S1，S2處理的美味獼猴桃實生苗葉片中CAT活性差異不顯著。0～3 d，S1處理和S2處理的CAT活性顯著升高，分別增加了92.08%和164.36%。3～12 d，植株體內CAT活性逐漸下降，且逐漸低于0 d的活性，分別降低35.64%和15.84%。由此可以推測：外源褪黑素激活了美味獼猴桃體內CAT活性，CAT活性的增加提高了美味獼猴桃清除過氧化氫的能力，有效緩解了氯化鈉脅迫誘導的膜脂過氧化，提高了美味獼猴桃的耐鹽性。

圖3 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃SOD，POD，CAT活性的影響Figure 3 Effects of exogenous melatonin on SOD,POD,CAT activity in kiwifruit under NaCl stress

2.4 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃葉片非酶抗氧化劑的影響

由圖4可知：與對照（ck）植株相比，在鹽脅迫前3 d，S1處理和S2處理抗壞血酸（AsA）顯著降低，而隨著鹽脅迫時間的增長，又開始逐漸上升，并維持較高水平，12 d時達最大值，分別上升56.58%和90.49%。這表明：外源褪黑素可以有效增加美味獼猴桃體內的抗壞血酸，增強植物清除活性氧的能力，從而提高美味獼猴桃的耐鹽性。

3 結論與討論

鹽脅迫是限制植物生長和作物產量的重要環境因素。鹽脅迫對植物組織和器官的生長發育具有顯著的影響［18］。目前，關于褪黑素和植物耐鹽性關系的研究還不多。本研究表明：外源褪黑素可有效緩解美味獼猴桃體內丙二醛（MDA）和過氧化氫的積累，增加體內脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質，增強SOD，POD，CAT活性，提高抗壞血酸。

圖4 外源褪黑素對氯化鈉脅迫下美味獼猴桃抗壞血酸的影響Figure 4 Effects of exogenous melatonin on AsA in kiwifruit under NaCl stress

游離脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質是植物體內的3個重要滲透調節物質，能夠增加植物細胞在高溫、鹽堿等逆境條件下的功能蛋白數量，保持細胞原生質體與環境之間的滲透平衡和結構完整性保護膜系統穩定性，提高植物抵抗逆境的能力。脯氨酸能夠提高細胞原生質的親水性，具有減少可溶性蛋白質沉淀或增加蛋白質可溶性的作用，增強植物組織細胞的持水性，防止植物細胞脫水，保護細胞質膜的完整性［19］。植物在遭受逆境時，葉片可溶性蛋白質合成速率會發生變化，而可溶性蛋白質含量變化可以反映蛋白質合成、變性和降解多方面信息。已有研究表明：氯化鈉脅迫會使番茄Lycopersicon esculentum幼苗［20］和狼尾草Penniseturn alopecuroides［21］體內的脯氨酸顯著上升，可溶性蛋白質下降，而外源褪黑素的施加可以提高番茄幼苗和狼尾草體內的脯氨酸和可溶性糖。本研究表明：氯化鈉脅迫可導致美味獼猴桃苗體內脯氨酸顯著積累，并隨著氯化鈉脅迫時間延長一直保持較高水平，這是植物的自我保護機制，而外源褪黑素預處理會進一步增加脯氨酸，說明褪黑素增強了這種保護機制。由此可以推測：外源褪黑素預處理可有效地提高鹽脅迫下美味獼猴桃的脯氨酸，維持較低的細胞滲透勢，減少水分流失，從而提高美味獼猴桃的耐鹽性。氯化鈉脅迫下，美味獼猴桃實生苗體內可溶性蛋白質先下降后上升，可能是由于剛經受脅迫時，美味獼猴桃體內由于脅迫產生的活性氧破壞了蛋白質的穩定性或影響了蛋白質合成的生理代謝途徑，隨后美味獼猴桃自我保護機制的啟動使蛋白質發生回升，而褪黑素預處理可以減少氯化鈉脅迫下美味獼猴桃蛋白質的降解，猜測是由于褪黑素促進了美味獼猴桃實生苗體內熱激蛋白質的合成，保護了體內蛋白質免受破壞。可溶性糖也是重要的滲透調節物質，在植物遭受逆境時大量合成，維持細胞內滲透勢，保護膜系統穩定性，因此也具有重要作用。氯化鈉脅迫會導致植物體內可溶性糖顯著增加［22-23］。本研究表明：美味獼猴桃實生苗體內可溶性糖在鹽脅迫過程中顯著增加，外源褪黑素的施加可進一步顯著提高可溶性糖。由此可推測，褪黑素通過提高可溶性糖，增強維持細胞內的滲透勢，從而達到提高美味獼猴桃抵抗逆境的能力。

