趕黃草藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

丕先*

1.西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室，四川 瀘州 646000;2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科,重慶 400016

趕黃草又名扯根菜，為虎耳草科扯根菜屬植物扯根菜PenthorumchinesePursh.的干燥全草，主要分布于湖南、江西、吉林等地。首載于《救荒本草》，《全國(guó)中草藥匯編》、《四川中藥志》以及《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2010版》均有記載。其性溫、味甘、無(wú)毒，具有清熱解毒、活血散瘀、利水消腫、退黃、平肝之功效，主治黃疸、水腫、經(jīng)閉、血崩、帶下、跌打損傷等。目前，已從趕黃草中分離到黃酮類(lèi)、萜類(lèi)、甾醇類(lèi)、酯類(lèi)、香豆素類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、多酚等多類(lèi)化合物。藥理研究表明具有解酒、保肝、利膽退黃、降酶、抗氧化、抗突變、抑菌、舒張腸平滑肌等藥理作用[1]。《四川省中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2010版》中規(guī)定趕黃草的水分不得超過(guò)13.0%，總灰分不得超過(guò)9.0%，酸不溶灰分不得超過(guò)1.5%，水溶性熱浸法浸出物不得少于14.0%。本研究依照《四川省中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2010版》一部“趕黃草”項(xiàng)下檢查項(xiàng)目進(jìn)行驗(yàn)證及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)升級(jí)研究，分別采用水分測(cè)定法、灰分測(cè)定法、浸出物含量測(cè)定法、薄層鑒別法對(duì)趕黃草進(jìn)行多方面的綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)研究，包括水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物以及薄層鑒別等，進(jìn)而修改趕黃草的來(lái)源，浸出物測(cè)定方法，確定浸出物限度，增加趕黃草沒(méi)食子酸的薄層鑒別方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器 B-220恒溫水浴鍋(上海亞榮生化儀器廠)；ELF11/6B馬弗爐(英國(guó)Carbolite公司)；硅膠G板(20 cm×10 cm，青島海洋化工試劑廠)；202-2A電熱恒溫干燥箱(上海雷韻試驗(yàn)儀器制造有限公司)；Sartorius BS 224S電子天平(德國(guó)賽多利斯集團(tuán))。

1.2 試劑 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)：110831-201403，中國(guó)藥品生物制品檢定所)；甲醇(分析純，批號(hào)：150517，成都海駿化工有限公司)；乙酸乙酯()分析純，批號(hào)：150213，成都海駿化工有限公司)；甲酸(分析純，批號(hào)：160613，蘇州榮恒精細(xì)化工有限公司)。

1.3 藥材 研究分別從四川、湖南、江西、吉林采集樣品，共收集了4個(gè)省10批樣品。所有樣品經(jīng)西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院稅丕先教授鑒定為虎耳草科扯根菜屬植物扯根菜PenthorumchinesePursh.的干燥全草。見(jiàn)表1。

表1 趕黃草采集情況

2 方法與結(jié)果

2.1 基源 根據(jù)全國(guó)中草藥匯編第三版(卷二)，趕黃草來(lái)源于虎耳草科植物趕黃草PenthorumchinensePursh.的干燥地上部分，為苗家藥材，“趕黃”效果已深入人心，無(wú)論是民間或官方均呼叫“趕黃草”，很少有人叫“扯根菜”。所以，建議趕黃草標(biāo)準(zhǔn)將藥材名與植物名統(tǒng)一，均叫“趕黃草”，拉丁名不變。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 供試品溶液制備 稱(chēng)取趕黃草粗粉0.5 g，加入10 mL甲醇，超聲提取1 h，過(guò)濾，取5 mL加24%鹽酸水解1.5 h，蒸干，甲醇定容至5 mL，即得。

2.2.2 對(duì)照品溶液制備 取沒(méi)食子酸對(duì)照品適量，加50%甲醇制成每mL含0.5 mg的溶液。

2.2.3 薄層色譜展開(kāi) 取供試品和對(duì)照品溶液各5 μL，點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6∶4∶1)為展開(kāi)劑，預(yù)飽和10 min，上行展開(kāi)，取出，晾干。以5%三氯化鐵溶液顯色，加熱至斑點(diǎn)清晰。樣品檢識(shí)按照上述條件對(duì)趕黃草藥材進(jìn)行薄層色譜鑒別，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。如圖1所示。

趕黃草中槲皮素和沒(méi)食子酸均為已知具有抗乙肝病毒和保肝作用的成分[2-3]，是趕黃草的活性成分。而質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有沒(méi)食子酸的定性鑒別，為保證其藥品的質(zhì)量，本次升級(jí)研究增加沒(méi)食子酸薄層鑒別，原槲皮素的薄層鑒別不變。

2.3 檢查

2.3.1 水分 按照《中國(guó)藥典2015年版》四部(通則0832)水分測(cè)定法第二法(烘干法)，對(duì)10批趕黃草藥材進(jìn)行水分測(cè)定。10批趕黃草藥材樣品的水分為8.34%～10.40%，符合《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2010年版》趕黃草項(xiàng)下的水分規(guī)定，即不得過(guò)13.0%。根據(jù)10批趕黃草的水分含量平均值乘以120%，得到趕黃草水分含量限定標(biāo)準(zhǔn)：9.271%×1.2=11.1252%，因此趕黃草藥材水分沿用原標(biāo)準(zhǔn)，不得過(guò)13.0%，收入正文標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)表2。

