郭娜娜,劉學軍,杜毓峰,郝小燕,張帆,林白陽,郭慧
(1.山西醫科大學,山西 太原 030000;2.山西醫科大學第一醫院老年病科,山西 太原 030001)
肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,呈現年輕化趨勢[1],且出現消化道癥狀及營養不良,因此肺與腸的關系成為該研究的切入點。中醫理論贊同肺腸具有相同的黏膜免疫機制,近年對腸屏障損傷的研究多在休克、燒傷、嚴重創傷以及多器官功能障礙綜合征等急性重癥中進行,并多將損害歸因于局部腸黏膜缺血、缺氧和腸內營養底物缺乏。但有關肺癌對腸黏膜屏障影響的規律和機制研究卻少見報道。目前自由基與肺癌的關系成為研究熱點[2],為了解肺癌合并腸黏膜屏障功能障礙是否與自由基有關,設計小鼠肺癌模型試驗,通過測定血清MDA水平,光鏡下觀察小鼠小腸組織的病理形態,分析腸黏膜緊密連接蛋白ZO-1、Occluden-1的表達,綜合分析肺癌對腸黏膜屏障的影響。
1.1 臨床材料
1.1.1 實驗動物 健康C57BL/6雄性小鼠(6周齡)16只(北京維通利華實驗動物技術有限公司,體質量20~25 g,動物協議由實驗動物倫理委員會進行審查和批準,飼養于溫度穩定在18~20℃,12小時明暗周期的塑料籠中,自由攝食飲水)。
1.1.2 主要材料及試劑 Lewis肺癌細胞(LLC)從上海細胞生物學研究所(上海,中國)購得;10%胎牛血清;DMEM培養基;0.25%胰酶、血清試劑盒由南京建成生物公司提供;一抗:多克隆兔抗Occludin抗體,多克隆兔抗ZO1抗體購于武漢博士德公司;二抗:辣根酶標記山羊抗兔IgG購于北京諾博萊德科技有限公司、SABC免疫組化染色試劑盒購于中杉金橋公司;……