活性氧（ROS）作為信號轉導途徑的第二信使參與植物生長和建成［24］。正常情況下植物體內ROS的產生和消除處于動態平衡狀態，這種平衡狀態主要由抗氧化物酶和抗氧化物質調節。而當植物處于逆境條件時，體內的活性氧系統被打破，產生大量ROS，導致負氧離子（O2-），氫氧根（OH-）等自由基的大量累積，自由基啟動膜脂過氧化作用，膜透性增大，破壞膜結構的完整性，進而引起蛋白質變性，DNA損傷，碳水化合物的氧化、色素的降解以及酶活性受損，甚至細胞死亡［25］。

本研究顯示：氯化鈉脅迫條件下，美味獼猴桃實生苗葉片中丙二醛（MDA）和過氧化氫均顯著上升，且隨氯化鈉鹽脅迫時間延長，均維持較高水平。用外源褪黑素預處理可有效緩解美味獼猴桃體內丙二醛和過氧化氫的積累。這可能是由于外源褪黑素預處理有效地緩解了活性氧的產生速率，降低了活性氧對細胞膜的傷害［26-27］。另外，褪黑素具有一定抗氧化能力和在細胞培養中被證明具有保護膜（細胞核和血漿膜）完整性的功能［28-29］。

植物體內清除活性氧的重要保護酶是SOD，POD和CAT，能夠有效地分解植物體內的活性氧自由基，使植物免受傷害。本研究表明：SOD，POD和CAT的活性隨著氯化鈉脅迫時間的延長呈先上升后下降的趨勢，而外源褪黑素預處理能夠顯著增加美味獼猴桃實生苗的SOD，POD和CAT活性，提高美味獼猴桃實生苗清除活性氧的能力，這與王麗英［31］研究褪黑素預處理對黃瓜Cucumis sativus幼苗SOD，POD和CAT活性影響的變化趨勢一致。由此可以推測：外源褪黑素可能作為抗氧化劑增強抗氧化物酶相關基因的表達來提高抗氧化酶活性，從而增強清除細胞內活性氧的能力，提高美味獼猴桃耐鹽性。

除此以外，抗壞血酸（AsA）也是關鍵的非酶促抗氧化劑，除了參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環外，也可直接清除負氧離子（O2-）和過氧化氫等活性氧［30］。本研究表明：外源褪黑素預處理顯著提高了美味獼猴桃實生苗體內抗壞血酸，且隨著氯化鈉鹽脅迫時間的延長，增長越顯著。由此推測：外源褪黑素預處理可以有效提高美味獼猴桃實生苗體內抗壞血酸，增強清除活性氧能力，抑制脂質過氧化，從而提高美味獼猴桃耐鹽性。綜上所述，外源褪黑素預處理美味獼猴桃實生苗，能有效減弱氯化鈉脅迫對其活性氧代謝和滲透調節物質的影響，提高美味獼猴桃的耐鹽性。

［1］ 徐慧妮，王秀峰，孫旭東，等.黃瓜種子萌發對NO3-脅迫的響應及耐鹽性評價［J］.西北植物學報，2011，31（2）： 325-331.XU Huini,WANG Xiufeng,SUN Xudong,et al.Response and stress tolerance evaluation of cucumber cultivars under NO3-stress ［J］.Acta Bot Boreal-Occident Sin,2011,31（2）：325-331.

［2］ 周和平，張立新，禹鋒，等.我國鹽堿地改良技術綜述及展望［J］.現代農業科技，2007（11）：159-161.ZHOU Heping,ZHANG Lixin,YU Feng,et al.Review and prospect of saline-alkali improvement technology in China［J］.Mod Agric Sci Technol,2007（11）：159-161.

［3］ 羅青紅，寇云玲，史彥江，等.6種雜交榛對新疆鹽堿土的生理適應性研究［J］.西北植物學報，2013，33（9）： 1867-1873.LUO Qinghong,KOU Yunling,SHI Yanjiang,et al.Physiological characteristics of adaptability of six hybrid hazelnuts to saline-alkali land in Xinjiang ［J］.Acta Bot Boreal-Occident Sin,2013,33（9）：1867-1873.