表2 趕黃草水分測(cè)定結(jié)果

2.3.2 灰分

2.3.2.1 總灰分 照《中國(guó)藥典2015年版》四部(通則2302)，總灰分測(cè)定法測(cè)定。由表3可見(jiàn)，10批趕黃草藥材樣品的總灰分為5.43%～6.06%，符合《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2010年版》趕黃草項(xiàng)下的總灰分規(guī)定，即不得過(guò)9%。根據(jù)10批趕黃草藥材的總灰分平均值乘以120%，得到趕黃草藥材總灰分限定標(biāo)準(zhǔn)：5.7979%×1.2=6.9575%，因此趕黃草藥材總灰分沿用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，不得過(guò)9.0%，收入標(biāo)準(zhǔn)正文。

2.3.2.2 酸不溶灰分 取上述總灰分，照《中國(guó)藥典2015年版》四部(通則2302)酸不溶性灰分測(cè)定法測(cè)定。10批趕黃草藥材樣品的酸不溶性灰分為0.85%～1.08%，符合《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2010年版》趕黃草項(xiàng)下的酸不溶性灰分規(guī)定，即不得過(guò)1.5%。根據(jù)10批趕黃草藥材的酸不溶性灰分平均值乘以120%，得到趕黃草藥材酸不溶性灰分限定標(biāo)準(zhǔn)：0.977%×1.2=1.1724%，因此趕黃草藥材酸不溶性灰分沿用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，不得過(guò)1.5%，收入標(biāo)準(zhǔn)正文。見(jiàn)表4。

樣品編號(hào)總灰分平均含量/%10批平均值/%G-015.49±0.10G-025.43±0.07G-035.67±0.13G-046.06±0.03G-055.94±0.14G-065.93±0.14G-075.86±0.24G-085.90±0.18G-095.90±0.04G-105.78±0.165.80±0.20

表4 趕黃草酸不溶性灰分含量測(cè)定結(jié)果

2.3.3 浸出物 由于趕黃草主要成分總黃酮及沒(méi)食子酸易溶于乙醇，特別是其苷元槲皮素在乙醇中溶解性較好，而在水中溶解性較差[4-5]，故取消原水溶性浸出物測(cè)定法。改用《中國(guó)藥典2015年版》四部(通則2201)浸出物測(cè)定法之醇溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法，采用稀乙醇作溶媒測(cè)定10批趕黃草藥材浸出物。10批趕黃草藥材樣品的醇溶性浸出物為24.48%～26.80%，根據(jù)平均值乘以80%，得到趕黃草藥材醇溶性浸出物限定標(biāo)準(zhǔn)：25.485%×0.8=20.388%，因此趕黃草藥材醇溶性浸出物不得少于20.0%，高于原標(biāo)準(zhǔn)水溶性浸出物含量不得少于14%。故收入標(biāo)準(zhǔn)正文。見(jiàn)表5。

表5 趕黃草醇溶性浸出物含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 浸出物的測(cè)定 趕黃草中的黃酮類(lèi)成分及沒(méi)食子酸等易溶于乙醇，而微溶于水，且稀乙醇中溶解度大于95%乙醇中的溶解度，熱浸大于冷浸，故其浸出物含量測(cè)定修訂為醇溶性測(cè)定(稀乙醇，熱浸)。

3.2 有效成分的含量測(cè)定 趕黃草中槲皮素的含量測(cè)定方法及其定量限度已較成熟和完善，故本次未將其作為標(biāo)準(zhǔn)升級(jí)研究，保留原方法和限度。沒(méi)食子酸具有抗菌抗病毒、抗肝纖維化的作用[6]，為趕黃草治療乙肝的活性成分，其含量高低直接影響趕黃草的質(zhì)量，故增加其含量限定指標(biāo)，將在進(jìn)一步研究完善后報(bào)道。

3.3 限量標(biāo)準(zhǔn)制定 建議根據(jù)10批樣品檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合藥材標(biāo)準(zhǔn)，建議規(guī)定水分不得過(guò)13.0%，總灰分不得過(guò)9.0%，酸不溶性灰分不得過(guò)1.5%，醇溶性浸出物(稀乙醇、熱浸)不得少于20.0%。

本次研究性狀鑒別、顯微鑒別與標(biāo)準(zhǔn)差異不大，故未納入趕黃草標(biāo)準(zhǔn)升級(jí)研究之中。

[1]王國(guó)強(qiáng).全國(guó)中草藥匯編(卷二)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2014:768.

[2] 柯發(fā)敏,余昕,侯杰榮,等.趕黃草中沒(méi)食子酸的提取方法比較研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2016,39(7):75-77.

[3] 唐勇,向小紅,李國(guó)春,等.趕黃草不同濃度乙醇提取物中沒(méi)食子酸含量的測(cè)定[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2016,39(6):575-577.

[4] 柯發(fā)敏,余昕,侯杰榮,等.趕黃草中槲皮素的提取工藝研究[J].廣東化工,2016,4(15):29-30.

[5] 歐麗蘭,莊元春,朱燁,等.趕黃草葉的生藥鑒定[J].中藥材,2010, 3(3):536-538.

[6] 鄭雪花,楊君,楊躍輝.沒(méi)食子酸藥理作用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2017,37(1):94-98.