［4］ 楊曉慧，蔣衛杰，魏珉，等.植物對鹽脅迫的反應及其抗鹽機理研究進展［J］.山東農業大學學報（自然科學版）， 2006， 37（2）： 302-305.YANG Xiaohui,JIANG Weijie,WEI Min,et al.Review on plant response and resistance mechanism to salt stess ［J］.J Shandong Agric Univ Nat Sci,2006,37（2）：302-305.

［5］ 黃宏文.獼猴桃研究進展［M］.北京：科學出版社，2000.

［6］ 靳娟，魯曉燕，王依.果樹耐鹽性研究進展［J］.園藝學報，2014，41（9）：1761-1776.JIN Juan,LU Xiaoyan,WANG Yi.Advances in the studies on salt tolerance of fruit trees ［J］.Acta Hortic Sin,2014,41（9）：1761-1776.

［7］ LERNER A B,CASE J D,TAKAHASHI Y,et al.Isolation of melatonin,the pineal gland factor that lightens melanocytes ［J］.J Am Chem Soc,1958,80（10）：2587-2592.

［8］ 徐芳，周海鵬，郭早霞，等.植物褪黑素及其抗逆性研究［J］.基因組學與應用生物學，2013，32（2）：260-266.XU Fang,ZHOU Haipeng,GUO Zaoxia,et al.The melatonin and its resistance to stress in plants ［J］.Genom Appl Biol,2013,32（2）：260-266.

［9］ 張慶霞，魏海蓉，劉慶忠，等.果樹種質資源耐鹽性評價及耐鹽突變研究現狀［J］.安徽農業科學，2012，40（35）： 17050-17053.ZHANG Qingxia,WEI Hairong,LIU Qingzhong,et al.Status of research on salt tolerance evaluation and salt tolerant mutant of fruit resources ［J］.J Anhui Agric Sci,2012,40（35）：17050-17053.

［10］ 周立名，王飛，王佳.EMS誘變處理定向篩選獼猴桃耐鹽突變體研究［J］.西北農業學報，2009，18（5）：330-335.ZHOU Liming,WANG Fei,WANG Jia.Selection of salt-tolerant mutants from ethyl methane sulfonate mutagenized kiwifruit embryonic calli［J］.Acta Agric Boreal-Occident Sin,2009,18（5）：330-335.

［11］ 李合生.植物生理生化實驗原理和技術［M］.北京：高等教育出版社，2000.

［12］ HODGES D M,DELONG J M,FORNEY C F,et al.Improving the thiobarbituric acid-reactive-substances assay for estimating lipid peroxidation in plant tissues containing anthocyanin and other interfering compounds ［J］.Planta,1999,207（4）：604-611.

［13］ 郝建軍，康宗利，于洋.植物生理學實驗技術［M］.北京：化學工業出版社，2006.

［14］ GIANNOPOLITIS C N,RIES S K.Superoxide dismutases （Ⅱ)purification and quantitative relationship with watersoluble protein in seedlings ［J］.Plant Physiol,1977,59（2）：315-318.

［15］ KATO M,SHIMIZU S.Chlorophyll metabolism in higher plants （Ⅶ） chlorophyll degradation in senescing tobacco leaves,phenolic-dependent peroxidative degradation ［J］.Can J Bot,1987,65（4）：729-735.

［16］ SCEBBA F,SEBASTIANI L,VITAGLIANO C.Activities of antioxidant enzymes during senescence of Prunus armeniaca leaves ［J］.Biol Plant,2001,44（1）：41-46.

［17］ KAMPFENKEL K,van MONTAGU M,INZè D.Extraction and determination of ascorbate and dehydroascorbate from plant tissue ［J］.Anal Biochem,1995,225（1）：165-167.

［18］ 李會珍，張志軍，劉培培，等.不同基因型紫蘇耐鹽性比較研究［J］.西北植物學報，2011，31（2）：338-344.LI Huizhen,ZHANG Zhijun,LIU Peipei,et al.Comparative study on salt tolerance of different genotypical perilla［J］.Acta Bot Boreal-Occident Sin,2011,31（2）：338-344.

［19］ 孫軍利.外源水楊酸對高溫脅迫下葡萄幼苗生理特性的影響及誘導的蛋白激酶性質研究［D］.石河子：石河子大學，2015.SUN Junli.Study of Exogenous Salicylic Acid on Physiological Characteristics and the Nature of Protein Kinase of Grape Young Plants Under High Temperature Stress ［D］.Shihezi：Shihezi University,2015.

［20］ 杜天浩.外源褪黑素對氯化鈉脅迫下番茄幼苗生理代謝和產量及品質的影響［D］.楊凌：西北農林科技大學，2016.DU Tianhao.Effects of Exogenous Melatonin on Tomato Seeldings Physiology and Friut Yield and Quality Under Na-Cl Stress［D］.Yangling：Northwest A＆F University,2016.

［21］ 張娜，蔣慶，李殿波，等.外源施加褪黑素對氯化鈉脅迫下狼尾草種子萌發及相關生理指標的影響［J］.中國農業大學學報， 2014， 19（4）： 54-60.ZHANG Na,JIANG Qing,LI Dianbo,et al.Effect of exogenous melatonin on germination of Penniseturn alopecuroides under NaCl stress ［J］.J Chin Agric Univ,2014,19（4）：54-60.

［22］ 韓志平，郭世榮，尤秀娜，等.鹽脅迫對西瓜幼苗活性氧代謝和滲透調節物質含量的影響［J］.西北植物學報， 2010， 30（11）： 2210-2218.HAN Zhiping,GUO Shirong,YOU Xiuna,et al.Metabolism of reactive oxygen species and contents of osmotic substances in watermelon seedlings under salinity stress ［J］.Acta Bot Boreal-Occident Sin,2010,30（11）：2210-2218.

［23］ 李娜，陳紅，裴孝伯.外源亞精胺對鹽脅迫下黃瓜幼苗耐鹽性的影響［J］.熱帶作物學報，2013，34（7）：1359-1364.LI Na,CHEN Hong,PEI Xiaobo.Effects of extraneous spermidine on the salt tolerance in cucumber seedlings under salt stress ［J］.Chin J Trop Crops,2013,34（7）：1359-1364.

［24］ BAXTER A,MITTLER R,SUZUKI N.ROS as key players in plant stress signalling ［J］.J Exp Bot,2014,65（5）：1229-1240.

［25］ ZHU Jiankang.Salt and drought stress signal transduction in plants ［J］.Annu Rev Plant Biol,2002,53：247-273.

［26］ TAN Dunxian,MANCHESTER L C,REITER R J,et al.Melatonin directly scavenges hydrogen peroxide：a potentially new metabolic pathway of melatonin biotransformation ［J］.Free Rad Biol Med,2001,29（11）：1177-1185.

［27］ LI Chao,WANG Ping,WEI Zhiwei,et al.The mitigation effects of exogenous melatonin on salinity-induced stress in Malus hupehensis ［J］.J Pineal Res,2012,53（3）：298-306.

［28］ GARCIA J J,REITER R J,GUERRERO J M,et al.Melatonin prevents changes in microsomal membrane fluidity during induced lipid peroxidation ［J］.FEBS Lett,1997,408（3）：297-300.

［29］ LEI Xiaoyong,ZHU Ruiyu,ZHANG Guiyou,et al.Attenuation of cold-induced apoptosis by exogenous melatonin in carrot suspension cells：the possible involvement of polyamines ［J］.J Pineal Res,2004,36（2）：126-131.

［30］ 樊懷福，李娟，郭世榮，等.外源NO對NaCl脅迫下黃瓜幼苗生長和根系谷胱甘肽抗氧化酶系統的影響［J］.西北植物學報， 2007， 27（8）： 1611-1618.FAN Huaifu,LI Juan,GUO Shirong,et al.Effects of exogenous nitric oxide on growth and giutathione dependent antioxidative system in cucumber seedling roots under NaCl stress ［J］.Acta Bot Boreal-Occident Sin,2007,27（8）：1611-1618.

［31］ 王麗英.褪黑素預處理對黃瓜幼苗耐鹽性的影響［D］.楊凌：西北農林科技大學，2014.WANG Liying.Effects of Melatonin Pretreatment on Salt Tolerances of Cucumber Seedlings ［D］.Yangling：Northwest A＆F University,2014.